【正文】 [36]： 1． 靶向性：靶向性是脂質(zhì)體作為藥物載體最突出的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)。 6. 2 脂質(zhì)體 概述 早在 60 年代初，英國(guó) Bangham 等發(fā)現(xiàn)，磷脂分散在水中能形成多層微囊，每一層均為磷脂雙分子層，各層之間被水相分開(kāi)，這種具有類(lèi)似生物膜的磷脂雙分子結(jié)構(gòu)稱(chēng)為脂質(zhì)體。 進(jìn)一步的研究重點(diǎn)需要了解 SLN進(jìn)入體內(nèi)后與體內(nèi)的生物環(huán)境之間的相互作用（吸附 /解吸附過(guò)程，酶解，聚合，和內(nèi)源性的脂類(lèi)載體系統(tǒng)之間的作用）。包封率受多種因素的影響，如：藥物在熔融脂質(zhì)中溶解度、藥物與載體在熔融時(shí)的相容性、 SLN的理化結(jié)構(gòu)、脂質(zhì)多晶型、勻質(zhì)溫度、水相乳化劑濃度等。樣品的稀釋或溶劑的蒸發(fā)會(huì)改變共存膠態(tài)體系之間的平衡和脂質(zhì)的物理狀態(tài)。 綜上所述看出： SLN的明顯優(yōu)點(diǎn)是其成分都是生物相容的，制備方法快速有效，可以大規(guī)模生 181 產(chǎn)，避免使用有機(jī)溶劑和有可能生產(chǎn)出高濃度的產(chǎn)品等方面。 PLA 納米粒、 PLGA 納米粒和SLN 使人粒性白細(xì)胞的存活率降低 50%的濃度分別為 %， %，和大于 10%，這說(shuō)明 SLN 的毒性最低 [34,35]，更適合作 為靜脈給藥系統(tǒng)藥物的載體。 SLN 的毒性 SLN 是用毒性低，生物相容性好的脂質(zhì)材料為載體，同聚合物納米粒相比， SLN 的毒性大大降低。室溫下制備納米粒可以避免藥物從水相到油相的反復(fù)分配過(guò)程，因此藥物的突釋效應(yīng)很小。聚集在脂質(zhì)核外層或表面的藥物以藥物突釋的形式釋放出來(lái)，分散在脂質(zhì)核內(nèi)的藥物則緩慢地釋放。當(dāng)溫度下降 到脂質(zhì)結(jié)晶溫度時(shí)，脂質(zhì)基質(zhì)和溶解在其中的藥物開(kāi)始形成固態(tài)的脂質(zhì)核，從而制得固態(tài)脂質(zhì)納米粒。這意味著溫度越高、表面活性劑濃度越大，納米粒的載藥量越低。用熱勻法制備納米粒時(shí)，油相中的藥物會(huì)重新溶解在水相中。 值得注意的 是，納米粒粒徑對(duì)藥物釋放的影響很小，藥物釋放曲線形狀主要受制備材料和制備條件的影響，如表面活性劑濃度、制備溫度和脂質(zhì)基質(zhì)的性質(zhì)。在脫氫皮質(zhì)醇納米粒中，藥物被緩慢釋放而無(wú)明顯的突釋效應(yīng)，但是釋放曲線上開(kāi)始仍會(huì)有一個(gè)釋放較快的階段，隨之是一個(gè)相對(duì)緩慢的階段。這證明 SLN 可以應(yīng)用于藥物的緩控釋制劑，并通過(guò)改變脂質(zhì)、表面活性劑濃度和制備時(shí)的一些參數(shù)（如溫度）來(lái)調(diào)節(jié)藥物釋放特性。不管制備方法是熱勻法還是冷勻法，制備的含丁卡因和依托度酸的納米粒都會(huì)遇到藥物突釋的問(wèn)題。這樣形成的脂質(zhì)納米粒具有一個(gè)脂質(zhì)殼和藥物富集的核。納米乳的冷卻會(huì)導(dǎo)致藥物在脂質(zhì)中產(chǎn)生過(guò)飽和現(xiàn)象，進(jìn)而藥物先于脂質(zhì)沉淀下來(lái)，進(jìn)一步的冷卻會(huì)使脂質(zhì)重新結(jié)晶，包圍含藥的核形成膜的結(jié)構(gòu)。大多數(shù)體外釋放機(jī)理的研究都是由 Mehnert 等 [3133]以丁卡因和依托度酸為模型藥物完成的。