【正文】 定。 4) 確定體內(nèi)清除機(jī)制。 5) 進(jìn)行肝細(xì)胞、肝微粒體等體外藥代動力學(xué)試驗(yàn)可獲得全面的人和動物（如小鼠、大鼠、兔、犬、猴等）體外代謝產(chǎn)物譜、顯示種屬差異、幫助毒理研究動物種屬的選擇。 6) 鑒于同一種放射性同位素在不同結(jié)構(gòu)的化合物（如：藥物或代謝產(chǎn)物）上產(chǎn)生相同的放射能量，放射性代謝產(chǎn)物可用于同種動物穩(wěn)態(tài)時、其他動物種屬及人體中產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物的定性定量分析，有助于人體代謝酶的鑒定，早期發(fā)現(xiàn)人體高比例代謝產(chǎn)物，并為藥物相互作用研究的試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供依據(jù)。 7) 獲得組織分布數(shù)據(jù)。大鼠給藥后不同時間點(diǎn)的整體放射自顯影結(jié)果還可為臨床放射性劑量的計(jì)算提供數(shù)據(jù)。小分子化學(xué)藥物ADME研究中常用的低能量放射性同位素為碳14（14C）和氚（3H）。14C標(biāo)記最為常用，其生物界背景低，生物學(xué)幾乎無同位素效應(yīng)而影響代謝，極少發(fā)生同位素交換，靈敏度較3H高而容易定量。標(biāo)記碳14化合物時應(yīng)選擇代謝穩(wěn)定的位點(diǎn)。體內(nèi)試驗(yàn)除非14C標(biāo)記非常困難或根本無法標(biāo)記、給藥劑量極低需很高的比活性時才選用3H標(biāo)記。3H標(biāo)記相對簡單并比14C標(biāo)記化合物比活性高，尤其適合小劑量給藥化合物或早期生物轉(zhuǎn)化研究；同樣，氚標(biāo)記化合物時也應(yīng)選擇代謝穩(wěn)定的位點(diǎn)作為標(biāo)記位點(diǎn)，不推薦非定位的氚水交換標(biāo)記方式。 14C和3H標(biāo)記化合物的放化純度與化學(xué)純度一般均應(yīng)≥95%，并不含有1%的單一雜質(zhì)。放射性化合物藥代動力學(xué)試驗(yàn)與非標(biāo)記藥物藥代動力學(xué)試驗(yàn)相似，如劑量、給藥途徑、受試動物等等。劑量除按常規(guī)劑量水平(mg/kg)表示外，還需提供放射性劑量（181。Ci/kg）。給藥制劑的配制和給藥途徑一般也應(yīng)與非標(biāo)記藥代動力學(xué)試驗(yàn)相似，特殊情況需說明。為減少實(shí)驗(yàn)誤差，常采用稱重法確定實(shí)際給藥量。樣品收集常包括全血、血漿、尿液、膽汁、糞便、籠具清洗液及組織等樣本。血液樣本的收集時間點(diǎn)可根據(jù)藥物的藥代動力學(xué)參數(shù)決定，排泄物一般采樣7~10天（對于長半衰期的藥物，應(yīng)適當(dāng)延長采樣時間），或采樣至排出的放射性量超過給藥量的90%或連續(xù)2天的排出放射性量小于放射性給藥劑量的1%。進(jìn)行小動物（如小鼠、大鼠等）物質(zhì)平衡試驗(yàn)時，如總放射性回收率90%，應(yīng)測定尸體殘留總放射量，必要時應(yīng)解剖動物，觀察藥物的主要儲留部位和組織。為防止原形藥及代謝產(chǎn)物降解，尿液和膽汁收集過程中容器置放于干冰內(nèi)。樣品處理（如液體樣品離心去固體雜質(zhì)、血漿、糞便及組織提取等）和分析（如應(yīng)用HPLC和在線或離線放射性檢測儀聯(lián)用獲得放射性代謝產(chǎn)物譜）應(yīng)密切關(guān)注放射性的回收率，一般總回收率應(yīng)≥85%。