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血清蛋白質濃度定量測定(參考版)

2025-01-09 09:07本頁面
  

【正文】 ? (三) 再從標準管中選擇一管與測定管光密度相接近者,求出待測血清中蛋白質濃度(g/L)。 ? 【 計算 】 ? (一) 繪制標準曲線。 即:將蛋白質樣品作適當稀釋(最好多做幾個梯度,如作 2倍、 4倍、 8倍稀釋 ? 4. 各孔加入 200微升 BCA工作液,用加樣槍輕輕吹打混勻(注意:不要弄出氣泡影響讀數(shù)), 37℃ 放置 3060分鐘。在選擇測定方法時,可根據(jù)實驗要求和實驗室條件決定。目前 BCA法的試劑盒市面有售。(純度可經(jīng)凱氏定氮法測定蛋白質含量而確定) ? 待測樣品:用雙縮脲測定法的樣品稀釋而成。 ? BCA工作液:試劑 A 100ml + 試劑 B 2ml混合。 ? 【 試劑 】 ? 試劑 A: 1% BCA二鈉鹽 ? 2%無水碳酸鈉 ? %酒石酸鈉 ? %氫氧化鈉 ? %碳酸氫鈉 ? 混合調 PH值至 。 ? 總之,雖然蛋白質含量的測定方法很多,但是,還沒有一個完美的方法。 ? 此法測定蛋白質濃度,近些年被科研工作者廣泛選用。12H2O ? KCI ? 將上列試劑按次序加入定量容器中,加適量蒸餾水溶解后,再定容至 1000mL,調 pH值至 , 高壓消毒滅菌 112Kpa20min,冷卻后,保存于 4℃ 冰箱中備用。 ? 將稀釋后的標準品( )按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20微升分別加到 96孔板的蛋白標準品孔中,加標準品稀釋液補足到 20微升。 檢測濃度下限達到 25 微克 /毫升,最小檢測蛋白量達到 ,待測樣品體積為 1~ 20微升。目前 BCA法的
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