【正文】 常用病 理學(xué)技術(shù)操作規(guī)范 20 任報告，設(shè)法予以補(bǔ)救。 ? 石蠟切片 HE染色的優(yōu)良率（甲、乙級切片所占的比率）應(yīng)≥ 90%。標(biāo)簽上應(yīng)清楚顯示有關(guān)的病理號及其次級號；標(biāo)簽上的病理號應(yīng)準(zhǔn)確無誤，無涂改。 ?必須在載玻片的一端牢貼標(biāo)簽。封片時必須進(jìn)行操作人員和局部環(huán)境的二甲苯污染防護(hù)。 ?載玻片自二甲苯中取出后，應(yīng)立即用潔凈、光 亮的蓋玻片和稠度適宜的中性樹膠濕封載玻片。 ?嚴(yán)格執(zhí)行 HE染色流程，用顯微鏡控制細(xì)胞核的蘇木精染色質(zhì)量。鈣鹽和細(xì)菌可呈藍(lán)色或紫藍(lán)色。 (26)中性樹膠封固 上述 (12)和 (13)項可省去，但 (14)的沖水時間須延長至 10～ 15min（細(xì)銀川市第三人民醫(yī)院 常用病 理學(xué)技術(shù)操作規(guī)范 19 胞核顯示更清晰）；②項可用無水乙醇代替，北方地區(qū)可省略。 (24)二甲苯Ⅱ： 3～ 5 min。 (22)無水乙醇Ⅱ： 3～ 5min。 (20)95%乙醇 Ⅱ ： 2～ 3min。 (18)80%乙醇： l～ 2s。 (16)%伊紅液染色： 1～ 3min。 (14)流水沖洗： 1～ 2min。 (12)稍水洗 : l～ 2s。 (10)流水洗去蘇木精液： 1min。 (8)蒸餾水： 1min。 (6)95%乙醇 Ⅱ ： l～ 3min。 (4)無水乙醇 Ⅱ ： 1～ 3min。 (2)二甲苯 Ⅱ ： 5～ 10min。 九）蘇木精 —伊紅（ HE）染色 HE染色是應(yīng)用最廣泛的組織病理學(xué)常規(guī)染色技術(shù)。 ⑥ 脫鈣后的組織必須用流水充分沖洗。 ④ 脫鈣時間不可過長。 ② 脫鈣組織與脫鈣液的體積比 I： 30。 ⒉骨髓組織脫鈣可浸泡于苦味酸乙醇飽和液（占 85%）、甲醛（占 lO%）和冰醋酸（占 5%）的混 合液中（同時進(jìn)行固定和脫鈣）。 ⑦ 按常規(guī)脫水。 ⑤ 移入 5%甲明礬液， 2～ 4h。 ③ 將骨片置于 5%硝酸（急需時可置于 37℃溫箱）中脫鈣，至用針輕刺可進(jìn)入時為止，需 12～ 24h(小塊骨組織脫鈣僅需 2～ 3h)，其間可更銀川市第三人民醫(yī)院 常用病 理學(xué)技術(shù)操作規(guī)范 17 新脫鈣液 2—3次。 ⒈ 常規(guī)脫鈣法 ① 將骨組織鋸成薄片 (約 lcm lcm )。 八）脫鈣方法 骨和其他鈣化組織，通常需要脫去鈣鹽后進(jìn)行切片。③乙醇、二甲苯和熔蠟的容積，要大于組織塊總體積的 5～ 10倍以上，并應(yīng)經(jīng)常過濾，保持清潔；應(yīng)經(jīng)常檢查試劑的濃度，及時更新。 C 使用自動組織處理機(jī)時：①合理設(shè)定運(yùn)行時間（充分利用夜間）。 B 要嚴(yán)防因停電、機(jī)械故障等造成的組織塊損壞。 ⑩ 石蠟Ⅲ 90min。 ⑧ 石蠟 I30min。 銀川市第三人民醫(yī)院 常用病 理學(xué)技術(shù)操作規(guī)范 16 ⑥ 二甲苯 I30min。 ④ 無水乙醇 I60min。 ② 95%o乙醇工 2 60min。 步驟的次序和各步驟的持續(xù)時間，總計需要 14h。須做特殊染色、免疫組化染色等的病例，可預(yù)制蠟 片 備用。要使用質(zhì)量好的切片機(jī)，規(guī)范地切片，精心維護(hù)切片機(jī)。切片過程中遇到的困難首先應(yīng)注意從切片前的上述各環(huán)節(jié)中尋找原因。 