血清蛋白質(zhì)聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳-資料下載頁
2025-01-06 09:06本頁面
【正文】 膠應(yīng)迅速制備分離膠應(yīng)迅速水絕，一 段 封 口制備分離膠應(yīng)迅速，一 段 封 口加入分離膠溶液制備分離膠應(yīng)迅速，一 段 封 口 水為了使表面平整，與空氣隔絕 制備分離膠應(yīng)迅速 取玻璃管 ，一 段 封 口 2. 裝柱 將凝膠管插入電泳槽槽底橡膠塞孔中，加入電極緩沖液與下電泳槽，隨后放入凝膠管及上槽，除氣泡 (上電極槽以電極和凝膠管完全浸入為宜，下電極槽以凝膠管浸入 3/5為宜 ) 3. 加樣 取血清 12μ L ， 7號試劑 12μ L混勻，品均加入 4管，每管 6μ L.（ 加樣槍不可插入過深，以免刺破凝膠，同時要緩慢、均勻，以免攪動緩沖液引起樣品擴(kuò)散。 ） 4. 電泳 接通電源，上負(fù)下正，先調(diào)節(jié)電流 1mA/管，待示蹤染料進(jìn)入分離膠后調(diào)節(jié)為 2~3 mA/管，待示蹤染料離管下口 。 5. 剝膠 注入蒸餾水做潤滑劑，針頭螺旋式前進(jìn)，緩緩剝離。 6. 固定、染色及漂洗 將凝膠柱浸入 8號劑中泡 10min，進(jìn)行固定，用 9號劑染色 10min，用清水沖洗，放入 10號劑中漂洗脫色。 ? 結(jié)果示意圖 γ β α2 α1 注意事項： 1. 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺是神經(jīng)毒性試劑，對皮膚有刺激作用，注意避免直接接觸 2. 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺溶液應(yīng)裝在棕色瓶中，用前檢測 pH值是否失效。 失效液不能聚合。 3. 加速劑（ TEMED）要密封保存，過硫酸溶液現(xiàn)配現(xiàn)用， 防止氧化失效。 4. 配好膠后應(yīng)盡快灌膠（ 不要形成氣泡 ） 5. 切記裝柱后應(yīng)用蒸餾水密封 6. 灌膠和電泳時要注意排氣泡 7. 加樣時不能損傷凝膠表面 8. 電泳時凝膠管不能漏水，并且與電泳池垂直 9. 固體膠切忌倒入水池 The end! 謝謝！
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