【正文】 177。177。 CDd177。注：表中縱向的大寫字母代表同一器官不同采收期多糖含量的極顯著性，小寫字母代表同一器官不同采收期多糖含量的顯著性；橫向的大寫字母代表同一采收期不同器官多糖含量的極顯著性，小寫字母代表同一采收期不同器官多糖含量的顯著性，有相同字母表示茬異不顯著，不同字母表示差異顯著(P). 比較辣木同一器官，不同采收期的多糖含量，從表20可以看出，無論是哪一器官，都是在11月采收時多糖含量最高，可達：％、％、％。其中11月采收的辣木葉多糖含量與7月采收的辣木葉多話含量差異不顯著，但顯看大于10月采收的辣木葉多糖含量。極顯著大于9月采收的辣木葉多糖含量：而葉柄和莖的多糖含量在各采收期中差異不顯著，因此，該種植地的辣木最佳采收期是11月。分析辣木同一采收期、不同器官的多糖含量，發(fā)現(xiàn)其辣木葉的多糖含量極顯著大于葉柄和莖的多糖含量。而葉柄和莖之間的多糖含量差異不顯著。比較辣木同一管理水平、不同器官的多糖含量。其中葉的多糖含量投顯著大于葉柄和莖的多糖含量。而葉柄和莖之問的多糖含量差異不顯著。綜合表21和圖1117可以看出：同一器官在不同的管理水平下其多糖含量均未達到顯著水平，但葉柄和莖在低水平的管理條件下其含量略比在中等和高管理水平條件下的多糖含量高，依次為：低中高；葉在中等管理水平下多糖含量最高。表21不同管理水平下辣木葉多糖含量的變化（n=27）器官多糖含量/%高中低葉177。177。177。葉柄177。177。177。莖177。177。177。 注：表中縱向的大寫一母代表同一管理水平不同器官的多糖含量的極顯著性，橫向的大寫字母代表同一器官不同管理水平的辣木多糖含量的極顯著性。有相同字母表示差異不顯著，不同字母表示異顯著(P)。高管理水平：每株辣木施有機肥3050斤；中等管理水平：沒施肥，但在種植地上種了2季花生；地管理水平：沒有施肥也沒種其他作物。圖15 不同管理水平下辣木葉多糖含量的變化圖16 不同管理水平下辣木葉柄多糖含量的變化圖17不同管理水平下辣木莖多糖含量的變化表22不同朝向辣木多糖含量的變化（n=4）朝向多糖含量/%葉葉柄莖背陽177。177。177。向陽177。177。177。注：表中縱向的大寫字母代表同一器官不同方位多糖含量的極顯著性，橫向的大寫字母代表同一方位不同器官多糖含量的極顯著性。有相同字母表示差異不顯著。不同字母表示差異極顯著（P）。由表22的結(jié)果可以看出：同一器官不同朝向的多糖含量葉、葉柄、莖均沒有顯著性差異，比較辣木同朝向不同器官的多糖含量發(fā)現(xiàn)，葉的多糖含量顯著大于葉柄和莖的含量，而葉柄和莖的多轄含量差異不顯著。4討論 黃酮類化合物是中藥中一種有顯著生物活性的有效成分。有關(guān)它的提取、分離、分析和藥理方面的研究報道很多，對于黃酮類化舍物的分離以及單一黃酮成分的定量分析，常用的有；氣相色譜法、高效液相色譜法(HPLC)。在實際生產(chǎn)和科研過程中，對黃酮類化合物的測定現(xiàn)多用高效液相色譜法，該法專屬性強，準(zhǔn)確度高，但樣品處理復(fù)雜，儀器昂貴，實驗成本較高。對于評價和監(jiān)測黃酮含量往往采用分光光度法，分光光度法白20世紀(jì)90年代以來由于其成本低、便于操作等特點，一直廣泛用于植物中黃酮類化臺物含量的測定，是一種快捷有效的方法。本實驗結(jié)合自身實際情況，考慮到方法的簡便、快捷以及可行性，選用了分光光度法。由于黃酮類化合物與鋁枯形成配臺物，實驗中選擇鋁配合物顯色體系來測定辣木提取物中黃酮類化合物的含量。研究已有文獻中用于黃酮類化臺物分光光度法的有不同的顯色體系，所選擇的吸收波長也各有不同。以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品。用分光光度法檢測黃酮類化合物所用的顯色劑主要有NaNO2AL(NO3)3NaOH顯色體系和KAcAlCl3顯色體系。考慮到比色法測定黃酮類化學(xué)物質(zhì)吸收波長時，因溶荊的種類、PH值和溶劑含量的不同，波長會發(fā)生明顯的紅移或紫移。