應(yīng)根據(jù)放射性代謝產(chǎn)物譜研究獲得的各代謝產(chǎn)物的血漿暴露量百分比和在排泄物中占給藥百分率選擇需要鑒定的代謝產(chǎn)物，并使用HPLC在線或離線放射性檢測儀幫助鑒定工作中對代謝產(chǎn)物的監(jiān)測。放射性ADME試驗(yàn)報告除包括常規(guī)藥代動力學(xué)研究內(nèi)容外，還應(yīng)提供放射性同位素標(biāo)記藥物的標(biāo)記位置、放化純度、化學(xué)純度、比活度等以及在給藥制劑中的放化穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)提供放射性回收率，代謝產(chǎn)物鑒定需提供質(zhì)譜和在線或離線放射性檢測儀關(guān)聯(lián)數(shù)據(jù)。（三）幾個需要關(guān)注的問題、天然藥物藥代動力學(xué)研究在中藥、天然藥物新藥研究開發(fā)的過程中，通過對活性成分或活性代謝產(chǎn)物非臨床藥代動力學(xué)研究，了解其相關(guān)藥代動力學(xué)參數(shù)，可作為闡明藥效或毒性產(chǎn)生的基礎(chǔ)及了解藥效或毒性反應(yīng)靶器官的依據(jù)，并為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床試驗(yàn)給藥方案提供有關(guān)參考信息。中藥活性成分情況較為復(fù)雜，有些活性成分較為單一，有些物質(zhì)基礎(chǔ)比較清楚但成分較多，有些活性成分復(fù)雜且不清楚。對于活性成分單一的中藥、天然藥物，其非臨床藥代動力學(xué)研究與化學(xué)藥物基本一致。對于非單一活性成分但物質(zhì)基礎(chǔ)基本清楚的中藥、天然藥物，其中藥效或毒性反應(yīng)較強(qiáng)、含量較高的成分，一般需要進(jìn)行藥代動力學(xué)探索性研究。對于活性成分復(fù)雜且物質(zhì)基礎(chǔ)不太清楚的中藥、天然藥物，應(yīng)根據(jù)對其中部分已知成分文獻(xiàn)研究的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)考慮是否進(jìn)行有明確毒性成分的非臨床藥代動力學(xué)研究。若有足夠證據(jù)表明某類結(jié)構(gòu)相似的一類成分中某一個成分的藥代動力學(xué)屬性可以代表該類成分的藥代動力學(xué)特征，可從同類成分中選擇一個代表性成分進(jìn)行測定。被測成分應(yīng)根據(jù)機(jī)體的暴露水平和暴露形式，以及藥效作用/安全性相關(guān)性等因素來確定。此外，在進(jìn)行中藥、天然藥物非臨床藥代動力學(xué)研究時，應(yīng)充分考慮中藥、天然藥物所含化學(xué)成分不同于化學(xué)合成藥物的特點(diǎn)，結(jié)合其特點(diǎn)選擇適宜的方法開展體內(nèi)過程或活性代謝產(chǎn)物的研究，為后續(xù)研發(fā)提供參考。若擬進(jìn)行的臨床試驗(yàn)中涉及到與其他藥物（特別是化學(xué)藥）聯(lián)合應(yīng)用，應(yīng)考慮通過體外、體內(nèi)試驗(yàn)開展藥物相互作用研究。隨著體外生物技術(shù)的發(fā)展，為深層次地了解和闡明藥物的某一性質(zhì)以及與藥效和毒性的相關(guān)性，不少藥代動力學(xué)的體外方法有效地應(yīng)用于藥物代謝和相互作用評價，如體外吸收模型（Caco2細(xì)胞模型）、體外肝系統(tǒng)研究、體外轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)等。