食品微生物檢驗技術實驗指導-資料下載頁
2025-08-23 21:00本頁面
【正文】 、濕潤、直徑為23mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度。革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗挑取金黃色葡萄球菌可疑菌落進行革蘭氏染色。結果：為革蘭氏陽性球菌，排列是葡萄球狀，無芽胞，無莢膜，致病性葡萄球菌菌體較小，如發(fā)現(xiàn)葡萄球菌,再做血漿凝固E試驗吸取1∶，放入于8mm100mm試管內 ，振蕩搖勻，放36177。1℃溫箱或水浴內，每半小時觀察一次，觀察6h，如呈現(xiàn)凝固，即將試管傾斜或倒置時，呈現(xiàn)凝塊者，被認為陽性結果。同時以已知陽性和陰性葡萄球菌株及肉湯作為對照結果報告（1）初步報告：根據(jù)血平板培養(yǎng)計數(shù)和鏡檢，如發(fā)現(xiàn)有G+葡萄串狀球菌存在，且有溶血性，則初步報告為：“有金黃色葡萄球菌存在，1g樣品約含多少?！? （2）結果報告：根據(jù)培養(yǎng)特性、鏡檢、生化試驗、動物試驗結果，可報告為：“是否是致病性葡萄球菌” .五、思考題金黃色葡萄球菌在BP平板上的菌落特征如何，說明其原理。金黃色葡萄球菌在血平板上的菌落特征如何，說明其原理。確認葡萄球菌為金黃色葡萄球菌的依據(jù)至少應包括哪幾個試驗？ 金黃色葡萄球菌的形態(tài)與染色、培養(yǎng)特征如何？實驗六 霉菌和酵母菌的檢驗 （9課時） 一、目的要求 掌握測定霉菌和酵母菌的方法和技能 熟練無菌操作技術。二、實驗原理 霉菌和酵母可造成食品腐敗變質。有些霉菌的有毒代謝產物能引起急性和慢性中毒，特別是有些霉菌毒素具有強烈的致癌性。一次大量食入或長期少量食入，均能誘發(fā)癌癥。目前已知的產毒霉菌如青霉、曲霉和鐮刀菌在自然界中分布較廣，對食品的侵染機會較多。因此霉菌和酵母也作為評價食品衛(wèi)生質量的指示菌，并以霉菌和酵母計數(shù)來制定食品被污染的程度。目前已有若干個國家制訂了某些食品的霉菌和酵母限量標準。我國已制訂了一些食品中霉菌和酵母的限量標準。三、實驗儀器與材料恒溫箱、水浴鍋、天平、可調式電爐、試管、吸管、三角平等高鹽察氏培養(yǎng)基 生理鹽水、樣品（醬油、乳粉）四、方法步驟（一）基本操作過程： 樣品稱量→樣品的稀釋→傾注平皿→培養(yǎng)5天→→計數(shù)報告。（二）樣品的稀釋（樣品的處理） 樣品：糕點、果脯、糖果類，或糧食類 外包裝消毒→無菌稱取樣品25g→加無菌水→加蓋振蕩、吹吸均勻 糕點：如為原包裝，用滅菌鑷子夾下包裝紙，采取外部及中心部位。如為帶餡糕點，取外皮及內餡25g,奶花糕點，采取奶花及糕點部分各一半共25g。 果脯：采取不同部位稱取25g檢樣，加入滅菌水225mL，制成混懸液。 糖果：用滅菌鑷子夾取包裝紙,稱取數(shù)塊共25g，加入預溫至45℃的滅菌水225mL，待溶化后檢驗。 用75%酒精棉球擦拭消毒袋口，以無菌操作開封取樣。稱取檢樣25g，放入裝有適量玻璃珠的滅菌廣口瓶子中。然后加入225mL的滅菌水，采用振搖法（用力快速振搖50次,振幅不小于40cm）振搖30 min，振搖均勻，即為1:10的稀釋液。 用10ml滅菌吸管，吸取1∶10稀釋液10ml，注入無菌試管內，另用帶橡皮乳頭的1ml滅菌吸管反復吹吸50次，使霉菌孢子充分散開。 用1ml滅菌吸管，吸取上述1∶10稀釋液1ml，注入含有9ml滅菌水的試管內，換一支1ml滅菌吸管反復吹吸5次，制成1∶100稀釋液。 另取1ml滅菌吸管，吸取上述1∶100稀釋液1ml，注入含有9ml滅水的試管內，按上項操作順序作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用另一支1ml滅菌吸管。 根據(jù)對檢樣污染的情況估計，選擇3個適宜稀釋度，分別在作10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度的1ml稀釋液于滅菌平皿內，每個稀釋度做2個平皿。 用1ml無菌水作空白對照試驗，做2個平皿。 注意： ①加入檢樣液時，吸管尖端不要觸及瓶口或試管口外部，也不得觸及管內稀釋液，并將吸管內的液體沿管壁小心流加入，以免增加檢液。②吸管插入檢樣液內取樣稀釋時，,調整時應使管尖與容器內緊貼。 ③每遞增稀釋一次，即換用另一支1ml滅菌吸管。（三）倒平板 稀釋液移入平皿后，及時將涼至46℃的培養(yǎng)基（可放置于46℃水浴保溫）傾注入平皿約15ml，并正反轉動平皿使混合均勻。注意： ①培養(yǎng)基不能觸及平皿口邊沿，加入培養(yǎng)基后可正反兩個方向旋轉，但不可用力過度，以免濺起觸及上蓋。 ②檢樣從開始稀釋到傾注最后一個平皿，所用時間不宜過長。（四）培養(yǎng)： 待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置25～28℃溫箱內培養(yǎng)5天，從第3天開始觀察后取出，共觀察培養(yǎng)5天。（五）菌落計數(shù)及報告： 選取菌落數(shù)10～150之間的平板進行計數(shù)。一個稀釋度使用兩個平板，取兩個平板菌落數(shù)的平均值，乘以稀釋倍數(shù)報告。稀釋度選擇及菌落數(shù)報告方式可參考菌落總數(shù)測定的報告方式。五、思考題 菌落總數(shù)測定和霉菌、酵母菌的計數(shù)中，兩者在樣品處理過程中有何不同？列表說明？計數(shù)時又有何異同處？
環(huán)評公示相關推薦
鄂ICP備17016276號-1