血清蛋白質(zhì)聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳-文庫(kù)吧資料
2025-01-12 09:06本頁(yè)面
【正文】 膠與水面的界面重新可辨 切勿觸動(dòng)膠面 參見(jiàn)分離膠 制備分離膠應(yīng)迅速制備分離膠應(yīng)迅速制備分離膠應(yīng)迅速制備分離膠應(yīng)迅速水絕，一 段 封 口制備分離膠應(yīng)迅速，一 段 封 口加入分離膠溶液制備分離膠應(yīng)迅速，一 段 封 口 水為了使表面平整，與空氣隔絕 制備分離膠應(yīng)迅速 取玻璃管 ，一 段 封 口 2. 裝柱 將凝膠管插入電泳槽槽底橡膠塞孔中，加入電極緩沖液與下電泳槽，隨后放入凝膠管及上槽，除氣泡 (上電極槽以電極和凝膠管完全浸入為宜，下電極槽以凝膠管浸入 3/5為宜 ) 3. 加樣 取血清 12μ L ， 7號(hào)試劑 12μ L混勻，品均加入 4管，每管 6μ L.（ 加樣槍不可插入過(guò)深，以免刺破凝膠，同時(shí)要緩慢、均勻，以免攪動(dòng)緩沖液引起樣品擴(kuò)散。 5. 可進(jìn)行雙向電泳。 2. 可多個(gè)樣品的電泳 3. 膠板制作方便，易剝離，樣品用量少，分辨率高。 電荷效應(yīng)： 電荷量不同，遷移率不同。 分子篩效應(yīng)： 分子量或分子大小和形狀不同的蛋白質(zhì)通過(guò)一定孔徑分離膠時(shí)，受阻滯的程度不同而表現(xiàn)出不同的遷移率，這就是分子篩效應(yīng)。電泳開(kāi)始后，氯離子跑得最快，留下一段低電導(dǎo)區(qū)，產(chǎn)生高電位梯度（電位與電導(dǎo)率成反比），使甘氨酸離子追趕氯離子，蛋白質(zhì)夾在中間而被壓縮。緩沖液離子成分、 PH的不連續(xù)性也能造成濃縮效應(yīng)：電極緩沖液通常為 Tris甘氨酸緩沖液，樣品及凝膠（濃縮膠）中緩沖液為 TrisHCL緩沖液。 根據(jù)有無(wú)濃縮效應(yīng)可分為：連續(xù)系統(tǒng)與不連續(xù)系統(tǒng)，其中 不連續(xù)系統(tǒng)因具有濃縮效應(yīng)，分離條帶清晰度及分辨率較佳應(yīng)用更為廣泛，本次試驗(yàn)應(yīng)用的為不連續(xù)系統(tǒng)。血清蛋白在聚丙烯酰胺凝膠電泳一般可分成 12～ 25個(gè)組分。聚合后的聚丙烯酰胺凝膠形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 熟悉聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本過(guò)程。尤其適合核酸的分離
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