【導(dǎo)讀】范化管理起到重要的作用。隨著輸血科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和血液管理工作要求的提。其中一些原則性的規(guī)定，血站在制定自身的操作規(guī)程時(shí)應(yīng)當(dāng)根據(jù)實(shí)際情。以“宜”表述的內(nèi)容為推薦性內(nèi)容。本《規(guī)程》的附錄為資料性附錄，供血站參考。程》的要求，結(jié)合具體工作實(shí)際，編制適合本血站使用的技術(shù)操作規(guī)程。將獻(xiàn)血者本人相貌與其有效身份證件原件核對(duì)。證以及外國(guó)公民護(hù)照等。簡(jiǎn)稱BMIS），具體錄入方式有：1）用身份證識(shí)讀器讀取身份信息并存入BMIS；詢問(wèn)獻(xiàn)血者和查詢BMIS有無(wú)既往獻(xiàn)血史。應(yīng)符合要求，不處于被暫時(shí)或永久屏蔽狀態(tài)。體檢人員給予必要的指導(dǎo)和溝通。要時(shí)進(jìn)一步用儀器檢測(cè)。ALT采用金標(biāo)法記錄檢測(cè)結(jié)果和結(jié)論并簽名。行對(duì)照分析和評(píng)價(jià)，做出獻(xiàn)血者是否符合獻(xiàn)血條件的判斷并簽名。將健康檢查結(jié)果和結(jié)論與獻(xiàn)血者溝通。熟悉采血技術(shù)操作規(guī)程，尤其應(yīng)注意關(guān)鍵控制點(diǎn)和近期變更的操作步驟。生規(guī)范》的規(guī)定執(zhí)行。人員按卡片準(zhǔn)備和核查采血器材的種類和數(shù)量。

　　

【正文】 檢查方法：在光線明亮處，以目力檢查。 物料檢驗(yàn)報(bào)告 所選用的真空采血管必須符合國(guó)家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，每一批真空采血管必須有出 廠檢驗(yàn)報(bào)告。 規(guī)格：必須符合使用要求。 有效期：被檢物料必須在有效期內(nèi)。 檢驗(yàn)試劑質(zhì)量檢查 檢驗(yàn)試劑包括：乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑盒、丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒、艾滋病病毒抗體診斷試劑盒、梅毒抗體診斷試劑盒、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒、血型試劑盒、快速篩查試劑盒等。 檢驗(yàn)報(bào)告 8 對(duì)于國(guó)家進(jìn)行批批檢的試劑盒，必須有國(guó)家批批檢報(bào)告。國(guó)家不進(jìn)行批批檢的試劑，以生產(chǎn)廠商出具的出廠檢驗(yàn)報(bào)告為準(zhǔn)。 外觀檢查：每批抽檢 5 盒試劑盒。試劑盒包裝應(yīng)完整，標(biāo)識(shí)清晰，試劑齊全無(wú)滲漏。 運(yùn)輸要求 試劑運(yùn)送途中的溫度必須符合試劑說(shuō)明書要求，供應(yīng)商必須提供試劑運(yùn)輸冷鏈監(jiān)控溫度記錄。 有效期：被檢試劑必須在有效期內(nèi)。 關(guān)鍵設(shè)備質(zhì)量檢查 強(qiáng)制檢定設(shè)備和校準(zhǔn)設(shè)備 必須定期對(duì)關(guān)鍵設(shè)備進(jìn)行檢定或校準(zhǔn)，除國(guó)家強(qiáng)制檢定設(shè)備外，其余設(shè)備血站可以依據(jù)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程，由經(jīng)培訓(xùn)具有資質(zhì)的質(zhì)控人員自行進(jìn)行，或委托相關(guān)計(jì)量機(jī)構(gòu) /生產(chǎn)廠商進(jìn)行。 血站自行監(jiān)測(cè)設(shè)備 成分制備大 容量離心機(jī)質(zhì)量檢查 檢查頻率：每年監(jiān)測(cè) 1～ 2 次，由血站自行或委托離心機(jī)廠商進(jìn)行。 