臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的質(zhì)量保證ppt97(1)-資料下載頁(yè)
2025-01-13 17:28本頁(yè)面
【正文】 控測(cè)定值按從小到大排列，即 x x x x x x ……x n（ x1為最小值， xn為最大值）； n 計(jì)算均值 ()和標(biāo)準(zhǔn)差 (s)。n 按下述公式計(jì)算 SI上限 和 SI下限 值； SI上限 =（ x最大值 － 均值） /s SI下限 =（ 均值－ x最大值 ） /sn 將 SI上限 和 SI下限 值與 SI值表中的數(shù)值比較。 質(zhì)控結(jié)果的判斷 n SI上限 和 SI下限 值均 表 7中 n2s對(duì)應(yīng)的值時(shí)，說(shuō)明測(cè)定質(zhì)控測(cè)定值的變化在 2s之內(nèi)，是可以接受的。n 如 SI上限 和 SI下限 值中之一處于 n2s 和 n3s對(duì)應(yīng)的值之間時(shí)，說(shuō)明該質(zhì)控測(cè)定值的變化在 2s～ 3s之間，處于 “告警 ”狀態(tài)。n 當(dāng) SI上限 和 SI下限 值之一 n3s對(duì)應(yīng)的值時(shí)，說(shuō)明該質(zhì)控測(cè)定值的變化已超出 3s，屬 “失控 ”。室內(nèi)質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)的評(píng)價(jià) n IQC為一集體活動(dòng)，除實(shí)際測(cè)定者外，還應(yīng)有另外一人對(duì)測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)檢。n 不能將 IQC作為一個(gè)監(jiān)察方法，當(dāng)發(fā)現(xiàn)一次測(cè)定未達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)以建設(shè)性的而非批評(píng)的方式去探查失控的原因。n 除了將 IQC數(shù)據(jù)作為日常質(zhì)控外，還應(yīng)定期評(píng)價(jià)累積數(shù)據(jù)以監(jiān)測(cè)在測(cè)定操作中的長(zhǎng)期變化趨勢(shì)。n 評(píng)價(jià)應(yīng)定期進(jìn)行。弱陽(yáng)性質(zhì)控樣本常見(jiàn)的失控原因 n 核酸提取中的隨機(jī)誤差。如核酸提取中的丟失、有機(jī)溶劑的去除不徹底、標(biāo)本中擴(kuò)增抑制物的殘留等。 n 儀器的問(wèn)題。如擴(kuò)增儀孔間溫度的不均一性、孔內(nèi)溫度與所示溫度的不一致性等。 n 試劑的問(wèn)題。如 Taq酶和 /或逆轉(zhuǎn)錄酶的失活、探針的純度及標(biāo)記效率和核酸提取試劑的效率等。 陰性質(zhì)控樣本的失控原因 n主要為擴(kuò)增產(chǎn)物的 “ 污染 ” 和 /或臨床標(biāo)本的核酸提取過(guò)程中發(fā)生的標(biāo)本間的交叉 “ 污染 ” . 室內(nèi)質(zhì)控的局限性n IQC可確保每次測(cè)定與確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一致，但不能保證在單個(gè)的測(cè)定樣本中不出現(xiàn)誤差。比如樣本鑒別錯(cuò)誤、樣本吸取錯(cuò)誤、結(jié)果記錄錯(cuò)誤等。此類誤差的發(fā)生率在不同的實(shí)驗(yàn)室有所不同，一般要求小于 %，且應(yīng)均勻地分布于測(cè)定前、測(cè)定中和測(cè)定后的不同階段。影響臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)結(jié)果的最關(guān)鍵因素n產(chǎn)物 “ 污染 ” （ Carryover)n測(cè)定人員的操作： 標(biāo)本混淆；貼錯(cuò)標(biāo)簽、核酸提取等n試劑避免基因擴(kuò)增檢驗(yàn)假陽(yáng)性結(jié)果的措施n 嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室分區(qū)；n 使用帶 “ 濾心 ” 的吸頭；n 設(shè)立 “ 陰性 ” 質(zhì)控（與標(biāo)本同時(shí)處理）；n 使用防 “ 污染 ” （含 UNG）的 PCR試劑；n 臨床 “ 假陽(yáng)性 ” 問(wèn)題：病原微生物如結(jié)核桿菌經(jīng)藥物治療后已死亡，但 PCR仍可為陽(yáng)性，故治療結(jié)束后至少兩周內(nèi)不宜做 PCR檢測(cè)。避免基因擴(kuò)增檢驗(yàn)假陰性結(jié)果的措施n 避免由于來(lái)自于標(biāo)本的血紅蛋白、肝素、某些激素或來(lái)自標(biāo)本處理中的去垢劑、有機(jī)溶劑的抑制作用的措施：純化核酸；標(biāo)本重復(fù)雙份測(cè)定；稀釋標(biāo)本。n 使用 “ 內(nèi)質(zhì)控 ” （ Internal Control,IC)以避免由于試劑、擴(kuò)增儀或標(biāo)本處理不當(dāng)所致的假陰性；須注意的是，如果靶濃度很高，可致在靶核酸和 IC之間產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)，而使 IC受抑制，此時(shí) IC可為陰性。