維生素的測定-資料下載頁
2025-08-01 13:46本頁面
【正文】 2) 依次測定下列熒光強度： 試樣空白熒光強度（試樣反應(yīng)瓶 A）； 標(biāo)準(zhǔn)空白熒光強度（標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)瓶 A）； 試樣熒光強度（試樣反應(yīng)瓶 B）； 標(biāo)準(zhǔn)熒光強度（標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)瓶 B）。 二、維生素 B 2的測定 維生素 B2即核黃素，在食品中以游離形式或磷酸酯等結(jié)合形式存在。膳食中的主要來源是各種動物性食品，其中以肝、腎、心、蛋、奶含量最多，其次是植物性食品的豆類和新鮮綠葉蔬菜。 分析方法： GB/T — 2022中第一法為熒光法。 第二法為微生物法。 原理 核黃素在 440500nm波長光照射下發(fā)生黃綠色熒光，在稀溶液中，熒光強度與核黃素濃度成正比。在波長 525nm下測定其熒光強度。試液再加入低亞硫酸鈉 (Na2S2O4),將核黃素還原成無熒光的物質(zhì)，然后再測定試液中殘余熒光雜質(zhì)的熒光強度，兩者之差即為食品中核黃素所產(chǎn)生的熒光強度。 操作步驟 樣品均制 → 水解 → 過濾定容 → 氧化去雜質(zhì) →凈化 → 測定 → 結(jié)果計算 樣品提取 水解 : 稱取 210g樣品（約含 10200ug核黃素）于 100ml三角瓶中，加入 50mL ，攪拌直至顆粒分散均勻。用 40mL瓷坩堝為蓋扣住瓶口 , 置于高壓鍋內(nèi)高壓水解， (15lb/in2)30min。水解液冷卻后，滴加 1mol/L氫氧化鈉，取少許水解液，用 %溴甲酚綠檢驗呈草綠（ pH為 ） 酶解 : 含有淀粉的水解液：加入 3ml 10%淀粉酶溶液 ,于3740℃ 保溫 16h。含高蛋白的水解液：加入 3ml 10%木瓜蛋白酶溶液 ,于 3740℃ 保溫 16h。過濾上述酶解液定容至 100mL,用干濾紙過濾。此提取液在 4176。 C冰箱中保存一周。 氧化去雜質(zhì) 視樣品中核黃素的含量取一定體積的樣品提取液及核黃素標(biāo)準(zhǔn)使用液（約含 110ug核黃素）分別于 20mL的帶刻度試管中，加水至 15mL。各管加 ，混勻。加 3%高錳酸鉀溶液 5mL，混勻，放置 2min，使氧化去雜質(zhì)。滴加 3%雙氧水溶液數(shù)滴，直到高錳酸鉀顏色褪掉。劇烈震搖此管，使多余的氧氣逸出。 核黃素的吸附與洗脫 核黃素吸附柱： 硅鎂吸附劑約 1g用濕法裝入柱，占柱長 1/22/3（約 5cm）為宜（吸附柱下端用一團(tuán)脫脂棉墊上），勿使柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡，調(diào)節(jié)流速為 60滴 /min。 過柱與洗脫： 將全部氧化后的央液及標(biāo)準(zhǔn)液通過吸附柱后，用約20mL的熱水洗去樣液中的雜質(zhì)，然后用 （丙酮：冰乙酸：水＝ 5： 2： 9） 將樣品中核黃素洗脫并收集于一帶蓋 10mL刻度試管中，再用水洗吸附柱，收集洗出液并定容至 10mL，混勻后待測熒光。 測定 于激發(fā)波長 440nm，發(fā)射波長 525nm，測量樣品管及標(biāo)準(zhǔn)管的熒光值。 待測品及標(biāo)準(zhǔn)的熒光值測定后，在各管的剩余液（約 57mL）中加 20%次亞硫酸鈉溶液，立即混勻，在 20s內(nèi)測出各管的熒光值，作為各自的空白值 計算 X=(AB/CD) S/m f 100/1000 式中： X —— 樣品中含核黃素的量 ,mg/100g A —— 樣品管熒光值 B —— 樣品管空白熒光值 C —— 標(biāo)準(zhǔn)管熒光值 D —— 標(biāo)準(zhǔn)管空白管熒光值 f —— 稀釋倍數(shù) m —— 樣品的質(zhì)量， g S —— 標(biāo)準(zhǔn)管中核黃素的含量 , μg 100/1000—— 將樣品中核黃素量由 μg/g折算 mg/100g的折算系數(shù)。 食物中煙酸的測定－微生物法 GB/T 原理 某一種微生物的生長，必需有某些維生素，例如，培養(yǎng)基中若缺乏這種維生素該細(xì)菌便不能生長。在一定條件下，該細(xì)菌生長情況，以及它的代謝物乳酸的濃度是與培養(yǎng)基中該維生素的含量成正比的，因此可用酸度或混濁度的測定法來測定樣品中煙酸的含量。 面粉中葉酸的測定方法 原理 葉酸鹽的活性通過干酪乳桿菌（ Lactobacillus casei）的生長情況來評價。 重 點 維生素的分類及性質(zhì)。 VA 、 VB、 VC 的測定方法。
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