離心溫度 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：規(guī)定溫度177。 1℃。 檢測(cè)方法：于離心機(jī)工作間隙，把經(jīng)計(jì)量部門標(biāo)定的溫差電偶溫度計(jì)的探頭放入離心腔內(nèi)，蓋好離心機(jī)蓋。 10 分鐘后觀察離心機(jī)溫度表顯示的溫度與溫差電偶溫度計(jì)顯示溫度的差值。 離心時(shí)間 9 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：規(guī)定時(shí)間177。 20s。 檢測(cè)方法：使用秒表對(duì)離心機(jī)的時(shí)間控制進(jìn)行檢查。把時(shí)間控制表調(diào)至規(guī)定時(shí)間，同時(shí)啟動(dòng)秒表，觀察離心機(jī)時(shí)間控制表從開始計(jì)時(shí)到計(jì) 時(shí)停止秒表所用的時(shí)間。即為時(shí)間控制表按規(guī)定時(shí)間計(jì)時(shí)所用的實(shí)際時(shí)間。 離心轉(zhuǎn)速 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：規(guī)定轉(zhuǎn)速177。 50r/min。 檢測(cè)方法：打開離心機(jī)前面板，在連接離心轉(zhuǎn)頭軸上貼一張反光標(biāo)簽。把轉(zhuǎn)速控制調(diào)到規(guī)定轉(zhuǎn)速值，然后啟動(dòng)離心機(jī)待轉(zhuǎn)速穩(wěn)定后，用轉(zhuǎn)速儀的光束照明反光標(biāo)簽，觀察轉(zhuǎn)速儀顯示屏上的轉(zhuǎn)速值?；虿捎闷渌m宜的方法檢測(cè)。 注意事項(xiàng)：為保證檢查人員的安全，檢測(cè)時(shí) 距 轉(zhuǎn)速儀的測(cè)量距離不得小于20cm。 儲(chǔ)血設(shè)備質(zhì)量檢查 檢查頻率：每月至少一次。 溫度 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 儲(chǔ)血設(shè)備的溫度應(yīng)在規(guī)定范圍內(nèi)，各儲(chǔ)血設(shè)備的儲(chǔ)存溫度見(jiàn)下表。 儲(chǔ)血設(shè)備溫度標(biāo)準(zhǔn) 設(shè)備種類 溫度（℃） 儲(chǔ)血冷藏箱（庫(kù)） 2～ 6 血小板溫箱（室） 20～ 24 低溫冰箱（庫(kù)） 25 以下 速凍冰箱 50 以下 10 超低溫冰箱 65 以下 檢測(cè)方法：使用經(jīng)計(jì)量部門標(biāo)定的溫差電偶溫度計(jì)（精確度為 ℃）測(cè)定儲(chǔ)血設(shè)備箱內(nèi)的溫度。具體布點(diǎn)方式見(jiàn) YY/T0168－ 2020《血液冷藏箱》。 電源故障報(bào)警系統(tǒng) 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：電源發(fā)生故障時(shí)，報(bào)警系統(tǒng)應(yīng)立即以聲 /光方式發(fā)出 警報(bào)。 檢測(cè)方法：切斷儲(chǔ)血設(shè)備的電源或開啟報(bào)警測(cè)試按鈕，模擬電源發(fā)生故障，此時(shí)報(bào)警系統(tǒng)以聲 /光方式發(fā)出警報(bào)?；蚴褂闷渌m宜的方法檢測(cè)。 溫度失控報(bào)警系統(tǒng) 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)儲(chǔ)血設(shè)備的溫度超出質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)范圍時(shí)，報(bào)警系統(tǒng)應(yīng)以聲 /光方式發(fā)出報(bào)警。 