酵母擴大培養(yǎng)過程關(guān)鍵控制點-資料下載頁
2025-07-30 03:37本頁面
【正文】 較多合成細胞用的能量(38個ATP)，而無氧發(fā)酵，只能得到2個ATP，而且會積累較多抑制繁殖的酒精。有氧呼吸消耗1g糖可以得到酵母干物質(zhì)，無氧發(fā)酵只有酵母菌有氧呼吸按TCA代謝，與乙醛酸代謝相聯(lián)，合成新的氨基酸，比較容易合成RNA等，供酵母細胞生長需要；若無氧發(fā)酵，當培養(yǎng)基缺乏某一氨基酸（雖然其他氨基酸還很多），由于氨基酸轉(zhuǎn)換困難，細胞合成就受到阻遏。因此，在培養(yǎng)細胞為目的的擴陪過程中，應把氧作為主要的“營養(yǎng)物質(zhì)”。近代研究證明，酵母細胞合成初期需要有酵母甾醇，而酵母甾醇的合成，必須在有氧條件下進行，而且氧是限制性營養(yǎng)物質(zhì)，即擴陪過程必需有適當?shù)耐L培養(yǎng)。通風不足是影響酵母增殖促進細胞衰退的主要因素。國內(nèi)啤酒廠一般供氧不足，且種子罐無攪拌，氣泡較大，故通風的效果不佳；若擴培罐中通風，溶解氧不足，會產(chǎn)生大量酒精，對酵母產(chǎn)生毒害作用。但培養(yǎng)啤酒酵母的目的是為了進行厭氧發(fā)酵，如果一味追求細胞數(shù)，過度通氧（特別是最后1～2級），也會造成酵母細胞呼吸酶活性太強，酵母酶活性不足，影響以后的發(fā)酵。4.漢生培養(yǎng)罐的留種1)每次更新麥汁前:漢生罐應預先通過手動攪拌或無菌壓縮空氣攪拌，使已經(jīng)沉淀的酵母均勻攪拌成乳濁液，攪拌和通風必須足夠打碎結(jié)實的凝聚狀酵母，然后按罐實際容積放走85～90%酵母懸濁液，留下10～15%，再補充新的麥汁。如果留種量偏大，雖然起發(fā)酵時間可縮短，但補充新的麥汁后，新生酵母會偏少，酵母容易衰老。2)更換麥汁:漢生罐不論是否需要擴大，每月要更換一次新的麥汁。更換的麥汁如前所述，必須是優(yōu)良的麥汁，通過殺菌罐，在壓力～下殺菌1h，并迅速在殺菌罐用夾套冷卻至60℃以后，麥汁中必須通入無菌空氣攪拌。麥汁冷卻至比漢生罐培養(yǎng)溫度高3～5℃，使重新發(fā)生凝固的蛋白沉降，如殺菌罐底只有1個出口，應先從罐底排出5～10%帶有大量蛋白質(zhì)沉淀的混濁麥汁；如有高低2個出口，則可從高出口把麥汁壓至漢生罐中。（連接管路預先殺菌）3)留種漢生罐培養(yǎng)：作為留種漢生罐培養(yǎng)，應注意培養(yǎng)時間，切勿使培養(yǎng)過頭，否則在低溫培養(yǎng)酵母時，由于營養(yǎng)缺乏，會加速酵母的衰老。培養(yǎng)方法如下：更換新麥汁，罐內(nèi)保持12～13℃，通風20min后保溫培養(yǎng)，一般6h左右可以起發(fā)。在起發(fā)后，注意冷卻控溫，每個1～2h通風20min，繼續(xù)培養(yǎng)18～24h（在12～13℃），在18h后注意檢查：①發(fā)酵度控制在30～35%。②酵母細胞濃度在107個/ml。如上述兩個指標接近時，應開大冷媒，在4h內(nèi)降至2～3℃，轉(zhuǎn)入酵母飼養(yǎng)階段。飼養(yǎng)階段溫度應盡可能均衡維持在2177。1℃.漢生罐保存酵母時，不論哪一階段，罐壓均保持在+，以防止空氣滲入罐內(nèi)染菌。漢生罐飼養(yǎng)酵母要轉(zhuǎn)入投產(chǎn)擴大培養(yǎng)時，最好按上述步驟培養(yǎng)一次再移種，因為飼養(yǎng)雖然在低溫中，酵母新陳代謝大大減慢，此時酵母也會逐步衰老，若不重新培養(yǎng)，到生產(chǎn)中就擴大，會導致下一代酵母細胞衰老增多，繁殖時間也會延長。如果培養(yǎng)麥汁營養(yǎng)太差，缺乏aN和生長素，可以在麥汁中添加1%麥根（粉粹后用35℃熱水萃取3h，過濾備用）浸出液，增加營養(yǎng)。如果長期用全麥芽汁培養(yǎng)酵母，酵母營養(yǎng)過好，酵母易長的過分肥大而影響發(fā)酵力。也可以在麥汁中加30%葡萄糖，加水調(diào)節(jié)成11176。P，殺菌后培養(yǎng)酵
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