通過(guò)調(diào)節(jié)溫度或減少 SLN 中的水分，促使納米粒中脂質(zhì)晶體構(gòu)型的轉(zhuǎn)變，使其晶型由α變?yōu)棣?，促?藥物釋放，從而把一個(gè)普通的 SLN 變成一個(gè)智能的藥物載體系統(tǒng)。一般來(lái)說(shuō)，長(zhǎng)鏈脂肪酸的晶型轉(zhuǎn)變速度比短鏈脂肪酸慢。納米粒中脂質(zhì)結(jié)晶部分為α構(gòu)型，而常規(guī)狀態(tài)下的結(jié)晶大部分為β ’構(gòu)型，并很快轉(zhuǎn)變?yōu)棣聵?gòu)型。 多晶型脂質(zhì)的晶型也是決定載藥量的一個(gè)重要因素。 179 和脂質(zhì)化學(xué)性質(zhì)相關(guān)的脂質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)無(wú)疑是決定脂質(zhì)載藥量的決定性因素，它決定在脂質(zhì)晶體形成過(guò)程中，藥物是被排除在晶體之外還是被包封在晶體里。 脂質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)也很重要，因?yàn)榻Y(jié)晶性良好的脂質(zhì)可以形成嚴(yán)密的晶格，這樣導(dǎo)致藥物的溢出。一般來(lái)講，藥物在熔融物中的溶解量要高一些，因?yàn)楫?dāng)熔融物溫度下降時(shí)溶解的藥物量會(huì)隨之減少，脂質(zhì)凝固后藥物的溶解度甚 至更低。 SLN 藥物的釋放 影響 SLN 載藥量的因素很多，其中主要有：藥物在熔融油相中的溶解度；藥物熔融物和脂質(zhì)基質(zhì)熔融物的可混合性；固態(tài)脂質(zhì)基質(zhì)的物理和化學(xué)結(jié)構(gòu)；脂質(zhì)材料的晶型等。另外，脂質(zhì)納米粒的體內(nèi)耐受性很好，適于裝載對(duì)肺巨噬細(xì)胞靶向的藥物。 脂質(zhì)納米粒的優(yōu)點(diǎn)在于它可以控制藥物在肺部的釋放，延長(zhǎng)藥物在肺部的釋放時(shí)間。結(jié)果表明霧化前和霧化后納米粒的粒徑分布幾乎相同，僅有輕微的粒子聚集現(xiàn)象發(fā)生，這對(duì)肺部給藥沒(méi)有影響。 4．肺部給藥 迄今為止，脂質(zhì)納米粒的肺部給藥研究報(bào)道不多。電子顯微鏡表明 SLN 分散體在 32℃干燥后變成一層致密的膜，這和前面提到的球形結(jié)構(gòu)不同。還可以調(diào)節(jié)藥物在皮膚中的釋放，從而提高藥物在特定皮膚層中的分配?？上♂屩苽涑筛鄤?，不須制備成凝膠劑。這種體系的流變學(xué)特性和傳統(tǒng)的皮膚用藥相似。一般來(lái)講，脂質(zhì)含量的增加會(huì)導(dǎo)致粒徑的增大。在大多數(shù)情況下， SLN 分散體被制備成軟膏或凝膠等劑型，確保使用的方便，而這個(gè)制備過(guò)程使 SLN 的濃度進(jìn)一步減小。 SLN 的粒徑很小， 178 具有一定的生物粘附性，比較容易粘附到皮膚上形成薄膜，它可以修復(fù)皮膚表面破損的脂質(zhì)層，并且具有一定的屏蔽作用。 SLN 被認(rèn)為是替代脂質(zhì)體的新一代載藥系統(tǒng)。大鼠口服后，達(dá)峰時(shí)間 ()較 Sandoz公司的 SandimmunNeroalOR()顯著延長(zhǎng)，相對(duì)生物利用度為 80%[29]。同時(shí)發(fā)現(xiàn)，組織中藥物 AUC和 MRT顯著高于普通溶液，尤以腦部 藥物濃度上升幅度最大。許多實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，即使 SLN在一定程度聚合后，其生物利用度仍然很高。