檢測(cè)方法：將儲(chǔ)血設(shè)備的報(bào)警范圍分別調(diào)至低于和高于儲(chǔ)血設(shè)備溫度時(shí)， 報(bào)警系統(tǒng)應(yīng)以聲 /光方式發(fā)出報(bào)警。 壓力蒸氣滅菌器質(zhì)量檢查 檢查頻率：每周檢查一次。 檢測(cè)方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：可采用化學(xué)指示劑法或生物指 示劑法進(jìn)行滅菌效果監(jiān)測(cè)，具體檢測(cè)方法和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)《消毒技術(shù)規(guī)范》 “壓力蒸氣滅菌效果的監(jiān)測(cè)方法”。 采血秤質(zhì)量檢查 檢查頻率 根據(jù)采血秤的使用頻率制定相應(yīng)檢測(cè)頻率，每半年至少一次。 混勻器搖動(dòng)頻率 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 30～ 32 次 /分（進(jìn)口采血秤見(jiàn)生產(chǎn)廠商說(shuō)明書）。 11 檢查方法：開啟采血秤混勻器后，使用秒表計(jì)時(shí)，觀察 1 分鐘內(nèi)混勻器搖動(dòng)次數(shù)，搖動(dòng)一個(gè)循環(huán)為一次。 稱量準(zhǔn)確度 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)示量177。 2%。 檢查方法：開啟采血秤，將標(biāo)準(zhǔn)砝碼（模擬 常規(guī)血液采集的重量）置于采血秤上，觀察采血秤顯示的數(shù)值。 報(bào)警功能 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：采血袋中采血量到規(guī)定量時(shí)指示燈應(yīng)閃光或蜂鳴器應(yīng)發(fā)音報(bào)警。 檢查方法：將標(biāo)準(zhǔn)砝碼或經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)砝碼標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)量模擬血袋置采血秤上時(shí)，采血秤的聲或光提示報(bào)警應(yīng)啟動(dòng)。 12 附錄 A 獻(xiàn)血者 血紅蛋白 檢測(cè)（ 硫酸銅 目測(cè)法） 試驗(yàn) 原理 全血滴入標(biāo)準(zhǔn)硫酸銅溶液中，形成一層銅蛋白膜，包圍在血滴外層。觀察全血在已知相對(duì)密度（比重）硫酸銅溶液中沉浮情況，可 判定 其相對(duì)密度（比重） ，從而確定其血紅蛋白濃度 。 試劑 用于 男 性獻(xiàn)血者（ Hb≥120g/L）檢測(cè)的 硫酸銅溶液比重為 。 用于 女 性獻(xiàn)血者（ Hb≥115g/L）檢測(cè)的 硫酸銅溶液比重為 。 不同用途試劑瓶標(biāo)識(shí)應(yīng)便于區(qū)分 采用商品化 硫酸銅 試劑的，按試劑說(shuō)明書規(guī)定的條件儲(chǔ)存，在有效期內(nèi)使用。 硫酸銅 溶液也可自行配制，配制方法見(jiàn) ，應(yīng)保存配制記錄。 硫酸銅溶液比重隨溫度變化而變化的，溫度 每上升 2℃ ， 比重 下降。在配制和使用時(shí)應(yīng)注意這一特性。 每瓶（ 50 ml） 硫酸銅溶液 的可用于檢測(cè) 25 人次。 標(biāo)本 要求 新鮮采集的末梢血或靜脈血 ， 抗凝或不抗凝血液均可使用。 陳舊、溶血和嚴(yán)重 乳糜的 血 液 不可用 來(lái)試驗(yàn) 。 13 操作步驟和結(jié)果判斷 常規(guī)采集手指末梢血或靜脈血。 在 距硫酸銅液面 上方 1cm 處 垂直 將 1 滴血液輕輕滴入， 血 滴應(yīng) 不含氣泡 。 