遺傳病的分析4基因組dna提取與pcr擴(kuò)增技術(shù)-資料下載頁(yè)
2025-07-21 13:46本頁(yè)面
【正文】 25ul ? 引物 1（ 68） ? 引物 2 （ 69） ? 模板 DNA 2ul 混勻后，離心 5000r/min 1min，置 PCR儀 總體積 50ul 操作 PCR擴(kuò)增 的設(shè)定 ： 設(shè)置 PCR擴(kuò)增儀的熱蓋溫度為 100℃ ? 預(yù)變性： 94℃ 5min ? 循環(huán)： 94℃ 變性 30s 56℃ 退火 30s 30個(gè)循環(huán) 72℃ 延伸 30s ? 末次延伸： 72℃ 5min ? 4 ℃ 保存 注意事項(xiàng) ? 由于 PCR技術(shù)非常敏感，可使一個(gè) DNA分子得以擴(kuò)增，裝有 PCR試劑的微量離心管打開之前，應(yīng)先在微量離心機(jī)上作瞬時(shí)離心使液體沉積于管底。 ? 最好在加完所有其它反應(yīng)成分后才加模板DNA，加模板 DNA時(shí)不要形成噴霧。 ? 若用沒有熱蓋的 PCR擴(kuò)增儀，則需在反應(yīng)體系中加入液體石蠟等礦物油封閉體系以防止反應(yīng)過(guò)程中液體的蒸發(fā)。
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