血清蛋白質(zhì)濃度定量測定-文庫吧資料
2025-01-12 09:07本頁面
【正文】 試劑盒 市面有售。 ? 【 優(yōu)缺點(diǎn) 】 ? (一 ) 操作簡單，快速， 45分鐘內(nèi)完成測定，比經(jīng)典的 Lowary法快 4倍且更加方便； ? (二 ) 準(zhǔn)確靈敏，試劑穩(wěn)定性好， BCA試劑的蛋白質(zhì)測定范圍是 20200μg/ml，微量 BCA測定范圍在 。（純度可經(jīng)凱氏定氮法測定蛋白質(zhì)含量而確定） ： ? 取 6支試管，編號后分別加入 0mL、 、 、 、 、 蛋白質(zhì)溶液 (BSA)，然后各管分別用去離子水補(bǔ)充到 ，最后各試管中分別加入， 每加完一管 ， 立即 在漩渦混合器上 混合 （ 注意不要太劇烈，以免產(chǎn)生大量氣泡而難于消除 ），以蛋白質(zhì)的蛋白含量為橫坐標(biāo)、吸光度 A為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。BCA工作液在 24小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。 ? BCA工作液： ? 試劑 A 100ml ＋ 試劑 B 2ml混合。 ? 【 試劑 】 ? 試劑 A： ? 分別稱取 10g BCA二鈉鹽、 20g無水碳酸鈉、 、 4g氫氧化鈉 、 酸氫鈉，混合調(diào) PH值至 ，加水至 1L。 【 原理 】 ： 基本原理 ? BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量： ? 在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)與 Cu2+絡(luò)合并將Cu2+還原成 Cu+（ biuret reaction）。BCA 法定量蛋白質(zhì)濃度 ? BCA法是近來廣為應(yīng)用的蛋白定量方法。 ? 操作簡便，快速，靈敏度高，準(zhǔn)確，試劑穩(wěn)定性好，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，抗干擾能力強(qiáng) 【 原理 】 ：堿性條件下，蛋白將 Cu2+還原為Cu+， Cu+與 BCA試劑形成紫顏色的絡(luò)合物，測定其在 562nm
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