在 15 秒內(nèi) 肉眼 觀察 ，判斷結(jié)果： 1） 血滴很快下沉于瓶底 ，表明血液比重大于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量 符合獻(xiàn)血 標(biāo)準(zhǔn)； 2） 血滴在硫酸銅溶液中 部 懸浮 10 15 秒后下 沉于瓶底 ，表明血液 比重等于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量 符合獻(xiàn)血 標(biāo)準(zhǔn)； 3） 血滴 懸 浮 在 硫酸銅溶液 上部 ， 15 秒 時(shí) 不下沉，表明血液 比重 小 于硫酸銅溶液比重 ， 血紅蛋白 含量不 符合獻(xiàn)血 標(biāo)準(zhǔn) 。 記錄檢測(cè)結(jié)果。 硫酸銅 溶液配制方法 貯存液（比重為 ）配制 稱取硫酸銅結(jié)晶 (CuSO4?5H2O，分析純 ) 置于大試劑瓶中，在 1000ml 容量瓶中加入蒸鎦水至刻度，測(cè)量此蒸鎦水的溫度，根據(jù)表 A1 查出與溫度相應(yīng)的蒸鎦水毫升數(shù)，不足的容量用滴定管補(bǔ)加入容量瓶中。將容量瓶中蒸鎦水 全部?jī)A入盛硫酸銅結(jié)晶的大試劑瓶中，再將容量瓶倒置 2 分鐘，使蒸鎦水全部滴入大試劑瓶中。此時(shí)，容量瓶?jī)?nèi)尚附著蒸鎦水約 ，在計(jì)算時(shí)此容量已加在表內(nèi)數(shù)字中。搖動(dòng)試劑瓶使硫酸銅完全溶解，即得比重為 的貯存液。如欲知所配制的貯存液比重是否準(zhǔn)確，可用液體比重天平進(jìn)行測(cè)定。如配得的貯存液比重并非，比重每超過(guò) ，則在 1000ml 溶液中加入蒸鎦水 1ml。例如，所配成的貯存液的比重 ，則在此溶液 1000ml 中加入蒸鎦水 50ml，即可校正其比重為 。反之，如所配溶液的比重 小于 ，則每少 ， 14 應(yīng)在 1000ml 硫酸銅溶液中加入飽和硫酸銅溶液 1ml。在盛貯存液的試劑瓶上貼好標(biāo)簽，做好配制記錄。 表 A1 配制比重 硫酸銅溶液需用蒸鎦水的容量 蒸鎦水溫度℃ 蒸鎦水量（ ml） 蒸鎦水溫度℃ 蒸鎦水量（ ml） 10 26 12 28 14 30 16 32 18 34 20 36 22 38 24 40 工作液配制 配制 100 ml 不同比重工作液所需貯存液容量見(jiàn)表 A2。 確定工作液配制總量，量取所需量貯存液，加入容器內(nèi)，慢慢加入蒸鎦水至工作液總量，邊加邊搖勻，以消除硫酸銅溶液加水后容量縮減的影響。配制時(shí)貯存液和蒸鎦水的溫度應(yīng)相同，但不一定為 25℃， 10～ 40℃之間影響不大。 表 A2 硫酸銅應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液配制 比重 貯存液用量（ ml） 比重 貯存液用量（ ml） 比重 貯 存液用量（ ml） 15 工作液配制后應(yīng)檢測(cè)其是否符合質(zhì)量要求： 1）測(cè)定比重是否準(zhǔn)確，可用液體比重天平測(cè)定，必要時(shí)采用相對(duì)密度測(cè)定法； 2）采用已知低于和高于獻(xiàn)血者血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)的全血進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)符合預(yù)期要求。 將配置完畢的工作液分裝至小試劑瓶，粘貼標(biāo)簽。 記錄配制過(guò)程。 16 附錄 B 血液檢測(cè)方法的確認(rèn) 總則 本附錄討論了血站血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室采用一項(xiàng)新的檢測(cè)方法，或更換現(xiàn)有檢測(cè)方法時(shí) 需要考慮的因素。通常血液檢測(cè)方法包括完成檢測(cè)必需的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、實(shí)驗(yàn)程序組合。檢測(cè)方法必須由實(shí)驗(yàn)室選擇。