dna聚合酶的定義-資料下載頁
2025-08-05 00:27本頁面
【正文】 KD，含有4個或5個亞基，主要負(fù)責(zé)染色體DNA的復(fù)制。DNA聚合酶β，分子量為45KD，僅含有一條鏈，主要作用是修復(fù)核內(nèi)DNA。第三種聚合酶γ，分子量為140KD，存在于線粒體內(nèi)，負(fù)責(zé)催化線粒體DNA的復(fù)制。最近從兔的骨髓細(xì)胞質(zhì)中分離到一種新的DNA聚合酶，這種酶與上述真核生物的DNA聚合酶不同，而與原核生物的聚合酶類似，具有339?！?39。核酸外切酶活性，稱為DNA聚合酶δ。另外，從酵母、原蟲等低真核生物中分離到一些DNA聚合酶。一般來說，這些低等生物都沒有低分子量的DNA聚合酶β，而且與原核生物的DNA聚合酶相似，有339。→539。外切酶活性。實驗室常用的耐熱DNA聚合酶 耐熱DNA聚合酶多應(yīng)用在PCR技術(shù)中。各種耐熱DNA聚合酶均具有539。339。聚合酶活性，但不一定具有339。539。和539。339。的外切酶活性。339。539。外切酶活性可以消除錯配，切平末端；539。339。外切酶活性可以消除合成障礙。由于上述這些不同，可以將耐熱DNA聚合酶分為三類： 一、普通耐熱DNA聚合酶 Taq DNA 聚合酶 由一種水生棲熱菌yT1株分離提取出，是發(fā)現(xiàn)的耐熱DNA聚合酶中活性最高的一種，達(dá)200,000單位/mg。具有539。339。外切酶活性，但不具有339。539。外切酶活性，因而在合成中對某些單核苷酸錯配沒有校正功能。 TaqDNA聚合酶還要具有非模板依賴性活性，可將PCR雙鏈產(chǎn)物的每一條鏈339。加入單核苷酸尾，故可使PCR產(chǎn)物具有339。突出的單A核苷酸尾；另一方面，在僅有dTTP存在時，它可將平端的質(zhì)粒的339。端加入單T核苷酸尾，產(chǎn)生339。端突出的單T核苷酸尾。應(yīng)用這一特性，可實現(xiàn)PCR產(chǎn)物的TA克隆法?！ th DNA 聚合酶 從Thermus thermophilus HB8中提取而得，改酶在高溫和MnCl2條件下，能有效地逆轉(zhuǎn)錄RNA；當(dāng)加入Mg2+后，該酶的聚合活性大大增加，從而使cDNA合成與擴增可用一種酶催化?！ 《?、高保真DNA聚合酶 pfu DNA 聚合酶 是從Pyrococcus furiosis中精制而成的高保真耐高溫DNA聚合酶，它不具有539。339。外切酶活性，但具有339。539。外切酶活性，可校正PCR擴增過程中產(chǎn)生的錯誤，使產(chǎn)物的堿基錯配率極低。PCR產(chǎn)物為平端，無339。端突出的單A核苷酸?！ ent DNA 聚合酶 改酶是從Litoralis棲熱球菌中分離出的，不具有539。339。外切酶活性，但具有339。539。外切酶活性，可以去除錯配的堿基，具有校對功能?！ ∪?、DNA序列測定中應(yīng)用的耐熱DNA聚合酶 Promega公司測序級TaqDNA聚合酶 是在TaqDNA聚合酶的基礎(chǔ)上對它進(jìn)行修飾，去除539。339。外切酶活性，保證測序記過的高度準(zhǔn)確性，可產(chǎn)生強度均一的測序條帶，背景清晰?！ ca Best DNA 聚合酶 從Bacillus Caldotenax YTG菌株中提純，并使其539。339。外切酶活性缺失的DNA聚合酶。它的伸長性能優(yōu)越；可抑制DNA二級結(jié)構(gòu)形成，可以得到均一的DNA測序帶?！ ac DNA 聚合酶 從酸熱浴流化裂片菌中分離，無339。539。外切酶活性，可用于DNA測序，但測序反應(yīng)中ddNTP/dNTP的比率要高。
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