【正文】 ；葉在中等管理水平下有效成分含量最高：葉柄和莖在低水平的管理條件下有效成分含量比在中等和高管理水平條件下的高，依次為：低中高。辣木多糖含量與葉齡、采收期、施肥水平的關(guān)系與黃酮一致，即凡是生長速度快的時期或栽培措旃，辣木所古的多糖含量都比較低：生長趨緩或肥力永平較低對，辣木多糖含量較高。辣木多糖含量高。苯酚硫酸法的實驗原理為多糖在濃硫酸的作用下水解生成單糖，并迅速脫水成醛，然后與苯酚縮合生成有色化臺物，靈敏度高，顯色穩(wěn)定，重現(xiàn)性好?？紤]到比色法測定黃酮類化學(xué)物質(zhì)吸收波長時，因溶荊的種類、PH值和溶劑含量的不同，波長會發(fā)生明顯的紅移或紫移。向陽177。綜合表21和圖1117可以看出：同一器官在不同的管理水平下其多糖含量均未達(dá)到顯著水平，但葉柄和莖在低水平的管理條件下其含量略比在中等和高管理水平條件下的多糖含量高，依次為：低中高；葉在中等管理水平下多糖含量最高。177。fF莖177。表15 辣木葉多糖提取條件的正交試驗結(jié)果試驗號總黃酮量/%ABCD111112122231333421235223162312731328321393321K1K2K3X1X2X3R表16 不同提取條件下辣木葉多糖量的方差分析誤差來源離差平方和自由度方差方差比顯著性SsfsFA2B2C2D2誤差8對提取條件組合的正交試驗結(jié)果進(jìn)行直觀分析(表15)和方差分析(表16)，由表15的極差分析結(jié)果表明，在考察的四個因素中，各個因素對辣木提取效果影響程度不同，各因素影響辣木多糖得率的順序依次為：提取次數(shù)(D)提取時間(C)溶劑用量(B)提取溫度(A)。辣木各部位多糖與葡萄糖之間的換算因子如表14所示。由表12和圖14可以看出；葉、葉柄、莖各器官不同朝向的總黃酮含量在向陽和背陽區(qū)之間沒有顯著性差異，無論背陽還是向陽，不同器官總黃酮含量均為葉葉柄莖，器官間的差異達(dá)到了極顯著水平。不同字母表示差異顯著(P)。注：表中縱向的大寫字母代表同一器官不同采收期總黃酮含量的極顯著性，小寫字母代表同一器官不同采收期總黃酮含量的顯著性；，不同字母表示差異顯著(P) 同一采收期不同器官的辣木總黃酮均以葉的含量為最高，極顯著高于葉柄和莖的總黃酮含量，葉柄和莖之間總黃酮含量差異也達(dá)到了顯著水平。11月采收的辣木莖總黃酮含量與8月采收的辣木葉柄總黃酮含量差異不顯著，但顯著大于10月采收的辣木葉總黃酮含量，極顯著大于9月采收的辣木葉總黃酮含量，因此，該種植地的辣木最佳采收期是11月。由表8可以看出：，器官間總黃酮含量依次為：花柄葉花葉柄莖果果莢種子根，其中花柄中的總黃酮含量最高，％；其次為葉片，％；根中的黃酮含量最少，％。％。從圖2可以看出：乙醇濃度在60%～80%的范圍內(nèi)辣木葉總黃酮量較高，其中以70％的乙醇提取效果最好，％；乙醇濃度高于80％提取效果顯著降低，％％。但在不同的提取方法下辣木葉總黃酮量不同，％～％之間，總黃酮量較高的是回流法和水提法，超聲法次之，總黃酮量量較低的是離心法和分級沉淀法。) →606512旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮→加入4倍體積的無水乙醇4℃沉淀過夜→離心(8000rpm，10min) →沉淀物用80%乙醇、丙醇、石油醚依次洗滌→室溫真空干燥得多糖粗品。室溫放置6 min，再加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10％的Al(N∞。隨機(jī)選定30株辣木樹為試驗樣本。為辣木有效成分的開發(fā)和利用建立一種快速、簡便、準(zhǔn)確的提取方法。目前，日本、美國、及歐盟十分重視糖類的研究，歐盟在1994一1998年的研究計劃中啟動了“歐洲糖研究與開發(fā)平臺”，旨在協(xié)調(diào)歐洲的糖研究與開發(fā)，強(qiáng)化在糖的研究成果轉(zhuǎn)化成商品與美國和日本競爭的能力。