一般認(rèn)為，酸性的、高離子強(qiáng)度的胃液微環(huán)境，易導(dǎo)致納米粒聚合。 2．口服給藥 SLN的口服劑型包括水性的分散體和含 SLN的傳統(tǒng)劑型形式，如片劑、丸劑或膠囊劑等。 SLN在體外釋藥 154h后，納米粒內(nèi)的藥物仍以原形存在，說(shuō)明 SLN可提高藥物的穩(wěn)定性。小鼠靜注后 ,靶向效率從大到小依次為：心、腦、全血、肝、脾、腎和肺。 喜樹(shù)堿受酸堿影響有兩種存在形式：有抗腫瘤活性的內(nèi)酯型與無(wú)活性的羧酸鹽型。所以在制備注射給藥的 SLN 時(shí)必須嚴(yán)格控制粒徑及乳化劑和輔助乳化劑的比例，防止膠凝。低粘度的 SLN 分散體在注射針頭內(nèi)會(huì)發(fā)生凝膠化，迅速變成一種高粘度的、含有會(huì)對(duì)人體造成危險(xiǎn)的大粒子的混懸液。最細(xì)毛細(xì)血管的管徑為 9 個(gè)微米，從 177 安全的角度考慮，粒徑必須全部在亞微米級(jí)范圍內(nèi)。脂質(zhì)液滴（納米乳）轉(zhuǎn)變成 為固體（ SLN）以后，藥物的擴(kuò)散系數(shù)減小，從而減慢了藥物的釋放。此外， SLN 還可以局部給藥和肺部給藥 [27]。這可能是由于一方面比較易于監(jiān)控 SLN 在血液中的行為以及它們可能被組織攝取，另一方面它也是治療中最常用的給藥途徑之一。 SLN 的給藥途徑較靈活，包括胃腸道的和非胃腸道的。一般而言，極性微粒不易被吞噬，ζ電位越高，吞噬越少；表面雙親或親水性的納米粒在血中循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)。從而加速網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)（ RES）的識(shí)別，最終被巨噬細(xì)胞吞噬而從體循環(huán)中被清除掉。 SLN 的體內(nèi)行為 納米粒進(jìn)入體內(nèi)后，被機(jī)體視為異物，人 體產(chǎn)生抗體與之吸附。從 ESR 譜可以得知，擴(kuò)散系數(shù)的范圍大約在 或更高，這就意味著被包裹的分子最多幾秒鐘就能到達(dá)界面。但是對(duì)于膠態(tài) 藥物載體來(lái)說(shuō)，影響藥物穩(wěn)定性的因素很多，而且在相同條件下， SLN 分散體的表面積比納米乳要大的多，這是因?yàn)?SLN 粒子的形狀是非球形的。載藥系統(tǒng)只有抑制藥物的再分配，才能對(duì)藥物起到保護(hù)作用 [25，26]。藥物降解動(dòng)力學(xué)由藥物的化學(xué)活性和藥物在水相或脂 /水界面上的濃度等因素決定。所以應(yīng)對(duì)不同膠態(tài)分配過(guò)程的動(dòng)力學(xué)進(jìn)行深入的研究。在最近的一項(xiàng)十六圖 61 不同粒徑的四丁酚醛穩(wěn)定的三肉豆蔻酸甘油酯 SLN 的 DSC 圖 t / ℃ 圖 62 不同粒徑的四丁酚醛穩(wěn)定的三肉豆蔻酸甘油酯 SLN 的 X射線衍射圖 強(qiáng) 度 通 道 176 酸鯨蠟（醇）酯 SLN的電子自旋共振（ ESR）的研究中發(fā)現(xiàn)，親脂性的硝基化合物只位于膠束中，而不是在脂質(zhì)中。甘膽酸鹽和卵磷脂穩(wěn)定的體系以及其它相關(guān)的體系中也發(fā)現(xiàn)有混合膠束。因此表面活性分子（如 SDS）會(huì)以三種形式出現(xiàn)，即：①在脂質(zhì)的表面；②形成膠束；③表面活性劑單體的形式。 6． 幾種膠態(tài)共存 幾種膠態(tài)種類(lèi)的出現(xiàn)是一個(gè)重要的、值得深思的現(xiàn)象，但是 這方面還沒(méi)有被引起足夠的重視。