【正文】 期等。s particle）。 乙肝病毒發(fā)病區(qū)域 乙型肝炎病毒 形態(tài)與結構 完整的 HBV顆粒亦稱Dane顆粒，直徑為 42nm，具有雙層核殼結構： 核心顆粒 ：直徑為 28nm。 脂質雙層：含有 HBsAg、PHSAr 和 PreSAg蛋白質 乙肝疫苗的制備－血源疫苗 特點 : (1)血源取得困難 。 乙肝疫苗的制備－基因工程疫苗 工藝路線 : ?(1) 將 HBV的 DNA片段插入到質粒并引入到 ,使其復制表達抗原物質。 目前大規(guī)模生產的表達系統(tǒng)有釀酒酵母、畢赤酵母和漢遜酵母等基因工程疫苗，其次為 CHO細胞基因工程疫苗，還有 HBsAg+PreS2或HBsAg+PreS1+ PreS2（ CHO細胞和酵母表達系統(tǒng)）。 ? 1992年 Tang等將表達人生長激素的基因質粒 DNA導入小鼠皮內，小鼠產生特異性抗體，從而提出了基因免疫的概念。核酸疫苗的出現(xiàn)與發(fā)展是疫苗發(fā)展史上的 第三次革命 。隨后的大量動物實驗都說明在合適的條件下， DNA接種后既能產生細胞免疫又能引起體液免疫。 發(fā)展歷史 ? 1990年 Wolff等偶然發(fā)現(xiàn)給小鼠肌肉注射外源性重組質粒后，質粒被攝取并能在體內至少兩個月穩(wěn)定地表達所編碼蛋白。 ?(3)用一含 HbsAg的質粒轉化中國倉鼠卵巢細胞 (CHO),在該細胞中表達 HbsAg蛋白 ,釋放于培養(yǎng)液中 ,從培養(yǎng)液中提純抗原蛋白。 乙肝疫苗的制備－人工合成多肽疫苗 ?工藝過程 :人工合成 HBsAg的 P25多肽 ,并在 124與137位半胱氨酸殘基之間引入 SS,使成環(huán)狀多肽 ,用其免疫動物后 ,50%出現(xiàn)抗體應答。 顆粒表面（內衣殼）：含有 HBcAg 和 HBeAg 。 ? HBV是 乙型肝炎 病原體，主要經輸血、注射、性行為和母嬰傳播。 ? HBV的發(fā)現(xiàn)源于表面抗原的研究。 ?無菌操作，實際裝量多于標簽示量。 ? 結核桿菌以甘油為碳源，百日咳桿菌需要谷氨酸，胱氨酸為氮源。 ? 凍干 ? 升華，不使疫苗融解。 ?（ 4）細胞培養(yǎng)。較動物管理方便。 ?實驗動物設施： 選址、建筑要求、區(qū)域劃分、環(huán)境條件 ?實驗動物的飼養(yǎng)管理 ?實驗動物的供應和使用 ?實驗動物的檢疫和傳染病的控制 ?實驗動物工作人員 生物制品的標準化 ? 實驗動物 ?常用的幾種實驗動物 ?小鼠 ?金黃地鼠 ?豚鼠 ?家兔 ?獼猴 生物制品的標準化 生物制品的質量檢定 ? 生物制品的理化檢定 ? 生物制品的安全檢定 ? 生物制品的效力檢定 生物制品的質量檢定 ? 生物制品的理化檢定 ?參照 《 生物制品化學檢定規(guī)程 》 ?物理性狀檢查 ?蛋白質含量測定 ?防腐劑含量測定 ?純度檢查 ?其它 ?外觀 ?真空度及溶解時間 半微量定氮法 酚試劑法 ?紫外吸收法 ?苯酚含量測定 ?汞類防腐劑含量測定 ?氯仿含量測定 ?游離甲醛含量測定 ?區(qū)帶電泳 ?免疫電泳 ?凝膠層析 ?水份含量測定 ?氫氧化鋁與磷酸鋁含量測定 ?磷含量測定 ?O乙?；繙y定 ? 生物制品的安全檢定 ?一般安全性檢查 ?殺菌、滅活和脫毒情況的檢查 ?外源性污染檢查 ?過敏性物質檢查 生物制品的質量檢定 第四節(jié)：生物制品的一般制造方法 ? 