所以宜固定溶劑。實驗中辣木中黃酮類化舍物是用醇和酮等溶劑提取的，考慮到保持溶劑的一致性，減少實驗誤差，采用NaNO2 Al（NO3）3NaOH顯色體系。已有文獻表明，在堿性環(huán)境中，黃酮類化合物與鋁鹽形成配合物，在紫外可見光光譜的355nm，389nm，510nm處有較大吸收。黃酮類化合物的紫外光譜圖上主要有兩個吸收帶：環(huán)肉桂酰系統(tǒng)引起的吸收帶I(300550nm)和環(huán)苯酰系統(tǒng)引起的吸收帶Ⅱ(240280nm)。在堿性環(huán)境中，若加入錯鹽，則黃酮化合物與鋁鹽形成穩(wěn)定的紅色配合物，帶1I會明顯向長波方向移動(紅移)，而在510nm波長處其它成分干擾小，放選擇510nm為測定波長。水浴溫度對總黃酮得率的影響表明，并非水浴溫度越高，總黃酮得率就越高。低溫和較高溫度都不利于總黃酮的提取。溫度過低降低了黃酮的溶解度，不能充分地把材料中的總黃酮提取出來。，易發(fā)生氧化作用而失效，造成總黃酮得率降低。乙醇濃度對總黃酮提取的影響是乙醇的濃度越高，總黃酮的得率越低，％的乙醇兼有極性、。，用乙醇作溶劑具有無毒、無異味、無殘留、安全性好等優(yōu)點。黃酮種類較多包括黃酮類、黃酮醇類、異黃酮類、黃烷酮類等，廣義的范圍還包括查耳酮、嗅酮、異黃烷酮及茶多酚，本實驗只是對辣木的總黃酮進行了提取井初步測定其在不同材料中的含量。進一步可以對菲術(shù)中的黃酮種類進行鑒別并測定其含量。不同植物的黃酮種類不同，應(yīng)用價值也可不相同，關(guān)于辣木黃酮的功效及其在臨床上的應(yīng)用需進一步深入研究。苯酚一硫酸法與蒽酮硫酸法測定多糖含量的實驗原理基本一致，在文獻報道中多糖含量的測定一般采用的都是苯酚硫酸法。苯酚硫酸法的實驗原理為多糖在濃硫酸的作用下水解生成單糖，并迅速脫水成醛，然后與苯酚縮合生成有色化臺物，靈敏度高，顯色穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。本實驗首先采用80％乙醇處理樣品，消除了親脂性雜質(zhì)、單糖、低聚糖及甙類等成分的干擾，結(jié)果可靠。本研究結(jié)果表明，，陳瑞嬌、其測定結(jié)果與本研究有較大差異，原因可能與測定方法、辣木產(chǎn)地、辣木葉采集時間、采集部位等因素有關(guān)。準(zhǔn)確原因還有待進一步研究。常規(guī)提取植物多搪的方法往往是先用95％乙醇或甲醇加熱回流提取以除去單糖、低聚糖、甙類等干擾性成分，然后再加水多次抽提其中的多糖類成分。本實驗在提取過程中發(fā)現(xiàn)，如果先加醉回流除雜，再水提則極容易造成其中的多糖類成分解聚，醇沉?xí)r沉淀析出較少甚至沒有㈣。因此，在辣木多塘的提取中應(yīng)避免長時間高溫抽提。提取時間不宜太長，一般常規(guī)提取為每次l～2h，造成辣木多糖容易解聚的原因可能是其分子量較小的緣故，根據(jù)文獻報道，分子量較小的多糖組分在水溶液系統(tǒng)中的溶解度和聚結(jié)穩(wěn)定性較同類大分子量多糖優(yōu)越，而在醇等有機溶劑中則相反。在提取分離多糖過程中應(yīng)注意外部因素對其生物活性的影響。多糖鏈?zhǔn)怯蓡翁菤埢ㄟ^O醚鍵來連接，自由度與柔性較大，加之多糖鏈上自由羥基很多，易形成氫鍵，使糖鏈間相互締合。因此對多糖提取分離過程產(chǎn)生一定的影響。多糖的空問結(jié)構(gòu)與生物活性密切相關(guān)，因糖鏈的柔性大和締合性導(dǎo)致易變性，引起構(gòu)象變化從而影響生物活性。溫度、pH值、金屬離子和變性荊等能引起構(gòu)象發(fā)生顯著的變化，當(dāng)然在一定范圍內(nèi)去除這些因素也易復(fù)性。因此在分離提取時必須考慮提取劑、沉淀劑、溫度、pH等因素的影響，如稀酸提取時間宜短，溫度不超過60℃，以肪止糖苷鍵斷裂：而多糖樣品脫水干燥時。溫度稍高則變性，喪失或減低水溶性，影響生物活性。