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植物基因組dna的提取和定性、定量分析報告-資料下載頁

2025-08-01 19:43本頁面
  

【正文】 10PCR 緩沖液 dNTP (終濃度20—200 μM) 引物1 ( μM)引物2 ( μM)模板DNA rTag 酶 Total 20 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。2. 將上述試劑依次加入PCR薄壁管。加樣后用手輕彈混勻,6,000 rpm離心15 sec使反應成分集于管底。3. PCR反應熱循環(huán)程序設置:① 94 ℃ 預變性 3 min。 ② 94 ℃ 變性 30 sec。 ③ 64 ℃ 退火 30 sec。 30 cycles④ 72 ℃ 延伸 1 min。 ⑤ 72 ℃ 延伸 10min。⑥ 16℃ pause反應結(jié)束后短暫離心,置4℃ 保存?zhèn)溆谩?. 配制1%的瓊脂糖凝膠。5. 取5 μL PCR產(chǎn)物,加1 μL的6 loading buffer(上樣緩沖液),輕彈混勻后進行電泳檢測。6. 如果PCR產(chǎn)物非常特異,可以直接用于與載體的重組連接。【實驗結(jié)果】 本實驗擴增片段長652 bp。注意事項:加樣時要精確用移液器。檢查PCR儀是否熱蓋。 每種試劑彈化后要離心;做MIX時,最后加酶,分裝之前要混勻;分裝后需離心混勻。 實驗二的PCR擴增實驗結(jié)果與分析用1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產(chǎn)物,電泳結(jié)果如圖所示,有DNA條帶,約600 bp;或者無DNA條帶。 1. 若不給自己設限,則人生中就沒有限制你發(fā)揮的藩籬。2. 若不是心寬似海,哪有人生風平浪靜。在紛雜的塵世里,為自己留下一片純靜的心靈空間,不管是潮起潮落,也不管是陰晴圓缺,你都可以免去浮躁,義無反顧,勇往直前,輕松自如地走好人生路上的每一步3. 花一些時間,總會看清一些事。用一些事情,總會看清一些人。有時候覺得自己像個神經(jīng)病。既糾結(jié)了自己,又打擾了別人。努力過后,才知道許多事情,堅持堅持,就過來了。4. 歲月是無情的,假如你丟給它的是一片空白,它還給你的也是一片空白。歲月是有情的,假如你奉獻給她的是一些色彩,它奉獻給你的也是一些色彩。你必須努力,當有一天驀然回首時,你的回憶里才會多一些色彩斑斕,少一些蒼白無力。只有你自己才能把歲月描畫成一幅難以忘懷的人生畫卷。學習參考
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