病毒類疫苗制造方法 疫苗制備工藝各異，但主要程序一致。 疑問 1：為什么疫苗有較低的毒性，卻能增強抵抗能力？ 疑問 2：為什么 第三節(jié) 生物制品質量要求與檢定 ?生物制品質量的特殊重要性 ?所有預防制品都是直接用于大量健康人群（兒童） ?所用治療制品都是通過非胃腸途徑直接用于患者 ?診斷試劑，其質量則關系到能否對患者或試樣做出特異、敏感的正確診斷和分析 ?生物制品的質量 ?安全性 ?有效性 ?可接受性 ? 生物制品的 GMP管理 《 藥品生產質量管理規(guī)范 》 ?GMP（ Good Manufacturing Practices for Drugs）： 是對生物制品生產全過程的質量管理，涉及人員、廠房和設備、原料采購入庫、檢驗、發(fā)料，加工，在制品及半成品檢驗，分包裝，成品檢定，出品銷售，運輸，用戶意見及使用反應處理等在內的全過程的質量管理。 疫苗的發(fā)展前景 ?目前，已有治療性疫苗治療麻風、慢支、皰疹病毒感染、愛滋病和乙肝等疾病的臨床試驗報告。 ?規(guī)格 本品規(guī)格為每安瓿 300μg多糖。 ?用法與劑量：加入疫苗附帶的滅菌注射用水 ， 重溶后 ， 待完全溶解搖勻后使用 。 ?用法與劑量： ， 皮下注射 。 ?用法與劑量：加 ， 等完全溶解搖勻后使用 。 每次注射劑量為 。 四、吸附百日咳、白喉、破傷風 聯(lián)合疫苗 ?疫苗性質：類毒素 ， 吸附制劑為乳白色懸液 ， 含防腐劑 ， 放置后佐劑下沉 ， 搖動后即成均勻懸液 。 ?規(guī)格：每安瓿為 。 （ 1） 用消毒的藥匙將脊髓灰質炎疫苗送入兒童口中 ， 用涼開水送服咽下 。 ?規(guī)格： 5人份 /安瓿 。 一、國內乙肝疫苗生產和質量管理概況 1 預防性疫苗種類和劑量 釀酒酵母 5μg/劑 / 、 10μg/劑 / 漢遜酵母 10μg/劑 /, CHO疫苗 10μg/劑 /、 20μg/劑 / 進口疫苗 : GSK 10μg/劑 /、 20μg/劑 / 聯(lián)合疫苗： GSK、北京科興 問題：種類多；但缺乏應用于特殊人群的劑型和加免程序（如腎透析病人的劑量等） 國內上市前疫苗 預防性疫苗： S1CHO乙肝疫苗 臨床前 完成臨床 : 韓國綠十字公司漢遜酵母疫苗 臨床前 治療性疫苗： 免疫復合物疫苗 60 μg/劑 / II期 多肽疫苗 II期 高劑量疫苗 60μg/劑 / II期 表 我國乙肝疫苗生產廠家一覽表 名稱 地址 種類 北京天壇生物制品股份有限公司 釀酒酵母疫苗 北京市朝陽區(qū) 3間房 深圳康泰生物制品股份有限公司 釀酒酵母疫苗 深圳市南頭科技工業(yè)園區(qū) 大連高新生物制藥有限公司 漢遜酵母疫苗 大連經濟技術開發(fā)區(qū)鐵山西路 17號 長春生物制品研究所 CHO疫苗 長春市人民大街 1485號 蘭州生物制品研究所 CHO疫苗 蘭州市鹽場路 118號 武漢生物制品研究所 CHO疫苗 武漢市臨江路 11號 成都生物制品研究所 CHO疫苗 成都外東包江橋 華爾盾生物技術有限公司 CHO疫苗 北京市海淀區(qū)上地開拓路 5號 華北制藥金坦生物技術股份有限公司 CHO疫苗 石家莊國家高新技術開發(fā)區(qū)天山大街 106號 問題：廠家多、規(guī)模小、競爭降價、不利于質量保證 生產廠家和品種 乙肝疫苗生產和質量管理 生產 : 2022年度共生產乙肝疫苗 186批，其中酵母疫苗 147 批， 1億 568萬支； CHO疫苗