【正文】 下，光可以激活 DNA修復酶，該酶能修復 DNA上的損傷，使微生物的突變率或死亡率下降。 ? 應用： 由于穿透力差，只適用于 表面消毒 空氣消毒 誘變育種。 電離輻射 χ 、 γ 、 β 射線 ，波長短，能量高，有較強的殺傷力。 作用原理 ： 可 引起水和其他物質的電離 ，產生游離基，使核酸、蛋白質或酶發(fā)生變化，造成細胞損傷或死亡。 特點： 穿透力強，非專一性，作用于一切 細胞成分，對所有生物均有殺傷作用。 應用：用于 殺菌或菌種誘變 。 超聲波 超聲波： 每秒鐘振動在 1600以上的聲波。 機理：引起膜破壞，細胞破裂，內涵物逸出。 應用： o 破碎細胞 ，提取胞內物質（代謝產物、酶等） o 殺菌 ,超聲波殺菌效力大小與頻率、強度、處理時間等多種因素有關。 微波 微波： 微波的范圍在 915— 2450MHz/s之間 。 機理： 微波產生 熱效應 ，使蛋白質、酶等物質變性，導致微生物死亡。 特點： 加熱均勻， 熱能 利用率高、加熱時間短。 應用： 食品消毒、滅菌 。 干燥 干燥抑制微生物生長或造成其死亡的原因： 干燥能引起微生物細胞內 蛋白質的變性 和鹽類等物質濃度提高，從而抑制生長或造成微生物死亡 重金屬 ? 汞、銀、銅、鉛及其化合物 ? 殺菌機理： ? 與酶的基團結合，使酶失去活性；或與菌體蛋白結合，使之變性或沉淀。 抗生素： 概念： 抗生素： 微生物在其生命過程中所產生的一類 低分子量 代謝產物，在 很低濃度下 就能抑制或殺死其它微生物的生長。 最小抑制濃度 （ Minimal Inhibitory Concentration,MIC） :表示抗生素的抗菌活性，單位是 ?g/固體平板上測定， 抗菌譜： 抗生素的作用對象有一定范圍，這種作用范圍稱該抗生素的抗菌譜。廣譜～：對多種微生物有作用（如：土霉素、四環(huán)素）；窄譜～：僅對某一類微生物有作用（如：多粘菌素） 作用機制： ?1）抑制細胞壁的合成；（如：青霉素） ? 2）破壞細胞膜功能；（如：多粘菌素可作用于膜磷脂使膜溶解） ? 3）抑制蛋白質合成；（如：氯霉素，四環(huán)素、鏈霉素等） ? 4）干擾核酸代謝；（如：利福霉素、新生霉素、絲裂霉素、灰黃霉素） 化學藥劑 ? 氧化劑、還原劑、 酚類、醇類、新潔爾滅、毒性物質、染料、抗代謝物、抗生素等對微生物的影響。 常用的消毒防腐劑及其應用 類型 名稱及使用方法 作用原理 應用范圍 醇類 70%— 75%乙醇 脫水、蛋白質變性 皮膚、器皿 醛類 %— 10%甲醛 2%戊二醛（ pH=8） 蛋白質變性 房間、物品消毒（不適合食品廠） 酚類 3%— 5%石炭酸 2%來蘇兒 3%— 5%來蘇兒 破壞細胞膜、蛋白質變性 地面、器具 皮膚 地面、器具 氧化劑 %高錳酸鉀 3%過氧化氫 %— %過氧乙酸 氧化蛋白質活性基團，酶失活 皮膚、水果、蔬菜 皮膚、物品表面 水果、蔬菜、塑料等 類型 名稱及使用方法 作用原理 應用范圍 重 金 屬 鹽 類 %— %升汞 2%紅汞 %— 1%硝酸銀 %— %硫酸銅 蛋白質變性、酶失活 變性、沉淀蛋白 蛋白質變性、酶失活 非金屬器皿 皮膚、粘膜、傷口 皮膚、新生兒眼睛 防治植物病害 表 面 活 性 劑 %— % 新潔爾滅 %— % 杜滅芬 蛋白變性、破壞細胞膜 皮膚、粘膜、器械 皮膚、金屬、棉織品、塑料 菌種的退化、復壯和保藏 ?退化與復壯的概念 退化（ degeneration） ：在微生物的生長過程中，由于變異的存在，使原有的優(yōu)良性狀發(fā)生負變，即菌種的退化。 復壯 (rejuvenation)： 狹義的復壯 是指在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過純種分離和生產性能測定等方法，從衰退的群體中找出未衰退的個體，以達到恢復該菌原有典型性狀的措施； 廣義的復壯 是指在菌種的生產性能未衰退前就有意識的經常、進行純種的分離和生產性能測定工作，以期菌種的生產性能逐步提高。實際上是利用自發(fā)突變（正變）不斷地從生產中選種。 一、防止菌種退化的方法 ?控制傳代的次數(shù) （一般在 DNA的復制過程中，堿基的錯配率是 5x104，自發(fā)突變的頻率為 108~109，采用良好的菌種保藏方法，可以減少移種和傳代的次數(shù) ） ?創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件 ?利用不同類型的細胞進行接種傳代： 對絲狀微生物而言，通常采用穩(wěn)定的單核孢子進行接種。 ?采用有效的菌種保藏方法 菌種的復壯措施 ?純種分離 菌落純的分離方法 （平板表面涂布法，平板劃線分離法，瓊脂培養(yǎng)基澆注法） 細胞純的分離方法 （分離小室進行單細胞分離，顯微操縱器進行單細胞分離，菌絲尖端切割法進行單細胞分離） ?通過宿主體內生長進行復壯 （如 Bacillus thuringiensis的復壯） ?聯(lián)合復壯（誘變復壯） 二、菌種的保藏 ?菌種保藏的任務 ： 廣泛收集實驗室和生產菌種、菌株（包括病毒株以及動、植物細胞株和質粒等）的基礎上，使之達到不死亡、不退化、不污染 ，以便于研究、交換和使用的目的。 ?常用的菌種保藏機構 ： 中國微生物菌種保藏委員會 (CCCCM) 美國的典型菌種保藏中心 (ATCC) 菌種保藏的原理 ?挑選典型菌種的優(yōu)良純種， 一般采用微生物的休眠體（如孢子、芽孢等）采用人工條件 （如干燥、低溫、缺氧、避光、缺乏營養(yǎng)以及添加保護劑或酸堿中和劑等），使微生物代謝變弱，處于 休眠狀態(tài) 。 菌種保藏的方法 定期移植法： 斜面低溫保藏法 干燥法 ：砂土管保藏法、麩曲保藏法等 隔絕空氣法： 液體石蠟保藏法 蒸餾水懸浮法：藻類的保存 綜合法：以上方法的綜合。 幾種常用菌種保藏方法的比較 方法名稱 主要措施 適宜菌種 保藏期 評價 冰箱保藏法（斜面） 冰箱保藏法（半固體） 石蠟油封藏法 * 沙土保藏法 冷凍干燥法 低溫 低溫 低溫、缺氧 干燥、無營養(yǎng) 干燥、無氧、低溫、有保護劑 各大類 細菌、酵母菌 各大類 ** 產孢子微生物 各大類 3~6月 6~12月 1~2年 1~10年 5~15年以上 簡便 簡便 簡便 簡便有效 簡便、有效 學習要點 ? 微生物的培養(yǎng)方式 ? 微生物的生長曲線 ? 影響微生物生長的環(huán)境因子 ? 菌種復壯的措施