植物多糖作為免疫增強劑己引起人們的廣泛關(guān)注，臨床用于糖屎病和腫瘤病人的治療己取得較好療效。辣木多糖含量高。推測辣木多糖具有廣泛的應(yīng)用前景。今后應(yīng)對辣木多糖的藥理功效等作進一步深入研究。辣木總黃酮含量器官間的差異很大，總黃酮含量最高的是花柄，可達6 31％；較高的是葉、花和葉柄：根中的總黃酮含量最低，％。總黃酮含量最高和最低的器官相差達近12倍。因此，以提取辣木黃酮為目的是要注意原材料器官的選擇，葉片是辣木的重要產(chǎn)品器官之一，葉片中的總黃酮含量僅次于花柄，%。從葉片中提取黃酮是要注意選擇45d左右的壯齡葉，擴展中的幼葉和開始老化的葉黃酮含量都會下降。在研究辣木黃酮含量和環(huán)境因素的關(guān)系時我們發(fā)現(xiàn)，凡是使辣木生長速度加快的條件都會引起黃酮含量的降低。如快速生長的幼葉的黃酮含量低于接近成熟的壯齡葉；最適于生長的季節(jié)9月份的黃酮含量低于生長趨于停頓的11月份；不施肥的低肥力水平管理區(qū)的黃酮含量低于施肥的高肥力水平管理區(qū)。這些結(jié)果表明，黃酮在辣木體內(nèi)的合成速度和辣木的生長速度不成比例，也就是說，緩慢的生長更有利于辣木黃酮的積累。，要兼顧生物量和黃酮含量兩個方面。既不能片面追求生物量的最大化，也不能片面追求黃酮含量的最大化。應(yīng)該追求單位面積生物量乘以黃酮含量的最大化。辣木多糖含量的器官問差異也很大。多糖含量在不同器官的分布與黃酮明顯不同，多糖含量最高的器官是根，%，顯著高于其他器官，而根卻是黃酮含量最低的器官：辣木多塘含量較高的器官是花、果實和葉片：葉柄中的多糖含量最少，％，與其他器官差異極顯著。，沒有黃酮的差異大。辣木多糖含量與葉齡、采收期、施肥水平的關(guān)系與黃酮一致，即凡是生長速度快的時期或栽培措旃，辣木所古的多糖含量都比較低：生長趨緩或肥力永平較低對，辣木多糖含量較高。因此，以獲得多糖為目的的辣木栽培除考慮不同器官的多糖含量外。生物產(chǎn)量和多糖含量兩個因素也要兼顧。賀玉林等對黨參質(zhì)量變異的研究表明，黨參不同產(chǎn)地、。由于多糖的構(gòu)成成分和大小的不同種類也比較多，推測不同葉齡、不同采收期、不同管理水平、不同器官的多糖種類也可能有差異。關(guān)于辣木多糖的種類、分子量、功效以及它們與環(huán)境、栽培條件的關(guān)系等問題都有待進一步研究。5結(jié)論：提取次數(shù)提取溫度乙醇用量；用70%的乙醇作為提取溶劑，以20倍的用量。在80℃的水浴條件下，提取3次，%通過實驗反復(fù)驗證此條件是有效的。：提取次數(shù)提取時間溶劑用量提取溫度。通過單因素試驗和正交試驗優(yōu)選的辣木多耱提取的最佳條件為：℃水浴條件下，提取3次。，％。并通過實驗反復(fù)驗證此條件是有效的。：隨著葉齡的增長，辣木葉片的總黃酮含量呈不規(guī)律變化，簸木葉片的多糖含量呈遞增趨勢。當(dāng)葉齡增長到45d時，辣木葉片的有效成分含量達最高，％，％。；總黃酮含量依次為花柄葉花葉柄莖果果莢種子根，其中花柄中的總黃酮含量最高，％，根中的黃酮含量最少，％，總黃酮含量最高和最低的器官相差達近12倍；多糖含量依次為根花果葉花柄種子果莢莖；％，顯著高于其他器官，葉柄中的多糖含量最少，％。：各器官的總黃酮含量都以在11月采收時為最高，％、％、％，以9月采收時為最低；各器官的多糖含量也都以在11月采收時為最高，％，％，%。；葉在中等管理水平下有效成分含量最高：葉柄和莖在低水平的管理條件下有效成分含量比在中等和高管理水平條件下的高，依次為：低中高。其中葉中總黃酮含量無顯著差異，葉柄中總黃酮含量差異極顯著。莖中總黃酮含量差異顯著；各器官中多糖含量均未達到顯著水平。 ：各器官的有效成分含量在向陽和背陽區(qū)之間均沒有顯著性差異。無論背陽還是向陽，不同器官總黃酮含量均為葉葉柄莖。器官間的差異達到了極顯著水平：葉的多糖含量顯著大于葉柄和莖的含量。而葉柄和莖的多糖含量差異不顯著。