血清蛋白質(zhì)濃度定量測定(完整版)
【正文】 0 . 05 ? 加適當(dāng)體積樣品到 96孔板的樣品孔中，加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液不足道 20ul。 ? 試劑 B： 4％硫酸銅。 體積 (ul) 0 2 4 6 8 12 16 20 終濃度 （ ug/ul) 0 ? 的等滲磷酸鹽緩沖液（ PBS ）的配制 ? 的等滲磷酸鹽緩沖 液 （ ， ,PBS） : ? NaCI ? KH2PO4 ? Na2HPO4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取試管七支、編號，按下表操作： 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：取試管七支、編號，按下表操作： ： 同繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線方法，在一支試管中加入待測樣品 ，然后加入，立即在漩渦混合器上混合，測吸光度 A，查標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出待測樣品中蛋白質(zhì)濃度（ g/L）。BCA與 Cu+結(jié)合形成穩(wěn)定的紫藍(lán)色復(fù)合物，在 562 nm處有高的光吸收值并與蛋白質(zhì)濃度成正比，據(jù)此可測定蛋白質(zhì)濃度。 ? 【 試劑 】 ? 試劑 A： ? 分別稱取 10g BCA二鈉鹽、 20g無水碳酸鈉、 、 4g氫氧化鈉 、 酸氫鈉，混合調(diào) PH值至 ，加水至 1L。 ? 【 優(yōu)缺點(diǎn) 】 ? (一 ) 操作簡單，快速， 45分鐘內(nèi)完成測定，比經(jīng)典的 Lowary法快 4倍且更加方便； ? (二 ) 準(zhǔn)確靈敏，試劑穩(wěn)定性好， BCA試劑的蛋白質(zhì)測定范圍是 20200μg/ml，微量 BCA測定范圍在 。12H2O ? KCI ? 將上列試劑按次序加入定量容器中，加適量蒸餾水溶解后，再定容至 1000mL
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