植物基因組dna的提取-資料下載頁(yè)
2025-01-12 14:34本頁(yè)面
【正文】 醇抽提離心后，拿出離心管時(shí)動(dòng)作要輕緩，吸取上層溶液時(shí)所用的槍頭要減去下面尖端部分，吸取時(shí)不要吸取中間的蛋白質(zhì)層； ? 用 70%的乙醇洗 DNA后，要使乙醇完全揮發(fā)，否則會(huì)對(duì)后續(xù)的 PCR產(chǎn)生影響，甚至對(duì) 限制性酶 作用產(chǎn)生非特異性； 注意事項(xiàng) ? 最后溶于 TE緩沖液中： 在無(wú)離子水溶液中，低濃度的核酸由于磷酸基負(fù)電荷的排斥作用會(huì)引起變性。 星星活性 ? 星星活性（ star activity）： 在極端非標(biāo)準(zhǔn)條件下，限制酶能切割與識(shí)別序列相似的序列，這個(gè)改變的特殊性稱星星活性。 ? 影響星星活性的因素有很多： 甘油濃度高（ 5%），酶過(guò)量（ 100U/μL） ,離子強(qiáng)度低（ 25mM）， pH過(guò)高（ ），或者加入了有機(jī)溶劑 DMSO（二甲基亞砜），乙醇，乙二醇，或者用其他二價(jià)離子如 Mn2+、 Cu2+、 Co2+、 Zn2+代替了 Mg2+。 參考文獻(xiàn) [1] 鐘衛(wèi)鴻 .基因工程技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo) [M].北京： 化學(xué)工業(yè)出版社， 2022， 7. [2] 王鏡巖，朱圣庚，徐長(zhǎng)法 .生物化學(xué)教程 [M].北京：高等教育出版社， 2022， 6. [3] 孫明 .基因工程 [M].北京 :高等教育出版社，2022， 5. [4] 彭學(xué)賢 .植物分子生物技術(shù)應(yīng)用手冊(cè) [M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社， 2022， 2.
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