第六章微生物的生長與環(huán)境因子(參考版)
2024-08-12 13:24本頁面
【正文】 幾種常用菌種保藏方法的比較 方法名稱 主要措施 適宜菌種 保藏期 評(píng)價(jià) 冰箱保藏法（斜面） 冰箱保藏法（半固體） 石蠟油封藏法 * 沙土保藏法 冷凍干燥法 低溫 低溫 低溫、缺氧 干燥、無營養(yǎng) 干燥、無氧、低溫、有保護(hù)劑 各大類 細(xì)菌、酵母菌 各大類 ** 產(chǎn)孢子微生物 各大類 3~6月 6~12月 1~2年 1~10年 5~15年以上 簡便 簡便 簡便 簡便有效 簡便、有效 學(xué)習(xí)要點(diǎn) ? 微生物的培養(yǎng)方式 ? 微生物的生長曲線 ? 影響微生物生長的環(huán)境因子 ? 菌種復(fù)壯的措施 。 ?常用的菌種保藏機(jī)構(gòu) ： 中國微生物菌種保藏委員會(huì) (CCCCM) 美國的典型菌種保藏中心 (ATCC) 菌種保藏的原理 ?挑選典型菌種的優(yōu)良純種， 一般采用微生物的休眠體（如孢子、芽孢等）采用人工條件 （如干燥、低溫、缺氧、避光、缺乏營養(yǎng)以及添加保護(hù)劑或酸堿中和劑等），使微生物代謝變?nèi)酰幱?休眠狀態(tài) 。 一、防止菌種退化的方法 ?控制傳代的次數(shù) （一般在 DNA的復(fù)制過程中，堿基的錯(cuò)配率是 5x104，自發(fā)突變的頻率為 108~109，采用良好的菌種保藏方法，可以減少移種和傳代的次數(shù) ） ?創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 ?利用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行接種傳代： 對(duì)絲狀微生物而言，通常采用穩(wěn)定的單核孢子進(jìn)行接種。 復(fù)壯 (rejuvenation)： 狹義的復(fù)壯 是指在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過純種分離和生產(chǎn)性能測定等方法，從衰退的群體中找出未衰退的個(gè)體，以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施； 廣義的復(fù)壯 是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰退前就有意識(shí)的經(jīng)常、進(jìn)行純種的分離和生產(chǎn)性能測定工作，以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。廣譜～：對(duì)多種微生物有作用（如：土霉素、四環(huán)素）；窄譜～：僅對(duì)某一類微生物有作用（如：多粘菌素） 作用機(jī)制： ?1）抑制細(xì)胞壁的合成；（如：青霉素） ? 2）破壞細(xì)胞膜功能；（如：多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解） ? 3）抑制蛋白質(zhì)合成；（如：氯霉素，四環(huán)素、鏈霉素等） ? 4）干擾核酸代謝；（如：利福霉素、新生霉素、絲裂霉素、灰黃霉素） 化學(xué)藥劑 ? 氧化劑、還原劑、 酚類、醇類、新潔爾滅、毒性物質(zhì)、染料、抗代謝物、抗生素等對(duì)微生物的影響。 抗生素： 概念： 抗生素： 微生物在其生命過程中所產(chǎn)生的一類 低分子量 代謝產(chǎn)物，在 很低濃度下 就能抑制或殺死其它微生物的生長。 應(yīng)用： 食品消毒、滅菌 。 機(jī)理： 微波產(chǎn)生 熱效應(yīng) ，使蛋白質(zhì)、酶等物質(zhì)變性，導(dǎo)致微生物死亡。 應(yīng)用： o 破碎細(xì)胞 ，提取胞內(nèi)物質(zhì)（代謝產(chǎn)物、酶等） o 殺菌 ,超聲波殺菌效力大小與頻率、強(qiáng)度、處理時(shí)間等多種因素有關(guān)。 超聲波 超聲波： 每秒鐘振動(dòng)在 1600以上的聲波。 特點(diǎn)： 穿透力強(qiáng)，非專一性，作用于一切 細(xì)胞成分，對(duì)所有生物均有殺傷作用。 電離輻射 χ 、 γ 、 β 射線 ，波長短，能量高，有較強(qiáng)的殺傷力。 ? 光復(fù)活現(xiàn)象： 經(jīng)紫外線照射的微生物，在可見光下，光可以激活 DNA修復(fù)酶，該酶能修復(fù) DNA上的損傷，使微生物的突變率或死亡率下降。 其中波長在 260nm處的紫外線 殺菌力最強(qiáng)。 紫外線殺菌或誘變?cè)恚? ? 紫外線 作用于 DNA ，使其產(chǎn)生 胸腺嘧啶二聚體 ，引起 DNA結(jié)構(gòu)變形，阻礙正常的堿基配對(duì)，從而造成微生物 變異或死亡。 ? 厭氧菌（ anaerobe） 分子氧對(duì)它有毒害，短期接觸空氣，也會(huì)抑制其生長甚至致死；在空氣或含有 10%CO2的空氣中，在固體培養(yǎng)基表面上不能生長，只有在其深層的無氧或低氧化還原電勢的環(huán)境下才能生長；生命活動(dòng)所需能量通過發(fā)酵、無氧呼吸、循環(huán)光合磷酸化或甲烷發(fā)酵提供； 細(xì)胞內(nèi)缺乏 SOD和細(xì)胞色素氧化酶，大多數(shù)還缺乏過氧化氫酶。 四、溶解氧 微生物對(duì)氧的需要和耐受力在不同的類群中變化很大，根據(jù)微生物與氧的關(guān)系 ,可把它們分為幾種類群 : 專性好氧菌 : 好氧菌 微好氧菌： 兼性厭氧菌 耐氧厭氧菌： 厭氧菌 (專性 )厭氧菌： 專性好氧菌 （ strict aerobe） P128 ? 必須在有分子氧的條件下才能生長，有完整的呼吸鏈，以分子氧作為最終氫受體，細(xì)胞含有超氧物歧化酶（ SOD，superoxide dismutase） 和過氧化氫酶。 微生物 生長最適 pH 合成抗生素最適 pH 灰色鏈霉菌 ~ ~ 紅霉素鏈霉菌 ~ ~ 產(chǎn)黃青霉 ~ ~ 金霉素鏈霉菌 ~ ~ 龜裂鏈霉菌 ~ ~ 灰黃青霉 ~ ~ 生長的最適 pH值與發(fā)酵的最適 pH值 三、氧化還原電位（ Eh） ? 氧化還原電位的單位是 V或 mV，一般 ? 好氧微生物： + V ? 最適 +~+ ? 厭氧微生物： 。 微生物 pH值 最低 最適 最高 Thiobacillus thiooxidans 氧化硫硫桿菌 ~ Lactobacillus acidophilus 嗜酸乳桿菌 ~ ~ Rhizobium japonicum 大豆根瘤菌 ~ Azotobacter chroococcum 圓褐固氮 ~ Nitrosomonas sp. 硝化單胞菌 ~ Acetobacter aceti 醋化醋桿菌 ~ ~ ~ Staphylococcus aureus 金黃葡球菌 ~ Chlorobium limicola 泥生綠菌 Thurmus aquaticus 水生棲熱菌 ~ Aspergillus niger 黑曲霉 ~ 一般放線菌 ~ 一般酵母菌
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