結(jié)構(gòu)多糖有保護(hù)、支撐的作用?？剐募∪毖?、缺血、抗心率失常、軟化血管、降低血清膽固醇、抑制血小板凝聚、抗?jié)?、抗腫瘤、抗炎、抗過敏、清楚體內(nèi)自由基、抗衰老增強(qiáng)免疫力的作用。以黃酮為例，其色原酮部分原本無色：但在2位上引入苯環(huán)后，即形成交叉共軛體系，并通過電子轉(zhuǎn)移、重排，使共軛鏈延長，因而顯現(xiàn)出顏色。滴人鼻孔，可使人從昏迷中清醒；將根咀嚼后，可敷于蛇傷處，防止毒液擴(kuò)敝。在溶液里呈正電性。(2)富含植物生長促進(jìn)因子 從辣木葉片中獲得的提取物葉面噴施后能促進(jìn)植株健康生長，抗病蟲害，促進(jìn)結(jié)果、增大果實、豐產(chǎn)等。美洲的墨西哥、美國等30多個熱帶、亞熱帶的國家和地區(qū)。并應(yīng)用乙醇回流法和苯酚硫酸法探討了葉齡、器官、產(chǎn)地、采收期、管理水平、朝向等與有效成分含量的關(guān)系。作者簽名：　　 　 　　 日　 期：　　 　 　　 1引言 辣木屬辣木科(Moringaceoe)、辣木屬(MoringaAdans)，為多年生木本植物，是一種有獨特經(jīng)濟(jì)價值的熱帶植物。作為調(diào)料，有辣味。精煉后的辣木油幾乎沒有任何味道，性質(zhì)穩(wěn)定，耐反復(fù)煎炸，是一種高級烹調(diào)用油。(2)花：花汁可治療潰瘍與粘膜炎；其浸提物可做眼藥水；花的傳統(tǒng)用途是興奮、利尿和墮胎。主要包括：黃酮類、黃酮醇類、異黃酮類、黃烷酮類、查耳酮類、異黃烷酮、雙黃酮類等。有的表現(xiàn)出生物活性，有的卻沒有生物活性，而且生物活性亦因其結(jié)構(gòu)的差異而不同。多糖一般沒有精確的分子量，其中的單糖單位可因細(xì)胞的代謝需要增加或減少。特別是多糖制品的功效和多糖類藥物的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的研究都將起到重要促進(jìn)作用。目前國內(nèi)只有張濤等、陳瑞嬌采用苯酚一硫酸分光光度法，陳瑞嬌、彭珊珊等采用葸酮一硫酸比色法測定辣木葉中多糖含量的報道，％、％％。分別在這三個種植區(qū)內(nèi)隨機(jī)選擇30株辣木樹為試驗樣本，在樣本樹上用彩帶做標(biāo)記。，置100ml容量瓶中，加入60%乙醇至刻度，搖勻，／ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。 準(zhǔn)確稱取辣木干樣5g，用10倍量的石油醚80℃回流兩小時，提取兩次→過濾取濾渣→10倍量的80%乙醇80℃回流兩小時除去單糖、多聚糖→過濾取濾渣→加入一定比例的蒸餾水在一定溫度下回流提取，冷卻真空抽濾→取沉淀重復(fù)上一步驟2次→合并上清液→6065℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮→把濃縮液用Sevag法去蛋白：上清液置于一般分液漏斗中，按l：l加入Sevage溶劑(氯仿：正丁醇=4:1)，劇烈搖動20min，使其充分混勻，靜置30min，離心(10000r／min，10min)，棄去蛋白質(zhì)和氯仿層，上層水溶液按此法反復(fù)去蛋白，直至上清液中無明顯的蛋白質(zhì)出現(xiàn)為止。 考慮到上述各因素之間的互作效應(yīng)，(34)進(jìn)行正交試驗。用水提法、甲醇回流法和乙醇回流法均對辣木總黃酮具有較高的提取率。由方差分析結(jié)果可知，但均未達(dá)到顯著水平。bB注：表中相同字母表示差異不顯著，不同字母表示差異顯著（P,P,多重比較采用Duncan）以上結(jié)果表明，辣木葉片中的黃酮在幼嫩的葉中就有較高的含量，隨著葉片的快速擴(kuò)展，在葉片的壯齡期略有降低，可能是由于葉片的生長速度快于黃酮的合成速度；當(dāng)葉面積的擴(kuò)展變緩時，黃酮的積累量達(dá)到了最高值；隨著葉片的老化，黃酮含量出現(xiàn)了下降趨勢。