不可忽視的細(xì)節(jié)—血液基因組提取-資料下載頁(yè)
2024-10-17 20:52本頁(yè)面
【導(dǎo)讀】嚴(yán)格要求產(chǎn)物純度。存檔、產(chǎn)物長(zhǎng)期保存。但酚氯仿有毒，危害。檸檬酸、EDTA、肝素三種抗凝劑均可使用。但肝素對(duì)酶反應(yīng)有可能起阻害。作用,采血時(shí)如沒(méi)有特殊要求,請(qǐng)使用檸檬酸或EDTA處理血樣。加入抗凝劑混勻后2-8℃保存一周；－20℃保存一個(gè)月；－70℃長(zhǎng)期保存。非抗凝血即血凝塊。碎或勻漿）將血凝塊破碎，然后再根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)取適量樣本。血凝塊前期破碎程度越高，提取基因組就越容易！全血分離得到的白膜層放置-20℃或-70℃長(zhǎng)期保存。盡可能保證樣本不經(jīng)。還是必要的，但用量減半。盡量避免樣本反復(fù)凍融。干血點(diǎn)：干燥后室溫或4℃保存；得到沉淀再進(jìn)行核酸提取。以去除殘留的液體及揮發(fā)乙醇成分。溶解DNA前需要室溫或37℃放。己配制的buffer）溶解DNA。
【正文】 DP319血液基因組提取試劑盒 () 5ml 100200 20ml 300700 禽類、兩棲類全血 520 540 DP318血液基因組提取試劑盒 () 血凝塊 200500ul 18 DP318/ DP319 5001000ul 815 DP318/ DP319 1ml5ml 5150 DP319 口腔拭子 1個(gè) DP322口腔拭子基因組提取試劑盒 DNA檢測(cè)方法－ 電泳檢測(cè) 取 2μl 洗脫液 1% 瓊脂糖凝膠電泳 , 檢測(cè)DNA分子大小，純度以及完整性 TIANamp 血液基因組 DNA提取試劑盒提取相同血樣不同起始體積的 DNA電泳圖 電泳檢測(cè)要控制上樣量。上樣量過(guò)大會(huì)導(dǎo)致泳道過(guò)亮、拖尾等現(xiàn)象，影響正確判斷。 如果加樣孔里有亮帶，說(shuō)明有蛋白污染。 若上樣量合適，泳道有彌散、拖尾現(xiàn)象，說(shuō)明書(shū)基因組 DNA有降解。 TIANamp微量樣本基因組 DNA提取試劑盒樣本來(lái)源一致，分別取 1μl， 10μl， 50μl，100μl為起始樣本提取基因組 。各取2μ l基因組 DNA為模板，擴(kuò)增 GAPDH基因，熒光定量 PCR分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 DNA檢測(cè)方法－ 熒光定量 PCR檢測(cè) 微量樣本基因組 DNA的檢測(cè)通常采用熒光定量 PCR檢測(cè)，例如：干血點(diǎn)、微量血液等。 DNA提取的原則 基因組提取方法 樣本保存和前處理 基因組提取流程 DNA保存及檢測(cè)方法 試劑選擇原則 內(nèi)容 試劑選擇指南 硅膠膜吸附法 微量樣本（ DP316） 口拭子（ DP322） (DP318) 應(yīng)用： 1. HLA分型、親子鑒定及芯片檢測(cè)實(shí)驗(yàn)：對(duì) DNA的純度、濃度均有要求。 2. 口拭子等特殊樣本的提取 適合樣本： 全血、白膜層、血細(xì)胞、血凝塊、白細(xì)胞、口拭子、干血點(diǎn)、羊水、血清 /血漿、漱口水、微量組織等 溶液法 (DP319) 應(yīng)用： 下游實(shí)驗(yàn)所需DNA量較大，例如 SNP 適合樣本： 全血、白膜層、血細(xì)胞、血凝塊、白細(xì)胞等 磁珠法 (DP327) 應(yīng)用： 微量樣本 DNA提取，可配合工作站使用。 適合樣本： 微量血液、干血點(diǎn)、微量組織
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