實(shí)驗(yàn)——基因組抽提-資料下載頁
2025-07-25 05:28本頁面
【正文】 器取 5?L DNA Marker，小心地加到最靠邊上的加樣孔內(nèi)。另取 10?L樣品，和少量的上樣緩沖液混勻后小心地加到同一凝膠板上相鄰的加樣孔中。每加完一個(gè)樣品，換一個(gè)吸頭。 3. 電泳：接通電源， DNA樣品由負(fù)極往正極泳動，應(yīng)使靠近加樣孔的一端為負(fù)。維持恒壓 80 V，電泳 － 1 h，直到溴酚蘭指示劑移動到凝膠底部，停止電泳。 4. 觀察：將凝膠板置于 254 nm波長紫外燈下進(jìn)行觀察。 DNA存在的位置呈現(xiàn)橙黃色熒光。 注意事項(xiàng) ? 半無菌操作。 ? 微量移液器的正確使用。 ? 離心機(jī)的正確使用。 ? 基因組的提取過程中， DNA會發(fā)生機(jī)械斷裂產(chǎn)生大小不同的片段，應(yīng)注意溫和操作，以保證得到較長的DNA。 ? 用電吹風(fēng)吹干 DNA時(shí)要小心，注意不要把 DNA吹出離心管。 ? EB有毒，勿將溶液滴灑在臺面或地面上，切勿用裸露皮膚接觸 EB及含有 EB的溶液和試劑。 思考題 ? 為什么用冷的 70％乙醇清洗 DNA？ ? DNA的分子大小與遷移速率的關(guān)系如何？ ? 瓊脂糖凝膠濃度對 DNA電泳有什么影響？ 下次實(shí)驗(yàn) ?質(zhì)粒 DNA的 提取
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