各器官的總黃酮含量都以在兒月采收時為最高，％、%、％；以9月采收時為最低。11177。177。不同字母表示差異極顯著（P）。葉柄177。 圖14 不同提取次數(shù)下提取的辣木葉多糖量條件：5g，80℃,20倍的蒸餾水，每次120min 如圖14所示，其他條件一致的情況下，隨提取次數(shù)的增加。當(dāng)葉齡大于45d時，多塘含量下降。177。比較辣木同一管理水平、不同器官的多糖含量。圖15 不同管理水平下辣木葉多糖含量的變化圖16 不同管理水平下辣木葉柄多糖含量的變化圖17不同管理水平下辣木莖多糖含量的變化表22不同朝向辣木多糖含量的變化（n=4）朝向多糖含量/%葉葉柄莖背陽177。研究已有文獻(xiàn)中用于黃酮類化臺物分光光度法的有不同的顯色體系，所選擇的吸收波長也各有不同。進(jìn)一步可以對菲術(shù)中的黃酮種類進(jìn)行鑒別并測定其含量。因此在分離提取時必須考慮提取劑、沉淀劑、溫度、pH等因素的影響，如稀酸提取時間宜短，溫度不超過60℃，以肪止糖苷鍵斷裂：而多糖樣品脫水干燥時。辣木多糖含量的器官問差異也很大。當(dāng)葉齡增長到45d時，辣木葉片的有效成分含量達(dá)最高，％，％。 ：各器官的有效成分含量在向陽和背陽區(qū)之間均沒有顯著性差異。賀玉林等對黨參質(zhì)量變異的研究表明，黨參不同產(chǎn)地、。辣木總黃酮含量器官間的差異很大，總黃酮含量最高的是花柄，可達(dá)6 31％；較高的是葉、花和葉柄：根中的總黃酮含量最低，％。準(zhǔn)確原因還有待進(jìn)一步研究。已有文獻(xiàn)表明，在堿性環(huán)境中，黃酮類化合物與鋁鹽形成配合物，在紫外可見光光譜的355nm，389nm，510nm處有較大吸收。注：表中縱向的大寫字母代表同一器官不同方位多糖含量的極顯著性，橫向的大寫字母代表同一方位不同器官多糖含量的極顯著性。177。177。dD果177。在此提取條件下，％。其中溶劑用量由10倍上升到20倍時，辣木葉多糖類物質(zhì)浸出率上升比較快，％％，多塘量達(dá)到最大?；亓鞣m然不是多糖量最高的方法。 從上述結(jié)果可以看出，相對管理水平高的施肥區(qū)的辣木總黃酮含量低于不施肥的中和低管理水平，特別是葉柄和莖的總黃酮含量各處理區(qū)間達(dá)到了極顯著差異，這可能是由于施肥區(qū)辣木的生長速度快，生物量的增加迅速，而施肥與否對黃酮合成的影響小于對生長的影響。 辣木分施肥(每株20kg有機(jī)肥)、不施肥間種固氮植物花生和不施肥無間種等三種管理方式，對三種管理方式下的辣木進(jìn)行了不同采收期的分器官分析。177。bB葉柄177。提取時間60min，提取次數(shù)3次，在此提取條件下，％。其中乙醇用量由10倍上升到20倍時，黃酮類物質(zhì)浸出率上升比較快，％％.總黃酮量達(dá)到最大；乙醇用量在20倍以后。吸光度與濃度線形關(guān)系良好.，分置于10ml容量瓶中，各加乙醇至5ml；，測定結(jié)果見圖l。加水150ml溶解，置棕色瓶內(nèi)放冰箱內(nèi)備用)。在510nm波長下測定吸光度，同時以試劑空白作參比。標(biāo)記在45天時分別進(jìn)行采樣，每個處理每次隨機(jī)采摘30片標(biāo)記葉，共采摘3次，形成三次重復(fù).、硝酸鋁、氫氧化鈉、濃鹽酸、鎂粉、硫酸銨、醋酸鉛、三氯化鐵、濃硫酸、無水乙醇、甲醇、丙酮、苯酚、石油醚等均為國產(chǎn)分析純；蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品為分析純。試驗材料的處理是先將各種經(jīng)試驗設(shè)計的新鮮樣品采回后，洗凈，然后于105℃殺青5min，80℃烘至恒重，粉碎，得到供試?yán)蹦痉?。植物多糖藥理作用極其廣泛，其獨特活性和低毒效應(yīng)在臨床應(yīng)用中具有很大潛力。但由于