【導讀】范化管理起到重要的作用。隨著輸血科學技術的進步和血液管理工作要求的提。其中一些原則性的規(guī)定，血站在制定自身的操作規(guī)程時應當根據(jù)實際情。以“宜”表述的內容為推薦性內容。本《規(guī)程》的附錄為資料性附錄，供血站參考。程》的要求，結合具體工作實際，編制適合本血站使用的技術操作規(guī)程。將獻血者本人相貌與其有效身份證件原件核對。證以及外國公民護照等。簡稱BMIS），具體錄入方式有：1）用身份證識讀器讀取身份信息并存入BMIS；詢問獻血者和查詢BMIS有無既往獻血史。應符合要求，不處于被暫時或永久屏蔽狀態(tài)。體檢人員給予必要的指導和溝通。要時進一步用儀器檢測。ALT采用金標法記錄檢測結果和結論并簽名。行對照分析和評價，做出獻血者是否符合獻血條件的判斷并簽名。將健康檢查結果和結論與獻血者溝通。熟悉采血技術操作規(guī)程，尤其應注意關鍵控制點和近期變更的操作步驟。生規(guī)范》的規(guī)定執(zhí)行。人員按卡片準備和核查采血器材的種類和數(shù)量。

　　

【正文】 檢查方法：在光線明亮處，以目力檢查。 物料檢驗報告 所選用的真空采血管必須符合國家相關標準，每一批真空采血管必須有出 廠檢驗報告。 規(guī)格：必須符合使用要求。 有效期：被檢物料必須在有效期內。 檢驗試劑質量檢查 檢驗試劑包括：乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒、丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒、艾滋病病毒抗體診斷試劑盒、梅毒抗體診斷試劑盒、丙氨酸氨基轉移酶試劑盒、血型試劑盒、快速篩查試劑盒等。 檢驗報告 8 對于國家進行批批檢的試劑盒，必須有國家批批檢報告。國家不進行批批檢的試劑，以生產(chǎn)廠商出具的出廠檢驗報告為準。 外觀檢查：每批抽檢 5 盒試劑盒。試劑盒包裝應完整，標識清晰，試劑齊全無滲漏。 運輸要求 試劑運送途中的溫度必須符合試劑說明書要求，供應商必須提供試劑運輸冷鏈監(jiān)控溫度記錄。 有效期：被檢試劑必須在有效期內。 關鍵設備質量檢查 強制檢定設備和校準設備 必須定期對關鍵設備進行檢定或校準，除國家強制檢定設備外，其余設備血站可以依據(jù)國家計量檢定規(guī)程，由經(jīng)培訓具有資質的質控人員自行進行，或委托相關計量機構 /生產(chǎn)廠商進行。 血站自行監(jiān)測設備 成分制備大 容量離心機質量檢查 檢查頻率：每年監(jiān)測 1～ 2 次，由血站自行或委托離心機廠商進行。 離心溫度 質量標準：規(guī)定溫度177。 1℃。 檢測方法：于離心機工作間隙，把經(jīng)計量部門標定的溫差電偶溫度計的探頭放入離心腔內，蓋好離心機蓋。 10 分鐘后觀察離心機溫度表顯示的溫度與溫差電偶溫度計顯示溫度的差值。 離心時間 9 質量標準：規(guī)定時間177。 20s。 檢測方法：使用秒表對離心機的時間控制進行檢查。把時間控制表調至規(guī)定時間，同時啟動秒表，觀察離心機時間控制表從開始計時到計 時停止秒表所用的時間。即為時間控制表按規(guī)定時間計時所用的實際時間。 離心轉速 質量標準：規(guī)定轉速177。 50r/min。 檢測方法：打開離心機前面板，在連接離心轉頭軸上貼一張反光標簽。把轉速控制調到規(guī)定轉速值，然后啟動離心機待轉速穩(wěn)定后，用轉速儀的光束照明反光標簽，觀察轉速儀顯示屏上的轉速值?；虿捎闷渌m宜的方法檢測。 注意事項：為保證檢查人員的安全，檢測時 距 轉速儀的測量距離不得小于20cm。 