血清蛋白質(zhì)濃度定量測定-資料下載頁
2025-01-06 09:07本頁面
【正文】 ? 待測樣品：用雙縮脲測定法的樣品稀釋而成。 ? 此法測定蛋白質(zhì)濃度，近些年被科研工作者廣泛選用。目前 BCA法的試劑盒市面有售。 ? 總之，雖然蛋白質(zhì)含量的測定方法很多，但是，還沒有一個完美的方法。在選擇測定方法時，可根據(jù)實驗要求和實驗室條件決定。 實驗步驟 孔號 試劑（ μ L ） 空白 孔 1 2 3 4 5 測定 孔 標準蛋白溶液（ 0 .5 m g/ ml ） — 2 4 8 16 20 — P BS 緩沖液 20 18 16 12 4 — 20 ？ 待測樣品 — — — — — — ？ B CA 工作液 200 200 200 200 200 200 200 蛋白質(zhì)含量（ μ g ） 0 . 05 ? 加適當體積樣品到 96孔板的樣品孔中，加標準品稀釋液不足道 20ul。 即：將蛋白質(zhì)樣品作適當稀釋（最好多做幾個梯度，如作 2倍、 4倍、 8倍稀釋 ? 4. 各孔加入 200微升 BCA工作液，用加樣槍輕輕吹打混勻（注意：不要弄出氣泡影響讀數(shù)）， 37℃ 放置 3060分鐘。 ? 冷卻到室溫后，用酶標儀測定 A562nm，或 540590nm之間的其他波長的吸光度，根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。 ? 【 計算 】 ? （一） 繪制標準曲線。 ? （二） 以測定管吸光度值，查找標準曲線，求出待測血清中蛋白質(zhì)濃度 (g/L)。 ? （三） 再從標準管中選擇一管與測定管光密度相接近者，求出待測血清中蛋白質(zhì)濃度(g/L)。
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