[醫(yī)藥衛(wèi)生]新藥臨床前毒理安全性評價規(guī)范化管理講座-資料下載頁
2025-01-04 11:52本頁面
【正文】 后的哺乳動物肝臟微粒體（ S9）進行體外代謝活化試驗，即在加S9混合物和不加 S9混合物平行的條件下測試。 對照組：用溶媒作陰性對照，用已知突變原作陽性對照。 結(jié)果判定：受試物的回復(fù)突變菌榮譽稱號數(shù)的增加與劑量相關(guān)并有統(tǒng)計學(xué)意義，或至少某一測試點呈現(xiàn)可重復(fù)的并有統(tǒng)計意義的陽性反應(yīng)時記為陽性。 （ 2）哺乳動物培養(yǎng)細胞染色體畸變試驗 細胞：哺乳動物原代或傳代培養(yǎng)細胞。 劑量：至少應(yīng)用三種不同劑量，高劑量以 50%細胞生長抑制濃度為基準(zhǔn)，否則應(yīng)說明選定劑量的理由。 標(biāo)本制作時間：藥物與細胞接觸后應(yīng)有適當(dāng)時間，最好包括整個細胞周期，通常在藥物處理后 24和 48小時制作染色體標(biāo)本。 代謝活化：應(yīng)用適當(dāng)?shù)拇x活化法。 對照組：用深媒作陰性對照，已知突變原作陽性對照。 鏡檢：每種濃度至少觀察 100個中期分裂相細胞的染色體結(jié)構(gòu)的異常及多倍體的出現(xiàn)率。 結(jié)果判定：受試誘發(fā)的染色體畸變出現(xiàn)率較陰性對照有統(tǒng)計學(xué)意義的增加，并有劑量反應(yīng)關(guān)系時記為陽性，同時標(biāo)明異常細胞出現(xiàn)的頻率和種類。 （ 3）體內(nèi)試驗：一般選用微核試驗，但作用于生殖系統(tǒng)的藥物進行顯性致死試驗等。 1）嚙齒類動物微核試驗 動物：一般用小鼠，每組 10只性成熟動物（雌雄各半）或 6至少只性成熟雄性動物。 給藥劑量及途徑：至少采用三種劑量，最高劑量以 1/2LD50為基準(zhǔn)，腹腔和 /或口服一次給藥，必要時可連續(xù)給藥。否則應(yīng)說明選定劑量的理由。 對照組：用溶媒作陰性對照，已知能誘發(fā)微核陽性的物質(zhì)作陽性對照。 標(biāo)本制作：給藥后 18－ 30小時或 12－ 72小時處死動物，取骨髓，離心，涂片， Giemsa染色或吖啶橙染色。 鏡檢：每只動物至少觀察計數(shù) 1000個多染紅細胞，觀察其微核出現(xiàn)的頻度及多染紅細胞和正染紅細胞的比率。 結(jié)果判定：微核細胞出現(xiàn)的頻度與對照組相比有統(tǒng)計學(xué)意義的增加，并有劑量反應(yīng)關(guān)系時，或同一劑量有重復(fù)性并有統(tǒng)計學(xué)意義時記為陽性。 2）嚙齒類動物顯性致死試驗 動物：性成熟的嚙齒類動物，一般采用小鼠。每組至少 15只雄鼠。 給藥劑量及途徑：至少采用三種劑量，但在初期評價中單劑量或二種劑量即可。高劑量以 30連續(xù)給藥使 100%動物生存的最大耐受量為斟準(zhǔn)。口服或腹腔注射可采用一次給藥，每天給藥一次，連續(xù)給藥五天或連續(xù)給藥六周的方法之一。 交配方法：給藥的雄性動物以適當(dāng)?shù)臅r間間隔集資與未給藥的雌性動物交配，交配時間取決于給藥方式，一般一次或連續(xù)給藥 5天的動物，以最后約藥后 6周內(nèi)為交配時間；連續(xù)給藥 6周的動物以最后給藥后 1周內(nèi)為交配時間。 對照組：用溶媒作陰性對照，已知能誘發(fā)顯性致死陽性物質(zhì)作陽性對照。但在同一實驗室，對同一品系的動物，可不設(shè)陽性對照。 觀察指標(biāo)：交配的雌性動物在妊娠后期剖腹，觀察子宮內(nèi)胚胎著床數(shù)，生存胎仔數(shù)，死亡胎仔數(shù)及未著床數(shù)。顯性致死率以 DL表示 ： 試驗組妊娠鼠的平均生存胎仔 DL（ %）＝（ 1－ ） 100 陰性對照組妊娠鼠的平均生存胎仔 結(jié)果判定：死亡胎仔數(shù)的增加，胚胎著床總數(shù)的減少，或未著床胚胎數(shù)的增加，生存胎仔減少，這些結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)意義并有劑量反應(yīng)關(guān)系時記為陽性顯性致死效應(yīng)。 （ 1）一般生殖毒性試驗 （ 2）致畸胎試驗 （ 3）圍產(chǎn)期毒性試驗 （ 1）致癌試驗的預(yù)備試驗 （ 2）致癌試驗 （ 3）評價
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