【正文】 核酸疫苗的出現(xiàn)與發(fā)展是疫苗發(fā)展史上的 第三次革命 。隨后的大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都說明在合適的條件下， DNA接種后既能產(chǎn)生細(xì)胞免疫又能引起體液免疫。 ? 1992年 Tang等將表達(dá)人生長激素的基因質(zhì)粒 DNA導(dǎo)入小鼠皮內(nèi)，小鼠產(chǎn)生特異性抗體，從而提出了基因免疫的概念。 發(fā)展歷史 ? 1990年 Wolff等偶然發(fā)現(xiàn)給小鼠肌肉注射外源性重組質(zhì)粒后，質(zhì)粒被攝取并能在體內(nèi)至少兩個(gè)月穩(wěn)定地表達(dá)所編碼蛋白。 目前大規(guī)模生產(chǎn)的表達(dá)系統(tǒng)有釀酒酵母、畢赤酵母和漢遜酵母等基因工程疫苗，其次為 CHO細(xì)胞基因工程疫苗，還有 HBsAg+PreS2或HBsAg+PreS1+ PreS2（ CHO細(xì)胞和酵母表達(dá)系統(tǒng)）。 ?(3)用一含 HbsAg的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化中國倉鼠卵巢細(xì)胞 (CHO),在該細(xì)胞中表達(dá) HbsAg蛋白 ,釋放于培養(yǎng)液中 ,從培養(yǎng)液中提純抗原蛋白。 乙肝疫苗的制備－基因工程疫苗 工藝路線 : ?(1) 將 HBV的 DNA片段插入到質(zhì)粒并引入到 ,使其復(fù)制表達(dá)抗原物質(zhì)。 乙肝疫苗的制備－人工合成多肽疫苗 ?工藝過程 :人工合成 HBsAg的 P25多肽 ,并在 124與137位半胱氨酸殘基之間引入 SS,使成環(huán)狀多肽 ,用其免疫動(dòng)物后 ,50%出現(xiàn)抗體應(yīng)答。 脂質(zhì)雙層：含有 HBsAg、PHSAr 和 PreSAg蛋白質(zhì) 乙肝疫苗的制備－血源疫苗 特點(diǎn) : (1)血源取得困難 。 顆粒表面（內(nèi)衣殼）：含有 HBcAg 和 HBeAg 。 乙肝病毒發(fā)病區(qū)域 乙型肝炎病毒 形態(tài)與結(jié)構(gòu) 完整的 HBV顆粒亦稱Dane顆粒，直徑為 42nm，具有雙層核殼結(jié)構(gòu)： 核心顆粒 ：直徑為 28nm。 ? HBV是 乙型肝炎 病原體，主要經(jīng)輸血、注射、性行為和母嬰傳播。s particle）。 ? HBV的發(fā)現(xiàn)源于表面抗原的研究。 ?載名名稱、批號、亞批號、有效期等。 ?無菌操作，實(shí)際裝量多于標(biāo)簽示量。 生物制品的分包裝 ? 分裝 ?分裝前，檢定合格，標(biāo)簽完整，明確。 ? 結(jié)核桿菌以甘油為碳源，百日咳桿菌需要谷氨酸，胱氨酸為氮源。 細(xì)菌類疫苗和類毒素的一般制造方法 ?細(xì)菌類疫苗和類毒素均由細(xì)菌培養(yǎng)開始， 制備的主要程序相似。 ? 凍干 ? 升華，不使疫苗融解。 ?％－ ％的甲醛或酚溶液。 ?（ 4）細(xì)胞培養(yǎng)。 ?（ 3）組織培養(yǎng)。較動(dòng)物管理方便。生產(chǎn)中已淘汰。 ?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施： 選址、建筑要求、區(qū)域劃分、環(huán)境條件 ?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理 ?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的供應(yīng)和使用 ?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的檢疫和傳染病的控制 ?實(shí)驗(yàn)動(dòng)物工作人員 生物制品的標(biāo)準(zhǔn)化 ? 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ?常用的幾種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 ?小鼠 ?金黃地鼠 ?豚鼠 ?家兔 ?獼猴 生物制品的標(biāo)準(zhǔn)化 生物制品的質(zhì)量檢定 ? 生物制品的理化檢定 ? 生物制品的安全檢定 ? 生物制品的效力檢定 生物制品的質(zhì)量檢定 ? 生物制品的理化檢定 ?參照 《 生物制品化學(xué)檢定規(guī)程 》 ?物理性狀檢查 ?蛋白質(zhì)含量測定 ?防腐劑含量測定 ?純度檢查 ?其它 ?外觀 ?真空度及溶解時(shí)間 半微量定氮法 酚試劑法 ?紫外吸收法 ?苯酚含量測定 ?