植物基因組dna的提取和定性、定量分析報告(參考版)
2024-08-12 19:43本頁面
【正文】 學(xué)習(xí)參考。你必須努力，當(dāng)有一天驀然回首時，你的回憶里才會多一些色彩斑斕，少一些蒼白無力。4. 歲月是無情的，假如你丟給它的是一片空白，它還給你的也是一片空白。既糾結(jié)了自己，又打擾了別人。用一些事情，總會看清一些人。2. 若不是心寬似海，哪有人生風(fēng)平浪靜。 實驗二的PCR擴增實驗結(jié)果與分析用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示，有DNA條帶，約600 bp；或者無DNA條帶。檢查PCR儀是否熱蓋。【實驗結(jié)果】 本實驗擴增片段長652 bp。5. 取5 μL PCR產(chǎn)物，加1 μL的6 loading buffer(上樣緩沖液)，輕彈混勻后進行電泳檢測。⑥ 16℃ pause反應(yīng)結(jié)束后短暫離心，置4℃ 保存?zhèn)溆谩? 30 cycles④ 72 ℃ 延伸 1 min。 ② 94 ℃ 變性 30 sec。加樣后用手輕彈混勻，6,000 rpm離心15 sec使反應(yīng)成分集于管底。二、試劑1. 10 緩沖液2. DNA 模板 1 ng/μL（以實驗一 提取的擬南芥基因組DNA為模板）3. dNTP Mix (Takara)4．引物 P3： 5′CGG GTA CCG GTG AAT TAA GAG GAG AGA GGA GG3′P5： 5′ACT CTA GAT GAG TAA AAC AGA GGA GGG TCT CAC3′引物溶液濃度：2 μM 5. rTaq 酶 5 U/μL6. 低熔點瓊脂糖7. 去離子水或TE（）【7】【實驗步驟】 1．在200 μL PCR 管內(nèi)配制20 μL 反應(yīng)體系：反應(yīng)物 體積/μLddH2O 10PCR 緩沖液 dNTP （終濃度20—200 μM） 引物1 （ μM）引物2 （ μM）模板DNA rTag 酶 Total 20 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。PCR擴增的特異性取決于引物與模板DNA的結(jié)合。完成以上三步為一個循環(huán)，每經(jīng)過一個循環(huán)，樣本中的DNA量就增加一倍，新形成的DNA鏈又成為下一輪循環(huán)的模板。PCR的工
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