【正文】 膠電泳法測蛋白質(zhì)分子量時 ， 只有完全打開二硫鍵 ， 蛋白質(zhì)分子才能被解聚 ， SDS才能定量地結(jié)合到亞基上而給出相對遷移率和分子量對數(shù)的線性關(guān)系 。 ? 不連續(xù)系統(tǒng)中由于緩沖液離子成分 ， pH， 凝膠濃度及電位梯度的不連續(xù)性 ， 帶電顆粒在電場中泳動不僅有電荷效應(yīng) ， 分子篩效應(yīng) ， 還具有濃縮效應(yīng) ， 因而其分離條帶清晰度及分辨率均較前者佳 。 當(dāng)條件一定時 ， b與 K均為常數(shù) ? 若將已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的遷移率對分子量對數(shù)作圖 ， 可獲得一條標(biāo)準(zhǔn)曲線 ， 未知蛋白質(zhì)在相同條件下進(jìn)行電泳 ， 根據(jù)它的電泳遷移率即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求得分子量 。如組蛋白 F 1 ，它本身帶有大量正電荷，盡管結(jié)合了正常量的 SDS ，仍不能完全掩蓋其原有電荷的影響。 電泳需 2021伏特小時 ） ? 凝膠層析法 測定蛋白質(zhì)相對分子量 （ 特點方法簡單 ， 樣品用量少 ， 而且有時不需純物質(zhì) ， 一般不引起生物活性物質(zhì)的變化 。 三 . 注意事項 用 SDSPAGE測蛋白質(zhì) Mr時應(yīng)注意以下問題： 1 ). 如果蛋白質(zhì) SDS 復(fù)合物不能達(dá)到 SDS ／ lg 蛋白質(zhì)的比率并具有相同的構(gòu)象，就不能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。 SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳 （ PAGE） 測定蛋白質(zhì)分子量 一 . 實驗?zāi)康? ? 學(xué)習(xí) SDSPAGE測定蛋白質(zhì)分子量的原理 。 3） 溶液的離子強度： 溶液的離子強度應(yīng)較低，最高不能超過 ， 因為