必須按照生產(chǎn)商的說(shuō)明書進(jìn)行操作，確保檢測(cè)結(jié)果符合實(shí)驗(yàn)室的要求。 血站對(duì)獻(xiàn)血者及其捐獻(xiàn)的血液進(jìn)行強(qiáng)制性血液篩查，包括輸血相關(guān)感染病原學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)、血型血清學(xué)檢測(cè)和酶學(xué)檢測(cè)。方法學(xué)包括 ELISA 法、凝集法、速率法或賴氏法等，以及用于獻(xiàn)血者采血前檢查的快速診斷實(shí)驗(yàn)。 由于以上方法學(xué)原理的不同，方法確認(rèn)的原則也不同。依據(jù)當(dāng)今國(guó)際公認(rèn)的一些法規(guī)和指南，本附錄提供了血站血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的檢測(cè)方法確認(rèn)的原則 和步驟，詣在提高血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室對(duì)檢測(cè)方法確認(rèn)的一致性和效率，確保檢測(cè)方法變化的過(guò)程得到有效控制。幫助用戶滿足文件和法規(guī)的要求。 范圍 為血站血液檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法確認(rèn)提供方案。實(shí)驗(yàn)室需選擇國(guó)家批準(zhǔn)的符合國(guó)家要求的儀器、試劑盒或檢測(cè)方法。在新方法投入常規(guī)使用報(bào)告檢測(cè)結(jié)果之前，需要就檢測(cè)方法在實(shí)驗(yàn)室的使用性能進(jìn)行確認(rèn)。不建議實(shí)驗(yàn)室對(duì)生產(chǎn)商提供的檢測(cè)方法進(jìn)行自行改動(dòng)，如果確實(shí)需要修改，應(yīng)與生產(chǎn)商合作進(jìn)行新檢測(cè)方法性能的評(píng)價(jià)測(cè)試，以確認(rèn)修改后的系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)室的適用性和可 17 靠性。 需確認(rèn)的對(duì)象包括： 實(shí)驗(yàn)室首次 引入的檢測(cè)方法，如實(shí)驗(yàn)室從未使用過(guò)的試劑、儀器等。 實(shí)驗(yàn)室首次將某項(xiàng)目引入現(xiàn)用檢測(cè)方法，如 HBsAg 項(xiàng)目由 A 儀器檢測(cè)改為由 B 儀器檢測(cè)。 若多臺(tái)儀器（相同品牌和型號(hào)）檢測(cè)同一個(gè)項(xiàng)目，應(yīng)對(duì)每一臺(tái)儀器的性能進(jìn)行確認(rèn)比較。 輸血相關(guān)感染標(biāo)志物檢測(cè)方法的確認(rèn) 以下內(nèi)容適用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的確認(rèn)。快速診斷試驗(yàn)和確證試驗(yàn)等定性方法的確認(rèn)可參照本章節(jié)內(nèi)容。 確認(rèn)的一般要求 實(shí)驗(yàn)操作的培訓(xùn) 開始確認(rèn)新的檢測(cè)方法之前，操作人員應(yīng)當(dāng)有充分的時(shí)間熟悉新系統(tǒng)，確定關(guān)鍵的操作步驟。生產(chǎn)商應(yīng)提 供試劑或儀器的操作說(shuō)明，實(shí)驗(yàn)原理，規(guī)格，實(shí)驗(yàn)步驟，局限性，質(zhì)量控制和健康安全信息。生產(chǎn)商應(yīng)對(duì)操作者進(jìn)行培訓(xùn)，確保操作人員正確操作。 試劑的準(zhǔn)備 應(yīng)選擇經(jīng)國(guó)家檢定合格的病原學(xué)標(biāo)志物診斷試劑。嚴(yán)格遵從生產(chǎn)商的說(shuō)明書進(jìn)行操作。