汞類防腐劑含量測定 ?氯仿含量測定 ?游離甲醛含量測定 ?區(qū)帶電泳 ?免疫電泳 ?凝膠層析 ?水份含量測定 ?氫氧化鋁與磷酸鋁含量測定 ?磷含量測定 ?O乙?；繙y定 ? 生物制品的安全檢定 ?一般安全性檢查 ?殺菌、滅活和脫毒情況的檢查 ?外源性污染檢查 ?過敏性物質(zhì)檢查 生物制品的質(zhì)量檢定 第四節(jié)：生物制品的一般制造方法 ? 病毒類疫苗制造方法 疫苗制備工藝各異，但主要程序一致。 生物制品的標(biāo)準(zhǔn)化 生物制品的標(biāo)準(zhǔn)化 ? 生物制品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) ?定義 ：系指用于生物制品效價(jià)、活性或含量測定的或其特性鑒別、檢查的生物標(biāo)準(zhǔn)品或生物參考物質(zhì)。 疑問 1：為什么疫苗有較低的毒性，卻能增強(qiáng)抵抗能力？ 疑問 2：為什么 第三節(jié) 生物制品質(zhì)量要求與檢定 ?生物制品質(zhì)量的特殊重要性 ?所有預(yù)防制品都是直接用于大量健康人群（兒童） ?所用治療制品都是通過非胃腸途徑直接用于患者 ?診斷試劑，其質(zhì)量則關(guān)系到能否對患者或試樣做出特異、敏感的正確診斷和分析 ?生物制品的質(zhì)量 ?安全性 ?有效性 ?可接受性 ? 生物制品的 GMP管理 《 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范 》 ?GMP（ Good Manufacturing Practices for Drugs）： 是對生物制品生產(chǎn)全過程的質(zhì)量管理，涉及人員、廠房和設(shè)備、原料采購入庫、檢驗(yàn)、發(fā)料，加工，在制品及半成品檢驗(yàn)，分包裝，成品檢定，出品銷售，運(yùn)輸，用戶意見及使用反應(yīng)處理等在內(nèi)的全過程的質(zhì)量管理。 ?通過食物攝取的疫苗和個(gè)性化疫苗。 疫苗的發(fā)展前景 ?目前，已有治療性疫苗治療麻風(fēng)、慢支、皰疹病毒感染、愛滋病和乙肝等疾病的臨床試驗(yàn)報(bào)告。 十、乙型腦炎減毒活疫苗 ?組成和性狀 本品系用流行性乙型腦炎減毒株接種原代地鼠腎單層細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后收獲病毒液，加保護(hù)劑凍干制成，為淡黃色疏松體，溶解后為澄明橘紅色液體。 ?規(guī)格 本品規(guī)格為每安瓿 300μg多糖。 九、 A群腦膜炎球菌多糖疫苗 ?組成與性狀 本品系用 A群腦膜炎奈瑟氏菌培養(yǎng)液，經(jīng)提純獲得多糖抗原并加入適宜穩(wěn)定劑后凍干制成的多糖疫苗。 ?用法與劑量：加入疫苗附帶的滅菌注射用水 ， 重溶后 ， 待完全溶解搖勻后使用 。 ?規(guī)格： 。 ?用法與劑量： ， 皮下注射 。 六、麻疹、腮腺炎、風(fēng)疹 減毒活疫苗（普祥立適） ?疫苗性質(zhì)：凍干減毒活疫苗 ， 小瓶裝的疫苗為白色至淡粉色小丸 ， 復(fù)溶后的疫苗會隨 PH值的微小變化 ， 由淺橙色到淺紅色 。 ?用法與劑量：加 ， 等完全溶解搖勻后使用 。 ?規(guī)格：重溶后每西林瓶 。 每次注射劑量為 。 ?接種對象：初免起始月齡 3足月 ， 周歲內(nèi)完成三針 ，每針間隔不少于 28天 ， 18— 24月齡加強(qiáng)一針 。 四、吸附百日咳、白喉、破傷風(fēng) 聯(lián)合疫苗 ?疫苗性質(zhì)：類毒素 ， 吸附制劑為乳白色懸液 ， 含防腐劑 ， 放置后佐劑下沉 ， 搖動(dòng)后即成均勻懸液 。 ?用法與劑量：按瓶簽示量加滅菌注射用水 ， 待完全溶解搖勻后使用 。 ?規(guī)格：每安瓿為 。 （ 3） 口服疫苗時(shí)要看服下肚 ， 如兒童服苗后吐出 ， 應(yīng)先飲少量涼開水 ， 休息片刻后再服 。 （ 1） 用消毒的藥匙將脊髓灰質(zhì)炎疫苗送入兒童口中 ， 用涼開水送服咽下 。 ） 二、脊髓灰質(zhì)炎疫苗 ?疫苗性質(zhì)：減毒活疫苗 ， 為三價(jià)糖丸 。 ?規(guī)格： 5人份 /安瓿 。 質(zhì)量管理：國家一級管理 疫苗批簽發(fā)： 起始時(shí)間 : 2022年 1月 范圍 : 國內(nèi)及進(jìn)口注冊的每一批乙肝疫苗 (用于上市銷售 ) 內(nèi)容 : 資料審核 +部分檢驗(yàn) 監(jiān)督檢驗(yàn)：成品全檢 二、現(xiàn)有乙肝疫苗存在的問題 (一 ). 現(xiàn)有疫苗劑量和免疫策略函待改進(jìn) (二 ). 臨床試驗(yàn)不規(guī)范 (三 ). 首針及時(shí)率和全程覆蓋率急待提高 (四 ). 疫苗企