但在一般情況下，該體系中加入適量的粒子型或者非離子型表面活性劑，如甘膽酸鈉、四丁醛或 poloxamer 則可防止膠凝。因此單獨(dú)使用磷脂作為穩(wěn)定劑并不能使該體系穩(wěn)定。在 ， 和 有較強(qiáng)的反射；另外在大多數(shù)情況下，在 處有一個(gè)小的衍射峰（圖 62[23]）。 三脂肪酸甘油酯 SLN 粒徑減小時(shí) X 射線衍射曲線也發(fā)生改變，小角 X 衍射峰變寬，且向小角位移。 對(duì)于膠體分散體系來(lái)講，粒徑和熔化溫度的關(guān)系可用 GibbsThomson 方程來(lái)描述： T 是粒徑為 r 時(shí)的熔化溫度， T0 為脂質(zhì)在相同外壓下的熔化溫度，γ sl 為固－液的界面張力， VS為固體的體積，Δ Hfus 為熔化焓。這些吸收峰是不連續(xù)的。 4．粒徑的影響 正如脂質(zhì)在塊體材料和膠體體系中理化性質(zhì)發(fā)生改變一樣，在膠體體系中， 粒徑的大小同樣能影響脂質(zhì)的性質(zhì)。電鏡顯示，α 型同轉(zhuǎn)變后的β 型相比，粒子較小并且內(nèi)部結(jié)構(gòu)不均一，α 晶型粒子為球形，核不規(guī)則。 由于甘膽酸鈉穩(wěn)定的 SLN α 晶型的穩(wěn)定性較高，因此可以用來(lái)研究經(jīng)過(guò)多晶型轉(zhuǎn)化后基質(zhì)的結(jié)構(gòu)及粒子的形狀。因此，表面活性劑不但對(duì)納米粒的粒徑和穩(wěn)定性有影響，而且對(duì)粒子的內(nèi)部結(jié)構(gòu)也有重要影響。例如，制備三棕櫚酸甘油酯 SLN 時(shí)， 174 當(dāng)用 Cremophor EL 作為穩(wěn)定劑，α 晶型消失；如果用甘膽酸鈉為穩(wěn)定劑時(shí)，則該體系主要以α 晶型形式存在。通過(guò)示差熱掃描，我們可以判斷脂質(zhì)晶格中不同孔隙的長(zhǎng)度。 DSC 和 X射線衍射廣泛地應(yīng)用于考察脂質(zhì)的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。按以下的順序，熱力學(xué)穩(wěn)定性依次增加，脂質(zhì)的密度依次增加，藥物的包封率依次降低： 過(guò)冷熔融物→α晶型→β ’ 晶型→β晶型 因?yàn)榱Ｗ拥牧教貏e小，而且存在乳化劑，脂質(zhì)的結(jié)晶和晶型的轉(zhuǎn)變受到很大的阻礙。 上述結(jié)果表明， SLN 無(wú)論從熔化到重結(jié)晶還 是固化后晶型轉(zhuǎn)變及老化現(xiàn)象，都具有很高的可變性，貯存期間 SLN 的晶型并不能從本體的晶型來(lái)推斷，因?yàn)槎呔娃D(zhuǎn)變的動(dòng)力學(xué)過(guò)程完全不同。 就長(zhǎng)鏈脂肪酸甘油酯或混合脂肪酸酯來(lái)講， SLN 結(jié)晶后其變化過(guò)程持續(xù)幾天甚至幾周。同塊體材料相比，將脂肪酸酯納米粒結(jié)晶轉(zhuǎn)變成較穩(wěn)定的α 型時(shí)間較長(zhǎng)，但結(jié)晶后，其立即轉(zhuǎn)變成β ’型，表明脂肪酸酯具有較低的結(jié)晶溫度。β ’型脂肪酸酯轉(zhuǎn)變成β型通常需要數(shù)月乃至一年的時(shí)間。 三脂肪酸甘油酯，混合脂肪酸酯納米粒的多晶型行為與單脂肪酸甘油酯不同。這些同樣能夠解釋三棕櫚酸甘油酯α 型小納米粒比大納米粒不穩(wěn)定的現(xiàn)象。單脂肪酸甘油酯膠體體系比塊 體材料轉(zhuǎn)變成β 型的速度更快，可能是由于較小的結(jié)晶區(qū)域具有更大的體表面積之比而導(dǎo)致晶格弛豫。例如，三棕櫚酸甘油酯納米粒首先形成α型結(jié)晶，隨后同塊體材料一樣轉(zhuǎn)變成穩(wěn)定的β 型。