L 注意事項。 K 將置放了蠟片的載玻片呈 45。蠟片與載玻片之間無氣泡。 I 將蠟片附貼于涂有蛋白甘油 等 處理過的載玻片上（ HE染色時酌情使用，可省略）。切出的蠟片應(yīng)連續(xù)成帶狀，完整無缺，厚度適宜（ 3～ 5μ m）、均勻，無刀痕、顫痕、皺褶、開裂、缺損、松解等。修塊粗切片的厚度為 1520μ m［ 注意：對于醫(yī)囑再次深切片（特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進(jìn)行的深切片），應(yīng)盡量少修塊，以盡量好地獲得有關(guān)病變的連續(xù)性 ]。 F 修塊（粗切）。 夾角）。 為宜）。 B 載玻片必須潔凈、光亮。 ⑥ 切片 A 切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。 f 熔蠟時不得使用明火，以防燃燒。浸蠟 I用軟蠟（熔點(diǎn)為 45～ 50℃），浸蠟Ⅱ、Ⅲ和包埋用蠟均用硬蠟（熔點(diǎn)為 56～ 58℃）。 c 包埋過程要操作迅速，以免組織塊尚未埋妥前熔蠟?zāi)?。發(fā)生包埋差錯時，必須立即與取材醫(yī)師和病理科當(dāng)班負(fù)責(zé)人取得聯(lián)系，及時處置。 a 應(yīng)將組織塊嚴(yán)格分件包埋。 G 使用包埋機(jī)的方法按有關(guān)廠商的說明書操作。 E 將病理號小條牢固地烙貼在蠟塊一側(cè)（編號應(yīng)清晰可見）。 D 從包埋模具中取出凝固的包埋蠟塊（簡稱蠟塊），用刀片去除組織塊周圍的過多石蠟（組織塊周圍保留 1～ 2mm石蠟為宜） 。 B 將與組織塊相關(guān)的病理號小條 置入包埋模具內(nèi)熔蠟的一側(cè)。 ⑤ 包埋 A 先將熔化的石蠟傾入包埋模具中，再用加熱的彎曲鈍頭鑷子輕輕夾取已經(jīng)過浸蠟的組織塊，使組織塊的最大面或被特別指定處的組織面向下埋入銀川市第三人民醫(yī)院 常用病 理學(xué)技術(shù)操作規(guī)范 13 熔蠟中，應(yīng)將組織塊平整地置放于包埋模具底面的中央處。 C 石蠟Ⅲ (56～ 58℃ )： 60min。 ④ 浸蠟 A 石蠟 I (45～ 50℃ )： 60min。 C 二甲苯Ⅲ： 20min。 ③ 透明 A 二甲苯 I： 20min。 G 無水乙醇Ⅲ： 30～ 60min。 E 無水乙醇 I： 30～ 60min。 C 95%乙醇 I： 60～ 120min。 ② 脫水（常溫下） A 乙醇一甲醛 (AF)液固定： 60～ 120min。 組織切片制備及其 HE染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理， 2m以內(nèi)不得有明火，局部環(huán)境應(yīng)有良好的通風(fēng)和消防設(shè)施。 ⑤ 包埋。 ③ 透明。 七）包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備 ① 水洗。如果 HE切片未見 CIN/CIS病變時，請上級醫(yī)師復(fù)診后發(fā)報告。 冰凍取材特殊病變（組織太小 、太少、病變特殊、有系線標(biāo)記等標(biāo)本）用紗布包好放回標(biāo)本袋，術(shù)后取材時必須全取，另外再補(bǔ)取幾塊剩余標(biāo)本。腫瘤部位、大小、形態(tài)等要特別注意。 ，可分別取切緣、周圍脂肪、送檢淋巴結(jié)、送檢其余組織（若為乳腺組織則取乳頭皮膚、切口皮膚、腋區(qū)脂肪、送檢淋巴結(jié)）。 