蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定-資料下載頁(yè)
2025-05-13 11:46本頁(yè)面
【正文】 與玻管管壁之間 ， 邊壓水邊慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)玻管 ， 推針前進(jìn) ， 同時(shí)注入水 ， 靠水流壓力和潤(rùn)滑力將玻璃管內(nèi)壁與凝膠分開(kāi) ， 凝膠條即可流出 。 4 .固定染色 取出凝膠條放在一塊潔凈的玻板上 ， 用尺量出固定前的凝膠條長(zhǎng)度 。 放入帶蓋試管中加入固定液 。 固定 20min?2后 ， 倒掉固定液 后用脫色液漂洗 2次 ， 再 染色 1h， 用蒸餾水漂洗數(shù)次后用脫色液脫色 ， 直至蛋白質(zhì)區(qū)帶清晰 ， 量出蛋白帶距正極端的距離 。 5 .蛋白質(zhì)條帶聚焦位置的計(jì)算 求出蛋白質(zhì)聚焦部位距凝膠條正極端的實(shí)際長(zhǎng)度為： 蛋白區(qū)帶中心距凝膠條正極端的距離 ? 固定染色前凝膠條長(zhǎng)度 固定染色后凝膠條長(zhǎng)度 三、濁度、分光光度法 溶液的 pH值與蛋白質(zhì)等電點(diǎn)相同時(shí)，靜電荷為 0，當(dāng)溶液 pH值大于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)時(shí)，則羧基游離，蛋白質(zhì)帶負(fù)電荷。反之，溶液的 pH值小于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)時(shí)，則氨基電離，蛋白質(zhì)帶正電荷。溶液的 pH值距蛋白質(zhì)等電點(diǎn)越遠(yuǎn)，蛋白質(zhì)的電荷越多。反之則越少。
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