遺傳病的分析4基因組dna提取與pcr擴(kuò)增技術(shù)(參考版)
2025-07-24 13:46本頁(yè)面
【正文】 。 ? 最好在加完所有其它反應(yīng)成分后才加模板DNA，加模板 DNA時(shí)不要形成噴霧。學(xué)習(xí)并掌握 PCR 反應(yīng)的基本原理與實(shí)驗(yàn)技術(shù)。經(jīng)過(guò) 25～ 35個(gè)循環(huán)， DNA擴(kuò)增倍數(shù)可達(dá) 106～109。 ? 溶液反應(yīng)溫度升至中溫（ 72℃ ），在 Taq酶作用下，以四種 dNTP為原料，引物為復(fù)制起點(diǎn)，模板 DNA的一條雙鏈在解鏈和退火之后延伸為兩條雙鏈，這是延伸階段。 實(shí)驗(yàn)原理 ? 加熱使模板 DNA在高溫下（ 94℃ ）變性，雙鏈解鏈，這是所謂變性階段。 二、 PCR擴(kuò)增技術(shù) 實(shí)驗(yàn)原理 ? 多聚酶鏈反應(yīng)（ PCR）技術(shù)的原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程。若 DNA的比值，則加入 SDS至 %； ? 從核酸中去除蛋白質(zhì)時(shí)，常用到酚：氯仿等體積混合液。 注意事項(xiàng) ? 一般情況下，純凈的 DNA OD260/OD280比值約為 ， RNA為 。 器材與試劑 ? 臺(tái)式高速離心機(jī)、天平、水浴恒溫箱、移液槍、塑料離心管等 ? 試劑盒（純化樹脂、 GN結(jié)合液、漂洗液、
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