儲血設備質量檢查 檢查頻率：每月至少一次。 溫度 質量標準： 儲血設備的溫度應在規(guī)定范圍內，各儲血設備的儲存溫度見下表。 儲血設備溫度標準 設備種類 溫度（℃） 儲血冷藏箱（庫） 2～ 6 血小板溫箱（室） 20～ 24 低溫冰箱（庫） 25 以下 速凍冰箱 50 以下 10 超低溫冰箱 65 以下 檢測方法：使用經(jīng)計量部門標定的溫差電偶溫度計（精確度為 ℃）測定儲血設備箱內的溫度。具體布點方式見 YY/T0168－ 2020《血液冷藏箱》。 電源故障報警系統(tǒng) 質量標準：電源發(fā)生故障時，報警系統(tǒng)應立即以聲 /光方式發(fā)出 警報。 檢測方法：切斷儲血設備的電源或開啟報警測試按鈕，模擬電源發(fā)生故障，此時報警系統(tǒng)以聲 /光方式發(fā)出警報?；蚴褂闷渌m宜的方法檢測。 溫度失控報警系統(tǒng) 質量標準：當儲血設備的溫度超出質量標準范圍時，報警系統(tǒng)應以聲 /光方式發(fā)出報警。 檢測方法：將儲血設備的報警范圍分別調至低于和高于儲血設備溫度時， 報警系統(tǒng)應以聲 /光方式發(fā)出報警。 壓力蒸氣滅菌器質量檢查 檢查頻率：每周檢查一次。 檢測方法和質量標準：可采用化學指示劑法或生物指 示劑法進行滅菌效果監(jiān)測，具體檢測方法和質量標準見《消毒技術規(guī)范》 “壓力蒸氣滅菌效果的監(jiān)測方法”。 采血秤質量檢查 檢查頻率 根據(jù)采血秤的使用頻率制定相應檢測頻率，每半年至少一次。 混勻器搖動頻率 質量標準： 30～ 32 次 /分（進口采血秤見生產(chǎn)廠商說明書）。 11 檢查方法：開啟采血秤混勻器后，使用秒表計時，觀察 1 分鐘內混勻器搖動次數(shù)，搖動一個循環(huán)為一次。 稱量準確度 質量標準：標示量177。 2%。 檢查方法：開啟采血秤，將標準砝碼（模擬 常規(guī)血液采集的重量）置于采血秤上，觀察采血秤顯示的數(shù)值。 報警功能 質量標準：采血袋中采血量到規(guī)定量時指示燈應閃光或蜂鳴器應發(fā)音報警。 檢查方法：將標準砝碼或經(jīng)標準砝碼標定的標準量模擬血袋置采血秤上時，采血秤的聲或光提示報警應啟動。 12 附錄 A 獻血者 血紅蛋白 檢測（ 硫酸銅 目測法） 試驗 原理 全血滴入標準硫酸銅溶液中，形成一層銅蛋白膜，包圍在血滴外層。觀察全血在已知相對密度（比重）硫酸銅溶液中沉浮情況，可 判定 其相對密度（比重） ，從而確定其血紅蛋白濃度 。 試劑 用于 男 性獻血者（ Hb≥120g/L）檢測的 硫酸銅溶液比重為 。 用于 女 性獻血者（ Hb≥115g/L）檢測的 硫酸銅溶液比重為 。 不同用途試劑瓶標識應便于區(qū)分 采用商品化 硫酸銅 試劑的，按試劑說明書規(guī)定的條件儲存，在有效期內使用。 硫酸銅 溶液也可自行配制，配制方法見 ，應保存配制記錄。 硫酸銅溶液比重隨溫度變化而變化的，溫度 每上升 2℃ ， 比重 下降。在配制和使用時應注意這一特性。 每瓶（ 50 ml） 硫酸銅溶液 的可用于檢測 25 人次。 標本 要求 新鮮采集的末梢血或靜脈血 ， 抗凝或不抗凝血液均可使用。 陳舊、溶血和嚴重 乳糜的 血 液 不可用 來試驗 。 13 操作步驟和結果判斷 常規(guī)采集手指末梢血或靜脈血。 在 距硫酸銅液面 上方 1cm 處 垂直 將 1 滴血液輕輕滴入， 血 滴應 不含氣泡 。 