對(duì)于正在進(jìn)行確認(rèn)的試劑，所有組份應(yīng)來(lái)源于同一批試劑，不能由其他試劑所替代或?qū)嶒?yàn)室自己配制。 儀器的準(zhǔn)備 應(yīng)選擇國(guó)家批準(zhǔn)使用的檢測(cè)儀器。實(shí)驗(yàn)開始前，按要求對(duì)儀器進(jìn)行維護(hù)校準(zhǔn)。 18 對(duì)于開放試劑的儀器設(shè)備，特別注意試劑說(shuō)明書要求的操作條件與儀器性能是否相適應(yīng)。如果儀 器性能與試劑盒說(shuō)明書的要求有差異，可以征得試劑生產(chǎn)商協(xié)助和同意，對(duì)本實(shí)驗(yàn)室儀器的實(shí)驗(yàn)操作參數(shù)進(jìn)行修正，以達(dá)到試劑盒要求的實(shí)驗(yàn)狀態(tài)。 質(zhì)量控制 應(yīng)建立有效的質(zhì)量控制程序。除直接采用生產(chǎn)商提供的質(zhì)控品外，還應(yīng)選擇質(zhì)量、來(lái)源穩(wěn)定，無(wú)基質(zhì)效應(yīng)的質(zhì)控品作為另外的室內(nèi)質(zhì)控物。如可能，多實(shí)驗(yàn)方法比較過(guò)程中，應(yīng)采用相同質(zhì)控物。一些定性實(shí)驗(yàn)每天只需要使用陰性和陽(yáng)性質(zhì)控物，而另一些定性實(shí)驗(yàn)可以產(chǎn)生量化的質(zhì)控結(jié)果。對(duì)此可以采用統(tǒng)計(jì)過(guò)程控制方法（ SPC），用量化數(shù)據(jù)監(jiān)控實(shí)驗(yàn)過(guò)程。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)采用的標(biāo)本不能等同于質(zhì)控品 使用。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)確保過(guò)程處于受控狀態(tài)，否則必須重新實(shí)驗(yàn)。 保持記錄 應(yīng)記錄和監(jiān)控操作人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的健康安全，確保符合法律要求。保留檢測(cè)全過(guò)程的數(shù)據(jù)和結(jié)果，包括檢測(cè)的速度和使用的適宜性等。 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 生產(chǎn)商提供的陰性陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)程序：采用生產(chǎn)商提供的陰性、陽(yáng)性對(duì)照，在不低于 10 天實(shí)驗(yàn)運(yùn)行的前提下，進(jìn)行至少 20 次檢測(cè)。 可接受標(biāo)準(zhǔn)： 20 次檢測(cè)結(jié)果不能出現(xiàn)大于 1 次陰性陽(yáng)性對(duì)照不符合生產(chǎn)商要求。否則實(shí)驗(yàn)室必須終止實(shí)驗(yàn)，咨詢?cè)?劑生產(chǎn)商，查找原因，采取糾正措施。 19 方法精密性實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)程序：在定性實(shí)驗(yàn)中，如果能夠產(chǎn)生量化實(shí)驗(yàn)結(jié)果（如 ELISA實(shí)驗(yàn)），應(yīng)采用接近臨界值的標(biāo)本，對(duì)精密度進(jìn)行估計(jì)。建議采用 S/CO 為 2～4 的標(biāo)本，不適宜采用低值的陰性標(biāo)本和高值陽(yáng)性標(biāo)本，因?yàn)榇祟悩?biāo)本距決定水平點(diǎn)即臨界值（ cutoff）的分析濃度相距較遠(yuǎn)。 可接受標(biāo)準(zhǔn)：批內(nèi)變異系數(shù)在 15%以內(nèi)，批間變異系數(shù)在 20%