六）取材順序的統(tǒng)一規(guī)定 ， 1號蠟塊一律取腫瘤組織，且其中一盒只放一塊大小適合的典型病變組織（供隨后的免疫組化和科研用），同號的另外包埋盒內(nèi)可放多塊組織。例如，①組織較少、全部包埋制片者，可注明“全”字；②針吸、內(nèi)鏡取材或少量易碎的組織，須用軟紙妥善包裹（以防制片過程中丟失），可注明“包”字；③取材后尚有存留的標(biāo)本，可注明“留”字等。新鮮標(biāo)本攝影后，將剪開、展平的標(biāo)本用大頭針釘在薄木板上，置于 4%中性甲醛中漂?。?biāo)本朝下方）固定過夜。 ①腫瘤：包括的整體和切面特點(diǎn)及其解剖學(xué)關(guān)系。管壁和囊壁組織應(yīng)立埋。 (10)組織塊的切面應(yīng)平整。 (9)切取組織塊的數(shù)量，依巨檢病變的具體情況酌定，一般以滿足診斷需要為準(zhǔn)。 (7)完整切除的腫瘤標(biāo)本，切取的組織塊應(yīng)包括其包膜，較大的腫瘤應(yīng)酌情多處包膜取材。 (5)必要時，繪簡圖說明巨檢病變的特點(diǎn)和解剖學(xué)關(guān)系，并注明取材部位的編號，以便鏡檢時定位。有的臟器，例如前列腺、胰腺、甲狀腺等，應(yīng)間隔一定距離（甚至間距 2mm左右）做多個平行切面，檢查有無微小腫物。 (3)檢查切面。 (2)描述和記錄標(biāo)本的大小 (三維長度， mm或 cm)、形狀、色澤、表面、質(zhì)地等，球形或近于球形的結(jié)節(jié)狀標(biāo)本可測其直徑 (mm或 cm)。 4．大標(biāo)本通常為手術(shù)切除或尸檢取出的器官和（或）腫瘤。 (4)黏膜和皮膚組織應(yīng)予“立埋”，即將黏膜面與包埋盒的底面垂直，使其切片同時顯示檢材的各層結(jié)構(gòu)。 (2)少量的小標(biāo)本，應(yīng)全部取材制片。 銀川市第三人民醫(yī)院 常用病 理學(xué)技術(shù)操作規(guī)范 8 3．小標(biāo)本和不完整的器官組織通常為活檢組織，包括：①子宮內(nèi)膜的刮取物；②淺在或深在部位的穿刺物；③皮膚組織；④淺表的或經(jīng)由內(nèi)鏡鉗取或切取的黏膜組織；⑤經(jīng)由微創(chuàng)手術(shù)由器官和（或）腫瘤中切取的多量不完整組織等。 五）病理標(biāo)本的肉眼檢查和組織學(xué)切片取材技術(shù)規(guī)范概述 1．本內(nèi)容適用于活檢 標(biāo)本 的肉眼檢查（巨檢）和組織學(xué)取材。 污染源，應(yīng)遵照醫(yī)療生物垃圾處理的有關(guān) 規(guī)定處理。取材剩余的標(biāo)本一般保存至病理學(xué)診斷報告書發(fā)出后兩周。 醫(yī)師 和記錄 人員應(yīng)相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號標(biāo)簽準(zhǔn)確地置入用于脫水的容器（脫水盒等）內(nèi)。 臨床技術(shù)操作規(guī)范 —腫瘤學(xué)分冊 第 3章第四節(jié)的要求進(jìn)行操作。 6．細(xì)小標(biāo)本取材時，可用伊紅點(diǎn)染并用軟薄紙妥善包裹。必要時，應(yīng)在活檢記錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標(biāo)示取材部位。對于有疑問的標(biāo)本，在消除疑問前不得進(jìn)行巨檢和取材，應(yīng)將有關(guān)標(biāo)本連同其申請單一并暫時妥為保存。若 對申請單填寫的內(nèi)容和（或）標(biāo)本有疑問（例如患者姓名有