在 15 秒內 肉眼 觀察 ，判斷結果： 1） 血滴很快下沉于瓶底 ，表明血液比重大于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量 符合獻血 標準； 2） 血滴在硫酸銅溶液中 部 懸浮 10 15 秒后下 沉于瓶底 ，表明血液 比重等于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量 符合獻血 標準； 3） 血滴 懸 浮 在 硫酸銅溶液 上部 ， 15 秒 時 不下沉，表明血液 比重 小 于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量不 符合獻血 標準 。 記錄檢測結果。 硫酸銅 溶液配制方法 貯存液（比重為 ）配制 稱取硫酸銅結晶 (CuSO4?5H2O，分析純 ) 置于大試劑瓶中，在 1000ml 容量瓶中加入蒸鎦水至刻度，測量此蒸鎦水的溫度，根據(jù)表 A1 查出與溫度相應的蒸鎦水毫升數(shù)，不足的容量用滴定管補加入容量瓶中。將容量瓶中蒸鎦水 全部傾入盛硫酸銅結晶的大試劑瓶中，再將容量瓶倒置 2 分鐘，使蒸鎦水全部滴入大試劑瓶中。此時，容量瓶內尚附著蒸鎦水約 ，在計算時此容量已加在表內數(shù)字中。搖動試劑瓶使硫酸銅完全溶解，即得比重為 的貯存液。如欲知所配制的貯存液比重是否準確，可用液體比重天平進行測定。如配得的貯存液比重并非，比重每超過 ，則在 1000ml 溶液中加入蒸鎦水 1ml。例如，所配成的貯存液的比重 ，則在此溶液 1000ml 中加入蒸鎦水 50ml，即可校正其比重為 。反之，如所配溶液的比重 小于 ，則每少 ， 14 應在 1000ml 硫酸銅溶液中加入飽和硫酸銅溶液 1ml。在盛貯存液的試劑瓶上貼好標簽，做好配制記錄。 表 A1 配制比重 硫酸銅溶液需用蒸鎦水的容量 蒸鎦水溫度℃ 蒸鎦水量（ ml） 蒸鎦水溫度℃ 蒸鎦水量（ ml） 10 26 12 28 14 30 16 32 18 34 20 36 22 38 24 40 工作液配制 配制 100 ml 不同比重工作液所需貯存液容量見表 A2。 確定工作液配制總量，量取所需量貯存液，加入容器內，慢慢加入蒸鎦水至工作液總量，邊加邊搖勻，以消除硫酸銅溶液加水后容量縮減的影響。配制時貯存液和蒸鎦水的溫度應相同，但不一定為 25℃， 10～ 40℃之間影響不大。 表 A2 硫酸銅應用標準液配制 比重 貯存液用量（ ml） 比重 貯存液用量（ ml） 比重 貯 存液用量（ ml） 15 工作液配制后應檢測其是否符合質量要求： 1）測定比重是否準確，可用液體比重天平測定，必要時采用相對密度測定法； 2）采用已知低于和高于獻血者血紅蛋白標準的全血進行檢測，應符合預期要求。 將配置完畢的工作液分裝至小試劑瓶，粘貼標簽。 記錄配制過程。 16 附錄 B 血液檢測方法的確認 總則 本附錄討論了血站血液檢測實驗室采用一項新的檢測方法，或更換現(xiàn)有檢測方法時 需要考慮的因素。通常血液檢測方法包括完成檢測必需的儀器、試劑、校準品、實驗程序組合。檢測方法必須由實驗室選擇。必須按照生產(chǎn)商的說明書進行操作，確保檢測結果符合實驗室的要求。 血站對獻血者及其捐獻的血液進行強制性血液篩查，包括輸血相關感染病原學標志物檢測、血型血清學檢測和酶學檢測。方法學包括 ELISA 法、凝集法、速率法或賴氏法等，以及用于獻血者采血前檢查的快速診斷實驗。 由于以上方法學原理的不同，方法確認的原則也不同。依據(jù)當今國際公認的一些法規(guī)和指南，本附錄提供了血站血液檢測實驗室常規(guī)使用的檢測方法確認的原則 和步驟，詣在提高血液檢測實驗室對檢測方法確認的一致性和效率，確保檢測方法變化的過程得到有效控制。幫助用戶滿足文件和法規(guī)的要求。 