chapter2蛋白質(zhì)-3-蛋白質(zhì)分離技術(shù)介紹(完整版)
【正文】 polyacrylamide gel electrophoresis, SDSPAGE)。 ?離子交換層析 2．蛋白質(zhì)的純化方法 離子交換層析 這是一種 高效分離純化蛋白 的方法。 （ 1）透析法（ dialysis) 凝膠過濾原理 當(dāng)不同大小的蛋白質(zhì)顆粒流經(jīng)凝膠柱時，比凝膠網(wǎng)孔大的分子不能進(jìn)入凝膠珠內(nèi)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，而被排阻在凝膠珠外，隨著溶劑在凝膠珠之間的空隙向下移動并最先流出柱外；比網(wǎng)孔小的分子能不同程度地自由出入凝膠珠的內(nèi)外。 (2)根據(jù)蛋白質(zhì)的特性，選擇不同的溶劑進(jìn)行抽提 。Chapter 2 蛋白質(zhì) Chapter 2 蛋白質(zhì) 蛋白質(zhì)的概念、重要性及分類 氨基酸 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能的關(guān)系 蛋白質(zhì)的性質(zhì) 蛋白質(zhì)的提取、分離和純化 蛋白質(zhì)的分離、純化 研究一個新的蛋白質(zhì)首先要從它的 基本性質(zhì) 作為突破口，然后 根據(jù)它的基本性質(zhì)進(jìn)行分離純化 ，最終用 純品 對其進(jìn)行分析鑒定。 水溶性蛋白用 中性緩沖溶液 抽提； 酸性蛋白用 稀堿性溶液 抽提； 脂溶性蛋白用 表面活性劑 抽提等。 大分子 小分子 凝膠顆粒 凝膠排阻示意圖解 凝膠過濾層析 蛋白質(zhì)分子一般有兩種形狀 ， 一種是 球形分子 ， 另一種是 線性分子 。其原理 是不同的蛋白質(zhì)分子 對于固定化在載體上的 特殊配基 具有不同的識別 和 結(jié)合能力 。主要用于蛋白質(zhì)亞基分子量的測定。 d. 聚丙烯酰胺凝膠分子篩作用 不同濃度的凝膠和交聯(lián)度，形成不同大小的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，它對蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物具有阻滯作用。 影響結(jié)合的因素主要有三個 : SDS單體的濃度 SDS在水溶液中以單體和 SDS復(fù)合物混合存在的 ， 能與蛋白質(zhì)結(jié)合的只能是單體 。 ② 等電聚焦電泳 (isoelectric focusing, IEF ） a. 原理 : 通常是指聚丙烯酰胺凝膠等電聚焦電泳 。 B 載電功能：
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