室間質(zhì)量評(píng)價(jià)（ EQA）nIQC確保實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)測(cè)定質(zhì)量的一致性，而 EQA則提供將實(shí)驗(yàn)室測(cè)定情況與一室間和客觀標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行回顧性比較的數(shù)據(jù)。nEQA在質(zhì)量保證中對(duì) IQC有一補(bǔ)充作用。EQA 的程序設(shè)計(jì)n 確定質(zhì)評(píng)方案 ,定期發(fā)放質(zhì)評(píng)樣 本；n 要求參加質(zhì)評(píng)實(shí)驗(yàn)室報(bào)告結(jié)果的單位要一致，以便于統(tǒng)計(jì)；n 報(bào)告要清楚、簡(jiǎn)潔； n 要求參評(píng)實(shí)驗(yàn)室在測(cè)定 EQA樣本時(shí)，要以與常規(guī)樣本完全相同的方式測(cè)定； n 對(duì)測(cè)定方法、試劑及儀器等歸納總結(jié)；n 對(duì)參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的測(cè)定要有評(píng)價(jià)； n EQA報(bào)告要迅速及時(shí)。 EQA質(zhì)評(píng)樣本 n樣本特征與患者樣本應(yīng)盡量一致n樣本濃度與試驗(yàn)的臨床應(yīng)用相適應(yīng)n在樣本發(fā)放的條件下穩(wěn)定n不存在不可避免的傳染危險(xiǎn)性EQA靶值n定性測(cè)定，應(yīng)為明確的陰性或陽(yáng)性n定量測(cè)定，則提供參考方法值或參加實(shí)驗(yàn)室的修正均值或參考實(shí)驗(yàn)室均值或方法或歸組的方法均值評(píng)價(jià)方法n 特定參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的評(píng)分根據(jù)其與其它實(shí)驗(yàn)室得分之間的關(guān)系，可分為絕對(duì)評(píng)分和相對(duì)評(píng)分兩種模式。 n 絕對(duì)評(píng)分 就是根據(jù)已定的靶值對(duì)參評(píng)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的每份質(zhì)評(píng)樣本計(jì)分，然后再計(jì)算該次質(zhì)評(píng)的總分，以得分的高低評(píng)價(jià)參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的水平。 n 相對(duì)評(píng)分 則是將參評(píng)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)評(píng)得分與所有參評(píng)實(shí)驗(yàn)室的平均分進(jìn)行比較，觀察其得分在全部參評(píng)實(shí)驗(yàn)室中所處的位置。 相對(duì)評(píng)分和絕對(duì)評(píng)分的例子n相對(duì)評(píng)分：英國(guó) NEQAsn絕對(duì)評(píng)分：美國(guó) CAP采用何種評(píng)分方法較好？n 建立一個(gè)質(zhì)評(píng)體系，上述絕對(duì)評(píng)分和相對(duì)評(píng)分的方法均可以采用，其實(shí)質(zhì)內(nèi)容并無(wú)太大的差別，只不過(guò)是表現(xiàn)形式的不同，尤其是在定量測(cè)定。從室間質(zhì)量評(píng)價(jià)對(duì)改善實(shí)驗(yàn)室測(cè)定質(zhì)量的作用來(lái)看，究竟是采用上述哪一種或另外制定的評(píng)價(jià)方法其實(shí)并不重要，關(guān)鍵是要有一個(gè)評(píng)價(jià)方法，從而以其為標(biāo)準(zhǔn)去評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的測(cè)定。 EQA對(duì)測(cè)定技術(shù)的評(píng)價(jià)n 使用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法n 全面地對(duì)方法、試劑和單個(gè)參評(píng)實(shí)驗(yàn)室測(cè)定技術(shù)進(jìn)行評(píng)價(jià)n 指明嚴(yán)重誤差n 適當(dāng)時(shí)評(píng)價(jià)測(cè)定的其它方面（如測(cè)定干擾）。EQA的局限性n參評(píng)實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有同等的對(duì)待 EQA樣本和患者樣本n可能會(huì)妨礙給出不同結(jié)果的改良方法的發(fā)展n在不同的 EQA程序中，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的評(píng)價(jià)可能不同謝 謝！謝謝觀看 /歡迎下載BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH
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