范圍 為血站血液檢測實驗室檢測方法確認提供方案。實驗室需選擇國家批準的符合國家要求的儀器、試劑盒或檢測方法。在新方法投入常規(guī)使用報告檢測結果之前，需要就檢測方法在實驗室的使用性能進行確認。不建議實驗室對生產(chǎn)商提供的檢測方法進行自行改動，如果確實需要修改，應與生產(chǎn)商合作進行新檢測方法性能的評價測試，以確認修改后的系統(tǒng)在實驗室的適用性和可 17 靠性。 需確認的對象包括： 實驗室首次 引入的檢測方法，如實驗室從未使用過的試劑、儀器等。 實驗室首次將某項目引入現(xiàn)用檢測方法，如 HBsAg 項目由 A 儀器檢測改為由 B 儀器檢測。 若多臺儀器（相同品牌和型號）檢測同一個項目，應對每一臺儀器的性能進行確認比較。 輸血相關感染標志物檢測方法的確認 以下內容適用于酶聯(lián)免疫吸附試驗的確認?？焖僭\斷試驗和確證試驗等定性方法的確認可參照本章節(jié)內容。 確認的一般要求 實驗操作的培訓 開始確認新的檢測方法之前，操作人員應當有充分的時間熟悉新系統(tǒng)，確定關鍵的操作步驟。生產(chǎn)商應提 供試劑或儀器的操作說明，實驗原理，規(guī)格，實驗步驟，局限性，質量控制和健康安全信息。生產(chǎn)商應對操作者進行培訓，確保操作人員正確操作。 試劑的準備 應選擇經(jīng)國家檢定合格的病原學標志物診斷試劑。嚴格遵從生產(chǎn)商的說明書進行操作。對于正在進行確認的試劑，所有組份應來源于同一批試劑，不能由其他試劑所替代或實驗室自己配制。 儀器的準備 應選擇國家批準使用的檢測儀器。實驗開始前，按要求對儀器進行維護校準。 18 對于開放試劑的儀器設備，特別注意試劑說明書要求的操作條件與儀器性能是否相適應。如果儀 器性能與試劑盒說明書的要求有差異，可以征得試劑生產(chǎn)商協(xié)助和同意，對本實驗室儀器的實驗操作參數(shù)進行修正，以達到試劑盒要求的實驗狀態(tài)。 質量控制 應建立有效的質量控制程序。除直接采用生產(chǎn)商提供的質控品外，還應選擇質量、來源穩(wěn)定，無基質效應的質控品作為另外的室內質控物。如可能，多實驗方法比較過程中，應采用相同質控物。一些定性實驗每天只需要使用陰性和陽性質控物，而另一些定性實驗可以產(chǎn)生量化的質控結果。對此可以采用統(tǒng)計過程控制方法（ SPC），用量化數(shù)據(jù)監(jiān)控實驗過程。確認實驗采用的標本不能等同于質控品 使用。實驗過程中，應確保過程處于受控狀態(tài)，否則必須重新實驗。 保持記錄 應記錄和監(jiān)控操作人員在實驗過程中的健康安全，確保符合法律要求。保留檢測全過程的數(shù)據(jù)和結果，包括檢測的速度和使用的適宜性等。 重復性實驗 生產(chǎn)商提供的陰性陽性對照實驗 實驗程序：采用生產(chǎn)商提供的陰性、陽性對照，在不低于 10 天實驗運行的前提下，進行至少 20 次檢測。 可接受標準： 20 次檢測結果不能出現(xiàn)大于 1 次陰性陽性對照不符合生產(chǎn)商要求。否則實驗室必須終止實驗，咨詢試 劑生產(chǎn)商，查找原因，采取糾正措施。 19 方法精密性實驗 實驗程序：在定性實驗中，如果能夠產(chǎn)生量化實驗結果（如 ELISA實驗），應采用接近臨界值的標本，對精密度進行估計。建議采用 S/CO 為 2～4 的標本，不適宜采用低值的陰性標本和高值陽性標本，因為此類標本距決定水平點即臨界值（ cutoff）的分析濃度相距較遠。 可接受標準：批內變異系數(shù)在 15%以內，批間變異系數(shù)在 20%