生物技術藥物的藥代動力學特點及檢測-資料下載頁
2025-01-16 18:44本頁面
【正文】 ,從而鑒別目標蛋白多肽與內(nèi)源性蛋白多肽 ? 該法需將目標蛋白多肽進行同位素標記 ,標記方法有外標法 (化學聯(lián)接法 ) 和內(nèi)標法 (摻入法 ) 2 種； ? 外標法：將標記物如 125 I 通過化學方法偶聯(lián)至完整蛋白中如蛋白中酪氨酸或賴氨酸等，常用的化學方法有氯胺 T 或 Iodogen法 ? 內(nèi)標法：可用即將標記以 3H ,14C 或 35S 等同位素的氨基酸加入生長細胞或合成體系中 ,從而獲得含同位素的蛋白多肽分子 ,但因其操作復雜而少用； ? 標記后蛋白多肽表征： ? 比放射性 ? 放射性純度 ? 標記的蛋白多肽的生物活性。 同位素標記示蹤法 ? 優(yōu)點 ? 靈敏度高 ? 簡便直觀 ? 檢測迅速 ? 尤其適用于蛋白肽類藥物的組織分布 ? 缺點 ? 同位素標記 ? 一般不能進行人體藥物動力學研究 。 ? 可能引起藥物的生物活性及代謝行為發(fā)生變化； ? 由于蛋白多肽進入體內(nèi)會被降解代謝 ,或標記氨基酸的生物再利用，或與其它蛋白質(zhì)結合 ,總的放射性不能代表藥物動力學過程 同位素標記示蹤法 與其他分析手段聯(lián)合應用 ? SDSPAGE ? 三氯醋酸 (TCA) 沉淀法 ? HPLC 法 生物檢定法 ? 利用被測蛋白多肽類藥物某種特異生物反應 ,通過劑量 (濃度 )－效應曲線對目標蛋白多肽進行定量測定的一種分析方法； ? 分為離體分析法和在體分析法； ? 離體分析法通常采用細胞體外培養(yǎng)技術 ,以細胞的增殖、分化或細胞毒性為基礎 ,以細胞數(shù)目的增減等為量效指標，如水蛭素 (hirudin) 凝血酶時間測定； ? 在體分析法則利用蛋白多肽類藥物在整體動物中引起的特異生物學反應，如胰島素降底小鼠血糖。 Pharmacokiic analyses of ADI–SS PEG and ADI–SS PEG measured by enzyme and ELISA assays 生物檢定法 缺點 ? 缺乏特異性 ,不能定量其代謝產(chǎn)物 ,不能區(qū)分內(nèi)源性和外源性細胞因子 。 ? 靈敏度差 ,為啟動生物過程細胞因子的濃度必須在閾水平以上 ,低于閾水平的樣品將不能被定量 ,從而降低了方法的靈敏度 。 ? 耗時 ,為完成分析需時間較長 ,往往達數(shù)日或數(shù)周； ? 重復性差 ,不同實驗室的結果有很大差異性 ,致不同單位之間的比較難以進行 。 ? Pharmacokiics？ 延長半衰期常用方法 ? 聚乙二醇化 (Pegylation) ? 白蛋白融合 (albumin fusion) ? 可溶性受體融合 (soluble receptor fusion) ? 糖鏈化 (glycosylation) Pharmacokiic profiles for interferon (IFN)α2a and 40 kDa polyethylene glycol (PEG)–IFNα IV or SC albutropin（ growth hormone–albumin fusion） or GH in rats and monkeys
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