【正文】 情況。目前的商品試劑盒大部分沒采用內(nèi)標方法質控。因此在測定血清/血漿病原體核酸如HBV DNA、HCV RNA等時，應使用已知的弱陽性血清/血漿作為質控樣本，與待測臨床標本等同處理提取核酸及擴增，以判斷逆轉錄及擴增檢測的效果。使用這些外加弱陽性質控不但可檢測擴增反應液的質量，還可獲得有關PCR試劑的檢測下限和特異性的信息。這些質控樣本在擴增檢測時必須使用與患者的標本相同的主反應混合液。每一個PCR實驗中都必須設有外加陰性質控(污染監(jiān)測質控)，為判斷擴增過程中污染出現(xiàn)的階段，陰性質控可包括如下幾種，即在樣品制備的整個過程中所帶的空白管、僅有擴增反應液但不含擴增模板的反應管、陰性標本等。陰性標本可以評估PCR實驗的綜合質量。在擴增靶RNA的RTPCR實驗中，可做省略逆轉錄的污染質控，通過這種方法，可發(fā)現(xiàn)以前擴增的DNA片段所引起的污染。(3)板上雜交和膜上斑點印跡雜交的質控：在板上雜交和斑點雜交時，陽性和陰性質控應該在同一板或膜上與病人標本平行進行分析，這可排除不同反應中因使用不同雜交條件所致的對結果的錯誤解釋。(4)測定結果的評價與報告：采用實時熒光定量PCR檢測方法，在判斷結果時，應先對擴增的熒光信號作出定性判斷，然后再進行定量分析，避免一些非特異熒光信號對結果分析的干擾。結果的報告必須簡單清楚。定性測定報告“陽性”或“陰性”即可。定量測定則必須報告量的多少，如結果高于測定方法線性范圍上限，則對樣本稀釋后再測，結果乘上稀釋倍數(shù)；如結果低于方法的測定范圍下限，則報?lt。多少即可，不能報告為“0”或“陰性”。室間質量評價所有開展臨床基因擴增檢驗的實驗室都必須參加由衛(wèi)生部臨床檢驗中心組織的全國臨床基因擴增檢驗項目的室間質量評價，評價結果將作為其開展臨床基因擴增檢驗的依據(jù)之一。本工作規(guī)范自公布之日起實施。第四篇：臨床基因擴增檢驗實驗室規(guī)章制度臨床基因擴增檢驗實驗室規(guī)章制度一、臨床基因擴增檢驗實驗室的規(guī)范化設置及其管理臨床基因擴增檢驗實驗室四個隔開的工作區(qū)域中每一區(qū)域都須有專用的儀器設備。各區(qū)域都必須有明確的標記，以避免設備物品如加樣器或試劑等從其各自的區(qū)域內(nèi)移出從而造成不同的工作區(qū)域間設備物品發(fā)生混淆。進入各個工作區(qū)域必須嚴格遵循單一方向順序，即只能從試劑貯存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、擴增反應混合物配制和擴增區(qū)(簡稱擴增區(qū))至產(chǎn)物分析區(qū)，避免發(fā)生交叉污染。在不同的工作區(qū)域應使用不同顏色或有明顯區(qū)別標志的工作服，以便于鑒別。此外，當工作者離開工作區(qū)時，不得將各區(qū)特定的工作服帶出。清潔方法不當也是污染發(fā)生的一個主要原因，因此實驗室的清潔應按試劑貯存和準備區(qū)至擴增產(chǎn)物分析區(qū)的方向進行。不同的實驗區(qū)域應有其各自的清潔用具以防止交叉污染。(一)試劑貯存和準備區(qū)下述操作在該區(qū)進行：貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應混合液的制備。(二)標本制備區(qū)在該區(qū)進行下述操作：臨床標本的保存，核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。(三)擴增區(qū)下述工作在本區(qū)內(nèi)進行：DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。在巢式PCR測定中，通常在第一輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進行。不能從本區(qū)再進入任何“上游”區(qū)域，可降低本區(qū)的氣壓以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。(四)擴增產(chǎn)物分析區(qū)下述操作在本區(qū)內(nèi)進行：擴增片段的測定二、臨床基因擴增檢驗實驗室質量保證臨床基因擴增檢驗實驗室質量保證涉及到整個基因擴增檢驗的所有階段，即測定分析前的標本采集處理、測定中的核酸提取、擴增和產(chǎn)物分析以及測定后的結果報告等。第五篇：臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收報告(一)實驗室所屬法人單位名稱:地址:郵編:法定代表人:實驗室負責人:聯(lián)系人:電話:傳真:(二)接受現(xiàn)場技術驗收的實驗室代表姓名及職務::衛(wèi)生部下發(fā)文《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》和《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》:::合格,建議授予驗收合格證書?；竞细?尚存在部份缺陷,缺陷為項,限期改進,改進后授予驗收合格證書。不合格,停止驗收,實驗室改進后需重新申請.(一)驗收中發(fā)現(xiàn)的問題及意見:附件1:臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收表。附件2:臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收意見匯總表。附件3:整改要求.(二)需要說明的其它問題:□如果有的話見附件4。□無.(三)驗收評審員姓名及簽名:主評審員姓名:簽名:評審員姓名:簽名:簽名:簽名:協(xié)調員姓名:簽名:簽字時間:(四)簽字地點:驗收評審組意見:附件1臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收表序號驗收內(nèi)容驗收意見符合基但本有符缺合陷不符合缺此項暫不需考核評論與說明實驗室設置和設備實驗室的規(guī)范化分區(qū):原則上應分為四個區(qū),但如使用全自動擴增檢測儀,區(qū)域可適當合并各工作區(qū)的明確標記實驗室應配備開展臨床基因擴增檢測所需的所有儀器設備(包括質控物).保證《臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》和《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》試劑貯存和準備區(qū)冰箱?；靹蚱?。微量加樣器?？梢苿幼贤鉄?。專用工作服和工作鞋。消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等)。專用實驗記錄本,標本制備區(qū)(a)冰箱(2~8℃和20℃或80℃)。高速臺式冷凍離心機(c)水浴箱和/或加熱模塊(d)超凈工作臺或防污染罩混勻器。注:請在驗收所選項打“臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收表序號驗收內(nèi)容驗收意見符合基但本有符缺合陷不符合缺此項暫不需考核評論與說明微量加樣器?？梢苿幼贤鉄?。專用工作服和工作鞋。消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等)。專用實驗記錄本,擴增區(qū)(a)核酸擴增儀。微量加樣器?？梢苿幼贤鉄?。專用工作服和工作鞋。消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等)。專用實驗記錄本,擴增產(chǎn)物分析區(qū)微量加樣器?？梢苿幼贤鉄?。專用工作服和工作鞋。消耗品(帶濾心吸頭,一次性手套等)。專用實驗記錄本,實驗室的設施,工作區(qū)域,能源,照明,采暖,通風等實驗室應配備溫度濕度計,:請在驗收所選項打”“.臨床基因擴增檢驗實驗室技術驗收表序號驗收內(nèi)容驗收意見符合基但本有符缺合陷不符合缺此項暫不需考核評論與說明應有實驗室”內(nèi)務管理(如人員流動,清潔等)制度。實驗室應有關化學試劑管理,廢棄血清處理,生物防護等的措施實驗室應配備足夠數(shù)量的人員。這些人員必須經(jīng)過培訓,實驗室應有培訓計劃和措施,實驗室應保存其技術人員有關資格證書(如上崗證),培訓,技能和經(jīng)歷,發(fā)表論文,所有設備應有維護程序文件。*如