這些體外方法學(xué)在推測人藥代動力學(xué)參數(shù)和特征時，提供了同種屬的體外到體內(nèi)的推測。體外方法學(xué)可以通過應(yīng)用不同輔酶、不同選擇性抑制物，不同重組基因純酶，在試驗(yàn)設(shè)計(jì)上，可以彌補(bǔ)動物體內(nèi)方法學(xué)的缺陷。人和動物的體外方法學(xué)結(jié)合動物的體內(nèi)方法學(xué)，在新藥研發(fā)的臨床前階段，可以較準(zhǔn)確和有效地評價藥物的吸收、運(yùn)轉(zhuǎn)、分布、代謝，比如藥物代謝產(chǎn)物鑒定、代謝途徑鑒定、藥物對代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)體的抑制和誘導(dǎo)等，為闡明藥理和毒理作用機(jī)制和設(shè)計(jì)第一個臨床研究劑量和評價潛在性藥物代謝性或運(yùn)轉(zhuǎn)性相互作用提供可靠的參數(shù)。藥代動力學(xué)的體外方法學(xué)的應(yīng)用，在不影響或優(yōu)化臨床前研究信息量的同時，減少了實(shí)驗(yàn)動物的使用，使動物倫理學(xué)的實(shí)施逐漸可行。對于體外研究發(fā)現(xiàn)有明顯種屬差異的藥物，應(yīng)進(jìn)一步分析解釋。由于動物藥代動力學(xué)研究是聯(lián)系動物研究與人體研究的重要橋梁，動物選擇的恰當(dāng)與否是該研究價值大小的關(guān)鍵。應(yīng)盡量選擇適宜的動物來進(jìn)行研究，如口服給藥的藥物不宜選擇食草類動物或與人胃腸道情況差異較大的動物，以免由于吸收的差異造成試驗(yàn)結(jié)果不能充分提示臨床。對于創(chuàng)新性的藥物，可利用體外藥代動力學(xué)手段預(yù)先對動物種屬進(jìn)行篩選，以選擇藥物動力學(xué)特點(diǎn)與人體最接近的動物，提高試驗(yàn)結(jié)果的臨床預(yù)測價值。由此也可為毒性試驗(yàn)選擇合適的動物種屬提供依據(jù)，并對毒性試驗(yàn)與人體的相關(guān)性做出判斷。對映異構(gòu)體具有幾乎相同的物理性質(zhì)（旋光性除外）和化學(xué)性質(zhì)（在手性環(huán)境中除外），通常需要特殊的手性技術(shù)對它們進(jìn)行鑒定、表征、分離和測定，但生物系統(tǒng)常常很容易區(qū)分它們，并可能導(dǎo)致不同的藥代動力學(xué)性質(zhì)（吸收、分布、代謝、排泄），以及藥理學(xué)、毒理學(xué)效應(yīng)的量或質(zhì)的區(qū)別。為評價單一對映體或?qū)τ丑w混合物的藥代動力學(xué)，研究者應(yīng)在藥物開發(fā)前期，建立適用于體內(nèi)樣品對映體選擇性分析的定量方法，為后期研究對映體之間的相互轉(zhuǎn)化以及各自的吸收、分布、代謝和排泄提供方法學(xué)基礎(chǔ)。如果外消旋體已經(jīng)上市，研究者希望開發(fā)單一對映體，則應(yīng)測定該對映體轉(zhuǎn)化為另一對映體的程度是否顯著，以及該對映體單獨(dú)用藥是否與其作為外消旋體組分時的藥代動力學(xué)性質(zhì)一致，這對豐富和解釋單一對映體研發(fā)的立題依據(jù)、優(yōu)化劑量、制定給藥方案具有重要的意義。為監(jiān)測對映異構(gòu)體在體內(nèi)的相互轉(zhuǎn)化和處置，應(yīng)獲得單一對映體在動物體內(nèi)的藥代動力學(xué)曲線，并與其后在臨床I期試驗(yàn)中獲得的藥代動力學(xué)曲線相比較?！?79 —