畜牧微生物學(xué)第六章微生物的遺傳與變異(參考版)
2025-01-19 19:48本頁面
【正文】 ?菌種保藏機(jī)構(gòu) ： 中國微生物菌種保藏委員會 (CCCCM) 美國的典型菌種保藏中心 (ATCC) 英國國家典型菌種保藏所（ NCTC） 法國里昂巴斯德研究所（ IPL） 國內(nèi)外菌種保藏機(jī)構(gòu)： 畜牧獸醫(yī)學(xué)院 馮 新 。 第四節(jié) 微生物變異株的獲得及微生物遺傳性的保存 54 變異菌的一般篩選方法 平皿快速檢測法 ? 變色圈法 ? 透明圈法 ? 生長圈法 ? 抑菌圈法 ? 梯度平板法 搖瓶培養(yǎng)法 55 56 57 菌種保藏： 1. 目的： ①存活，不丟失，不污染 ②防止優(yōu)良性狀喪失 ③隨時為生產(chǎn)、科研提供優(yōu)良菌種 2. 原理：選用優(yōu)良的純種，（最好是休眠體，如分生孢子、芽胞等），創(chuàng)造降低微生物代謝活動強(qiáng)度，生長繁殖受抑制，難以發(fā)生突變的環(huán)境條件。 51 52 Mutants that are detectable ?Nonmotile ?Noncapsulated ?Rough colony ?Nutritional ?Sugar fermentation ?Drug resistant ?Virus resistant ?Temperature sensitive ?Pigment 53 ★ 按是否比較容易、迅速地分離到發(fā)生突變的細(xì)胞來分： 選擇性突變株（ selective mutant）： 具有選擇標(biāo)記（如營養(yǎng)缺陷性、抗性突變型、條件致死突變型），只要選擇適當(dāng)?shù)沫h(huán)境條件，如培養(yǎng)基、溫度、 pH值等，就比較容易檢出和分離到。 47 Transfer of plasmid DNA by conjugation ?The F plasmid of an F+ cell is being transferred to a F recipient cell 48 一、從自然變異中篩選 誘變劑 物理因素 化學(xué)因素 紫外線 激光 離子束 X射線 r射線 溫度 烷化劑 堿基類似物 吖啶化合物 二、傳統(tǒng)的人工誘變方法 第四節(jié) 微生物變異株的獲得及微生物遺傳性的保存 49 三、原生質(zhì)體融合（ protoplast fusion） 概念 ：通過人為的方法，使遺傳性狀不同的兩細(xì)胞的原生質(zhì)體發(fā)生融合，并進(jìn)而發(fā)生遺傳重組以產(chǎn)生同時帶有雙親性狀的、遺傳性穩(wěn)定的融合子的過程，稱為原生質(zhì)體融合。獲得新性狀的受體細(xì)胞稱為接合子。當(dāng)溫和噬菌體感染其寄主細(xì)菌之后，噬菌體的基因整合于寄主基因組中，導(dǎo)致寄主的某些性狀發(fā)生變異，稱為噬菌體轉(zhuǎn)換。 普遍轉(zhuǎn)導(dǎo) ：通過完全缺陷噬菌體對供體菌任何小片段部分?jǐn)y帶到受體菌中，而實現(xiàn)其遺傳性狀傳遞到受體菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象 局限性轉(zhuǎn)導(dǎo) ：通過部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中，并獲得表達(dá)的轉(zhuǎn)導(dǎo)現(xiàn)象。 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率高； 42 2. 轉(zhuǎn)導(dǎo)（ transduction） ：通過完全缺陷或部分缺陷噬菌體的媒介，把供體細(xì)胞的 DNA小片段攜帶到受體細(xì)胞中，通過交換與整合，使后者獲得前者部分遺傳形狀的現(xiàn)象。 在自然轉(zhuǎn)化的基礎(chǔ)上發(fā)展和建立的一項細(xì)菌基因重組 手段，是基因工程的奠基石和基礎(chǔ)技術(shù)。也可以采用人工的方法使細(xì)菌轉(zhuǎn)變成 感受態(tài) 38 供體菌 受體菌 DNA片段 1928年， Griffith發(fā)現(xiàn)肺炎鏈球菌（ Streptococcus pneumoniae）的轉(zhuǎn)化現(xiàn)象 ,目前已知有二十多個種的細(xì)菌具有自然轉(zhuǎn)化的能力 39 自然轉(zhuǎn)化過程的特點(diǎn)： a）不需要活的 DNA供體細(xì)胞； b）轉(zhuǎn)化是否成功及轉(zhuǎn)化效率的高低主要取決于轉(zhuǎn)化供體菌株和轉(zhuǎn)化受體菌株之間的親源關(guān)系； c）通常情況下質(zhì)粒的自然轉(zhuǎn)化效率要低得多。 進(jìn)行轉(zhuǎn)化的受體細(xì)胞必須處于 感受態(tài) (petence)。 轉(zhuǎn)化發(fā)生的條件 : 兩個菌種或菌株之間能否發(fā)生轉(zhuǎn)化
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