[醫(yī)藥]氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞-資料下載頁(yè)
2025-08-21 14:08本頁(yè)面
【正文】 物可以鋪在一個(gè)單獨(dú)的平皿上（或鋪在軟瓊脂中）。然而如選用氨芐青霉素抗性，則只能將一部分培養(yǎng)物（根據(jù)實(shí)驗(yàn)決定）鋪在單獨(dú)的平皿上。氨芐青霉素抗性功的增加與平皿上所加細(xì)菌數(shù)的增加并無(wú)線性比例關(guān)系，這可能是因?yàn)楸豢股貧⑺赖募?xì)胞可釋放生長(zhǎng)掏物質(zhì)的緣故。14）將平板置于室溫直至液體被吸收。15）倒置平皿，于37℃培養(yǎng)，1216小時(shí)后可出現(xiàn)菌落。如檢查氨芐青霉素抗性，用轉(zhuǎn)化細(xì)胞鋪增板時(shí)密度較低（每個(gè)90mm平板不超過104菌落），于37℃培養(yǎng)平板時(shí)不應(yīng)超過20小時(shí)。氨芐青霉素抗性的轉(zhuǎn)化可將β－內(nèi)酰胺酶分泌到培養(yǎng)基中，迅速滅活菌落周圍區(qū)域中的抗生素。這樣，鋪平板時(shí)密度太高或培養(yǎng)時(shí)間太長(zhǎng)都會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)對(duì)氨芐青霉素敏感的衛(wèi)星菌落。在選擇培養(yǎng)基中不用氨芐青霉素而改用羧芐青霉素，以及將抗生素濃度從60μg/ml增至100μg/ml，可使情況有所改善，但不能徹底根除之
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