【正文】 ⑹石蠟切片HE染色的優(yōu)良率（甲、乙級(jí)切片所占的比率）應(yīng)≥90%。標(biāo)簽上應(yīng)清楚顯示有關(guān)的病理號(hào)及其次級(jí)號(hào)；標(biāo)簽上的病理號(hào)應(yīng)準(zhǔn)確無誤，無涂改。⑷必須在載玻片的一端牢貼標(biāo)簽。封片時(shí)必須進(jìn)行操作人員和局部環(huán)境的二甲苯污染防護(hù)。⑶載玻片自二甲苯中取出后，應(yīng)立即用潔凈、光亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹膠濕封載玻片。⑵嚴(yán)格執(zhí)行HE染色流程，用顯微鏡控制細(xì)胞核的蘇木精染色質(zhì)量。鈣鹽和細(xì)菌可呈藍(lán)色或紫藍(lán)色。(26)中性樹膠封固上述(12)和(13)項(xiàng)可省去，但(14)的沖水時(shí)間須延長至10～15min（細(xì)胞核顯示更清晰）；②項(xiàng)可用無水乙醇代替，北方地區(qū)可省略。(24)二甲苯Ⅱ： 3～5 min。(22)無水乙醇Ⅱ： 3～5min。(20)95%乙醇Ⅱ： 2～3min。(18)80%乙醇： l～2s。(16)%伊紅液染色： 1～3min。(14)流水沖洗： 1～2min。(12)稍水洗: l～2s。(10)流水洗去蘇木精液： 1min。(8)蒸餾水： 1min。(6)95%乙醇Ⅱ： l～3min。(4)無水乙醇Ⅱ： 1～3min。(2)二甲苯Ⅱ： 5～10min。九）蘇木精—伊紅（HE）染色HE染色是應(yīng)用最廣泛的組織病理學(xué)常規(guī)染色技術(shù)。⑥ 脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。④ 脫鈣時(shí)間不可過長。② 脫鈣組織與脫鈣液的體積比I：30。⒉骨髓組織脫鈣可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占85%）、甲醛（占lO%）和冰醋酸（占5%）的混合液中（同時(shí)進(jìn)行固定和脫鈣）。⑦ 按常規(guī)脫水。⑤ 移入5%甲明礬液，2～4h。③ 將骨片置于5%硝酸（急需時(shí)可置于37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可進(jìn)入時(shí)為止，需12～24h(小塊骨組織脫鈣僅需2～3h)，其間可更新脫鈣液2—3次。1 常規(guī)脫鈣法① 將骨組織鋸成薄片(約lcmlcm)。八）脫鈣方法骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進(jìn)行切片。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的5～10倍以上，并應(yīng)經(jīng)常過濾，保持清潔；應(yīng)經(jīng)常檢查試劑的濃度，及時(shí)更新。C 使用自動(dòng)組織處理機(jī)時(shí)：①合理設(shè)定運(yùn)行時(shí)間（充分利用夜間）。B 要嚴(yán)防因停電、機(jī)械故障等造成的組織塊損壞。⑩石蠟Ⅲ 90min。⑧石蠟I30min。⑥二甲苯I30min。④無水乙醇I60min。②95%o乙醇工 260min。步驟的次序和各步驟的持續(xù)時(shí)間，總計(jì)需要14h。須做特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預(yù)制蠟片備用。要使用質(zhì)量好的切片機(jī)，規(guī)范地切片，精心維護(hù)切片機(jī)。切片過程中遇到的困難首先應(yīng)注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。L 注意事項(xiàng)。K 將置放了蠟片的載玻片呈45。蠟片與載玻片之間無氣泡。I 將蠟片附貼于涂有蛋白甘油等處理過的載玻片上（HE染色時(shí)酌情使用，可省略）。切出的蠟片應(yīng)連續(xù)成帶狀，完整無缺，厚度適宜（3～5μm）、均勻，無刀痕、顫痕、皺褶、開裂、缺損、松解等。修塊粗切片的厚度為1520μm［注意：對(duì)于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進(jìn)行的深切片），應(yīng)盡量少修塊，以盡量好地獲得有關(guān)病變的連續(xù)性]。F 修塊（粗切）。夾角）。為宜）。B 載玻片必須潔凈、光亮。⑥切片A 切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。f 熔蠟時(shí)不得使用明火，以防燃燒。浸蠟I用軟蠟（熔點(diǎn)為45～50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點(diǎn)為56～58℃）。c 包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)?。發(fā)生包埋差錯(cuò)時(shí)，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時(shí)處置。a 應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。G 使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說明書操作。