食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)-全文預(yù)覽
【正文】 落，接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各1管。增菌培養(yǎng)放于36℃培養(yǎng)6～8h。不形成芽胞，無莢膜，無鞭毛，不運(yùn)動(dòng)，有菌毛。人類對(duì)痢疾桿菌有很高的易感性。 大腸菌群檢驗(yàn)中為什么首先要用乳糖膽鹽發(fā)酵管？ 凡乳糖管產(chǎn)氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性。陽(yáng)性反應(yīng)者，液面呈玫瑰紅色；陰性反應(yīng)液面呈試劑本色。進(jìn)行靛基質(zhì)試驗(yàn)（三）乳糖復(fù)發(fā)酵（證實(shí)試驗(yàn)）接種、鏡檢、靛基質(zhì)試驗(yàn)乳糖發(fā)酵接種 從EMB平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1～2個(gè)同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管，置36177。1℃溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24177。（2）放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)： （1）用1ml移液管吸取稀釋液1ml分別注入單料乳糖膽鹽發(fā)酵管中，每個(gè)稀釋度接種3支，共接種9支。三、實(shí)驗(yàn)儀器與材料顯微鏡、恒溫箱、水浴鍋、天平、可調(diào)式電爐、試管、吸管、三角平等；乳糖膽鹽發(fā)酵管、伊紅美藍(lán)瓊脂、乳糖發(fā)酵管、革蘭氏染色液、生理鹽水、鮮肉等四、方法與步驟程序：樣品處理及初發(fā)酵接種→EMB平板分離→乳糖發(fā)酵（證實(shí)試驗(yàn)）接種、鏡檢、靛基質(zhì)試驗(yàn)→觀察乳糖發(fā)酵結(jié)果（一）樣品處理及初發(fā)酵接種：樣品處理與稀釋（無菌操作） 食品中大腸菌群數(shù)系以每100g（或ml）檢樣內(nèi)大腸菌群最近似數(shù)（the 大腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。二、實(shí)驗(yàn)原理 一、目的要求 為什么營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在使用前要保持地（46177。 清涼飲料、調(diào)味品、糕點(diǎn)、果脯、酒類等：37℃培養(yǎng) 24h五、思考題 水產(chǎn)品： （2）瓊脂凝固后，就立即將平板放入培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，以免細(xì)菌蔓延生長(zhǎng)。 注意： 待瓊脂凝固后，翻轉(zhuǎn)平皿，置36177。 ②檢樣從開始稀釋到傾注最后一個(gè)平皿，所用時(shí)間不宜超過20min。 ①培養(yǎng)基不能觸及平皿口邊沿，加入培養(yǎng)基后可正反兩個(gè)方向旋轉(zhuǎn)，但不可用力過度，以免濺起觸及上蓋。 稀釋液移入平皿后，應(yīng)及時(shí)將涼至46℃的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（放置于46℃水浴保溫）傾注入平皿約15ml，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。 ④每遞增稀釋一次，即換用一支1ml滅菌吸管。③進(jìn)行稀釋時(shí)，應(yīng)使吸管內(nèi)的液體沿管壁小心流加入，以免增加檢液。②吸管插入檢樣液內(nèi)取樣稀釋時(shí)，,調(diào)整時(shí)應(yīng)使管尖與容器內(nèi)壁緊貼。 注意： 另取1ml滅菌吸管，按上項(xiàng)操作順序作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用另一支1ml滅菌吸管。 用75%酒精棉球擦拭消毒袋口，用無菌剪刀開封取樣。外包裝消毒→無菌稱樣品25g→加無菌生理鹽水→加蓋振蕩搖均勻 掌握國(guó)際法測(cè)定菌落總數(shù)的方法和技能二、實(shí)驗(yàn)原理菌落總數(shù)是指食品經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后，所得1g或1ml檢樣中所含細(xì)菌菌落總數(shù)。 加壓蒸汽滅菌的原理是什么？是否只要壓力表上的指針指到所需的壓力時(shí)就能達(dá)到所需滅菌溫度？為什么？五、思考題 檢查殺菌鍋各部件是否正?！铀b鍋→加蓋密封→通電加熱→排空氣（大量蒸汽排出時(shí)，維持5 min）→升溫→恒溫殺菌→斷電降溫→開蓋→取出物品棉塞的2/3應(yīng)在管內(nèi)或瓶?jī)?nèi)，上端露出少許棉花便于拔取。堵棉塞的主要目的是過濾空氣，避免污染。在漏斗下口處套有一段透明膠管，膠管下部用彈簧夾夾緊。用紗布過濾時(shí)，最好折疊成六層，用濾紙過濾時(shí)，可將濾紙折疊成瓦棱形，鋪在漏斗上過濾。 加熱溶解蛋白胨極易吸水，稱量時(shí)動(dòng)作要快。 儀器7H2O 細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固性與其本身的含水量有關(guān)，在菌體受熱時(shí)，當(dāng)環(huán)境和細(xì)胞內(nèi)含水量越大，則蛋白質(zhì)凝固就越快，反之含水量越小，凝固緩慢。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。例如食品檢驗(yàn)中常用的麥康凱培養(yǎng)基是一例。 鑒別培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別，因而有助于快速鑒別某種微生物。在某種程度上講，增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基。 由于各類微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求不同，培養(yǎng)目的和檢測(cè)需要不同，因而培養(yǎng)基的種類很多，要根據(jù)培養(yǎng)目的和檢測(cè)需要不同，選擇配制不同的培養(yǎng)基。 一、目的要求二、實(shí)驗(yàn)原理培養(yǎng)基是人工配制的適合于不同微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，它是進(jìn)行科學(xué)研究，生產(chǎn)微生物制品及應(yīng)用等方面的基礎(chǔ)。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長(zhǎng)；而制霉菌素、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長(zhǎng)；結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng)等。增殖培養(yǎng)基 在自然界中，不同種的微生物常生活在一起，為了分離我們所需要的微生物，在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以增加這種微生物的繁殖速度，逐漸淘汰其它微生物，這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中。有些培養(yǎng)基是具有選擇和鑒別雙重作用。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時(shí)由于蒸汽不能溢出，而增加了滅菌器內(nèi)的壓力，從而使沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度。干熱滅菌是利用高溫使微生物細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。三、試劑和儀器MgSO4 天平、高壓
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