sds-聚丙烯酰胺凝膠理論-資料下載頁(yè)
2025-05-13 10:50本頁(yè)面
【正文】 S和巰基乙醇作用下 ， 解離成亞基或單條肽鏈 ， 因此這一類(lèi)蛋白質(zhì) ， 測(cè)定時(shí)只是它們的亞基或單條肽鏈的 MW。 ? 已發(fā)現(xiàn)有些蛋白質(zhì)不能用 SDSPAGE測(cè)定分子量 。 如電荷異?；驑?gòu)象異常的蛋白質(zhì) ， 帶有較大輔基的蛋白質(zhì) （ 某些糖蛋白 ） 以及一些結(jié)構(gòu)蛋白 ， 如膠原蛋白等 。 ? 采用 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)蛋白質(zhì)分子量時(shí) ， 往往采取 2種以上測(cè)定方法結(jié)合使用 。 目前其他常用測(cè)定相對(duì)分子量的方法有： ? 聚丙烯酰胺梯度凝膠電泳法 測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量 （ 有濃縮樣品特點(diǎn) ， 可分次加樣；不需解離亞基 ， 適宜測(cè)定球蛋白 ， 而對(duì)纖維蛋白有誤差 。 電泳需 2021伏特小時(shí) ） ? 凝膠層析法 測(cè)定蛋白質(zhì)相對(duì)分子量 （ 特點(diǎn)方法簡(jiǎn)單 ， 樣品用量少 ， 而且有時(shí)不需純物質(zhì) ， 一般不引起生物活性物質(zhì)的變化 。 局限性是 pH68的范圍內(nèi) ， 線性關(guān)系比較好 ， 但在極端 pH時(shí) ， 蛋白質(zhì)有可能因變性而偏離 。 ） 七 分析計(jì)算 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線： 按下式計(jì)算相對(duì)遷移率： (m R ) 以每個(gè)蛋白標(biāo)準(zhǔn)的分子量 對(duì)數(shù)對(duì)它的相對(duì)遷移率作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線，量出未知蛋白的遷移率即可測(cè)出其分于量，這樣的標(biāo)難曲線只對(duì)同一塊凝膠上的樣品的分子量測(cè)定才具有可靠性。 = 蛋 白 樣 品 距 加 樣 端 遷 移 距 離 （ c m ）溴 酚 藍(lán) 區(qū) 帶 中 心 距 加 樣 端 距 離 （ c m ） 相 對(duì) 遷 移 率
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