E 將病理號(hào)小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)（編號(hào)應(yīng)清晰可見）。D 從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟塊），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留1～2mm石蠟為宜） 。B 將與組織塊相關(guān)的病理號(hào)小條置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。⑤包埋A 先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入熔蠟中，應(yīng)將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。C 石蠟Ⅲ(56～58℃)：60min。④浸蠟A 石蠟I (45～50℃)：60min。C 二甲苯Ⅲ：20min。③透明 A 二甲苯I：20min。G 無水乙醇Ⅲ：30～60min。E 無水乙醇I：30～60min。C 95%乙醇I：60～120min。②脫水（常溫下）A 乙醇一甲醛(AF)液固定：60～120min。組織切片制備及其HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。⑤包埋。③透明。七）包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備①水洗。如果HE切片未見CIN/CIS病變時(shí)，請(qǐng)上級(jí)醫(yī)師復(fù)診后發(fā)報(bào)告。冰凍取材特殊病變（組織太小、太少、病變特殊、有系線標(biāo)記等標(biāo)本）用紗布包好放回標(biāo)本袋，術(shù)后取材時(shí)必須全取，另外再補(bǔ)取幾塊剩余標(biāo)本。腫瘤部位、大小、形態(tài)等要特別注意。，可分別取切緣、周圍脂肪、送檢淋巴結(jié)、送檢其余組織（若為乳腺組織則取乳頭皮膚、切口皮膚、腋區(qū)脂肪、送檢淋巴結(jié)）。六）取材順序的統(tǒng)一規(guī)定，1號(hào)蠟塊一律取腫瘤組織，且其中一盒只放一塊大小適合的典型病變組織（供隨后的免疫組化和科研用），同號(hào)的另外包埋盒內(nèi)可放多塊組織。例如，①組織較少、全部包埋制片者，可注明“全”字；②針吸、內(nèi)鏡取材或少量易碎的組織，須用軟紙妥善包裹（以防制片過程中丟失），可注明“包”字；③取材后尚有存留的標(biāo)本，可注明“留”字等。新鮮標(biāo)本攝影后，將剪開、展平的標(biāo)本用大頭針釘在薄木板上，置于4%中性甲醛中漂?。?biāo)本朝下方）固定過夜。①腫瘤：包括的整體和切面特點(diǎn)及其解剖學(xué)關(guān)系。管壁和囊壁組織應(yīng)立埋。(10)組織塊的切面應(yīng)平整。(9)切取組織塊的數(shù)量，依巨檢病變的具體情況酌定，一般以滿足診斷需要為準(zhǔn)。(7)完整切除的腫瘤標(biāo)本，切取的組織塊應(yīng)包括其包膜，較大的腫瘤應(yīng)酌情多處包膜取材。(5)必要時(shí)，繪簡圖說明巨檢病變的特點(diǎn)和解剖學(xué)關(guān)系，并注明取材部位的編號(hào)，以便鏡檢時(shí)定位。有的臟器，例如前列腺、胰腺、甲狀腺等，應(yīng)間隔一定距離（甚至間距2mm左右）做多個(gè)平行切面，檢查有無微小腫物。(3)檢查切面。(2)描述和記錄標(biāo)本的大小(三維長度，mm或cm)、形狀、色澤、表面、質(zhì)地等，球形或近于球形的結(jié)節(jié)狀標(biāo)本可測其直徑(mm或cm)。4．大標(biāo)本通常為手術(shù)切除或尸檢取出的器官和（或）腫瘤。(4)黏膜和皮膚組織應(yīng)予“立埋”，即將黏膜面與包埋盒的底面垂直，使其切片同時(shí)顯示檢材的各層結(jié)構(gòu)。(2)少量的小標(biāo)本，應(yīng)全部取材制片。3．小標(biāo)本和不完整的器官組織通常為活檢組織，包括：①子宮內(nèi)膜的刮取物；②淺在或深在部位的穿刺物；③皮膚組織；④淺表的或經(jīng)由內(nèi)鏡鉗取或切取的黏膜組織；⑤經(jīng)由微創(chuàng)手術(shù)由器官和（或）腫瘤中切取的多量不完整組織等。五）病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材技術(shù)規(guī)范概述1．本內(nèi)容適用于活檢標(biāo)本的肉眼檢查（巨檢）和組織學(xué)取材。，應(yīng)遵照醫(yī)療生物垃圾處理的有關(guān)規(guī)定處理。取材剩余的標(biāo)本一般保存至病理學(xué)診斷報(bào)告書發(fā)出后兩周。、核查，確保所取組織塊及其編號(hào)標(biāo)簽準(zhǔn)確地置入用于脫水的容器（脫水盒等）內(nèi)?！[瘤學(xué)分冊(cè)第3章第四節(jié)的要求進(jìn)行操作。6．細(xì)小標(biāo)本取材時(shí)，可用伊紅點(diǎn)染并用軟薄紙妥善包裹。必要時(shí)，應(yīng)在活檢記錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標(biāo)示取材部位。對(duì)于有疑問的標(biāo)本，在消除疑問前