3蛋白質(zhì)濃度測定方法-資料下載頁
2025-09-25 01:12本頁面
【正文】 度值〕與蛋白質(zhì)含量成正比。此外，蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下，蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系，可以進行蛋白質(zhì)含量的測定。 紫外吸收法測蛋白質(zhì)含量 第二十七頁，共三十五頁。 三、操作步驟 15支試管，按下表編號、加試劑 管號 0 1 2 3 4 5 6 樣品 牛血清白蛋白 (mg) 0 2mg/mL牛血清白蛋白體積 (mL) 0 － 待測液體積 (mL) － － － － － － － * 蒸餾水(mL) 0 0 OD540 ，參加雙縮脲試劑 ,37oC反響 30min。 0號管調(diào)零，測定各管 540nm光吸收值。 第二十八頁，共三十五頁。 四、結(jié)果處理 以牛血清白蛋白含量為橫坐標， OD540為縱坐標，繪制標準曲線。 根據(jù)樣品的 OD540從標準曲線上查得樣品的蛋白質(zhì)含量〔 mg〕，再根據(jù)樣品的體積計算出樣品的濃度。 五、本卷須知 30min內(nèi)測定，且各管由顯色到比色時間應(yīng)盡可能一致。 2.*樣品蛋白質(zhì)含量應(yīng)在標準曲線范圍內(nèi)。 第二十九頁，共三十五頁。 第三十頁，共三十五頁。 第三十一頁，共三十五頁。 測量后的計算方法 使用 第三十二頁，共三十五頁。 一 實驗結(jié)果 求出待測蛋白質(zhì)溶液的光密度后，從標準曲線上查出其蛋白質(zhì)濃度，按稀釋倍數(shù)求出每毫升蛋白質(zhì)溶液的蛋白質(zhì)含量。 第三十三頁，共三十五頁。 討論 每種方法的適用范圍 每種方法的影響因素 還有無其他方法 第三十四頁，共三十五頁。 內(nèi)容總結(jié) 蛋白質(zhì)濃度測定方法。 Folin－酚試劑法〔 Lowry法〕。 Folin－酚試劑法〔 Lowry法〕。肉眼可見的彩色光稱為可見光，波長范圍在 400～ 750nm：小于 400nm的光線稱為紫外光。經(jīng)強堿堿化使之分解放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據(jù)此酸液被中和的程度可計算得樣品之氮含量。該指示劑酸性時為紫紅色，堿性時為綠色，變色范圍很窄〔 ～〕且很靈敏。試劑：一： 1， 4%碳酸鈉。還有無其他方法 第三十五頁，共三十五頁。
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