這說(shuō)明要想獲得穩(wěn)定的三脂肪酸甘油酯的過(guò)冷分散體，必須要制備納米粒。就微米體系而言，三脂肪酸甘油酯乳滴結(jié)晶的溫度比納米粒要高，其結(jié)晶溫度降低值與乳滴粒徑對(duì)數(shù)成線性關(guān)系，當(dāng)粒徑在 1μ m~10μ m 范圍內(nèi)時(shí)，結(jié)晶溫度降低值在 15℃ ~25℃之間。這是因?yàn)殚L(zhǎng)鏈脂肪酸可作為結(jié)晶中心使過(guò)冷態(tài)的結(jié)晶溫度提高。 人們對(duì)三脂肪酸甘油酯過(guò)冷現(xiàn)象的研究已有幾十年的歷史。這些結(jié)果表明，三脂肪酸甘油酯制成納米粒后，其結(jié)晶溫度降低 20℃ ~30℃，所以三肉豆蔻酸甘油酯或 Witepsol H42 等熔點(diǎn)較低的脂質(zhì)采用熱乳勻法所制得的納米粒，在室溫下以過(guò)冷態(tài)的形式存在。 SLN 的 性質(zhì) 1． 過(guò)冷態(tài)及過(guò)冷分散體的形成 由一些短鏈的三脂肪酸甘油酯如三 肉豆蔻酸甘油酯（ Tm=56℃）和混合脂肪酸酯如 Witepsol H42 (Tm=41℃ )采用熱熔法所制得的納米粒，在室溫或在冰箱中儲(chǔ)存， DSC 和 X射線衍射并未檢測(cè)到特征峰。主要是由于高溫、高剪切力和脂質(zhì)的部分熔化，易造成粒子的團(tuán)聚。此外，對(duì)冷凍的 SLN 分散體進(jìn)行預(yù)處理（ 22℃處理 2h，接著降至 40℃處理 2h）可能會(huì) 提高凍干粉的質(zhì)量。大量小晶體和非晶區(qū)的出現(xiàn)導(dǎo)致形成非常緊密的凍干粉網(wǎng)，因而降低了升華速 度?？焖倮鋬鰰?huì)導(dǎo)致小型和異質(zhì)晶體出現(xiàn)，增加了非晶型的含量，降低冷凍效果。 冷凍的過(guò)程會(huì)影響晶體的結(jié)構(gòu)和凍干粉的性質(zhì)。載藥納米粒 Zeta 電位降低，滲透壓和 pH 值改變進(jìn)而導(dǎo)致粒子的穩(wěn)定性下降。冷凍防護(hù)劑和脂質(zhì)的重量比 為 ~ 較合適。 冷凍防護(hù)劑加入的時(shí)間也會(huì)影響最后產(chǎn)品的性質(zhì)。冷凍防護(hù)劑的保護(hù)作用由大到小為：海藻糖→蔗糖→葡萄糖和麥芽糖。冷凍防護(hù)劑可以占 據(jù)離散的脂質(zhì)納米粒之間的空間位置，從而阻止其相互接觸；還能和表面活性劑的活性位點(diǎn)發(fā)生作用，形成一層假性水化殼。冷凍防護(hù)劑 [15， 16]的加入可以減少粒子的聚合，還能使得到的干燥產(chǎn)品具有更好的再分散特性。 冷凍干燥法將降低表面活性劑的保護(hù)作用。但是在凍干過(guò)程中有兩種相變會(huì)影響其穩(wěn)定性。由于 SLN的特殊性質(zhì)，常用的干 燥法有冷凍干燥和噴霧干燥。為了提高 SLN的化學(xué)和物理穩(wěn)定性，保持其原有的的粒徑，阻止 Ostwald熟化和避免水解，常用的方法是將 SLN分散液干燥成固體。圍繞 SLN的化學(xué)穩(wěn)定性方面的研究至關(guān)重要，這對(duì)解決 SLN體系的滅菌問(wèn)題提供幫助。對(duì)濕熱蒸汽滅菌和γ射線照射所導(dǎo)致的化學(xué)降解研究并不多，但需要指出的是，降解并不總是表現(xiàn)為粒徑的增大。分子高流動(dòng)性（半固體或液體）和氧也能促進(jìn)射線照射導(dǎo)致的降解反應(yīng)。射線照射法由于射線的能量很高，在照射過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生自由基，這些自由基與沒(méi)有經(jīng) 過(guò)修飾的樣品重新結(jié)合或發(fā)生副反應(yīng)而使樣品的