【正文】 中性氨基酸，如 Leu、 Ile ③ C端加工區(qū)由一些極性相對較大、側(cè)鏈較短的氨基酸（如 Gly、 Ala、 Ser）組成，緊接著是被信號肽酶 (signal peptidase)裂解的位點(diǎn) ? 信號肽 (signal peptide) 某些真核細(xì)胞分泌型蛋白質(zhì)的信號序列 ? 靶向輸送到細(xì)胞核的蛋白質(zhì)其多肽鏈內(nèi)含有的特異信號序列 ? 為含 4～ 8個氨基酸殘基的短序列，富含帶正電荷的 Lys、 Arg和 Pho，可位于肽鏈的不同部位 ? 不同的 NLS間未發(fā)現(xiàn)共有序列。在蛋白質(zhì)進(jìn)核定位后， NLS不被切除 ? 核定位序列 (nuclear localization sequence, NLS) 真核細(xì)胞分泌型蛋白質(zhì)的靶向輸送過程： 核糖體上合成的肽鏈先由信號肽引導(dǎo)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔并被折疊成為具有一定功能構(gòu)象的蛋白質(zhì)，在高爾基復(fù)合體中被包裝進(jìn)分泌小泡，轉(zhuǎn)移至細(xì)胞膜，再分泌到細(xì)胞外。 （二）分泌型蛋白質(zhì)由分泌小泡靶向輸送至胞外 ? 信號肽引導(dǎo)真核細(xì)胞分泌型蛋白進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （三）蛋白質(zhì) 6磷酸甘露糖基化是靶向輸送至溶酶體的信號 ? 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的駐留蛋白質(zhì)先經(jīng)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的附著核糖體合成并進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔，然后隨囊泡輸送到高爾基復(fù)合體。 ? 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)多肽鏈的 C端含有滯留信號序列 ，可與相應(yīng)受體結(jié)合。在高爾基復(fù)合體上，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)通過其滯留信號序列與受體結(jié)合后，隨囊泡輸送回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。 （四）靶向輸送至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì) C端含有滯留信號序列 （五）質(zhì)膜蛋白質(zhì)的靶向輸送由囊泡轉(zhuǎn)移到細(xì)胞膜 ? 質(zhì)膜蛋白質(zhì)合成時在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的跨膜機(jī)制與分泌型蛋白質(zhì)的跨膜機(jī)制相似，但是，質(zhì)膜蛋白質(zhì)的肽鏈并不完全進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔，而是錨定在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。 ? 不同類型的跨膜蛋白質(zhì)以不同的形式錨定于膜上。 通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜出芽形成囊泡，轉(zhuǎn)移至高爾基體加工，囊泡最終與細(xì)胞膜融合。 （六）線粒體蛋白質(zhì)以其前體形式在胞液合成后靶向輸入線粒體 （七）細(xì)胞核蛋白質(zhì)在胞液中合成后經(jīng)核孔靶向輸送入核 第五節(jié) 蛋白質(zhì)生物合成的干擾和抑制 Interference and Inhibition of Protein Biosynthesis ? 蛋白質(zhì)生物合成是很多天然抗生素和某些毒素的作用靶點(diǎn)?？股氐染褪峭ㄟ^阻斷真核、原核生物蛋白質(zhì)翻譯體系某組分功能，干擾、抑制蛋白質(zhì)生物合成過程而起作用的。 ? 可針對蛋白質(zhì)生物合成必需的關(guān)鍵組分作為研究新抗菌藥物的作用靶點(diǎn)。利用真核、原核生物蛋白質(zhì)合成體系的差異，設(shè)計、篩選僅對病原微生物特效而不損害人體的藥物。 一、許多抗生素通過抑制蛋白質(zhì)生物合成發(fā)揮作用 抗生素 (antibiotics)是一類由某些真菌、細(xì)菌等微生物產(chǎn)生的藥物，有抑制其他微生物生長或殺死其他微生物的能力，對宿主無毒性的抗生素可用于預(yù)防和治療人、動物、植物的感染性疾病。 ? 影響翻譯起始的抗生素 干擾進(jìn)位 引起讀碼錯誤 影響肽鍵形成 影響轉(zhuǎn)位 ? 影響翻譯延長的抗生素： 抗生素 作用位點(diǎn) 作用原理 應(yīng)用 伊短菌素 原核、真核核糖體小亞基 阻礙翻譯起始復(fù)合物的形成 抗腫瘤藥 四環(huán)素、土霉素 原核核糖體小亞基 抑制氨基酰 tRNA與小亞基結(jié)合 抗菌藥 鏈霉素、新霉素、巴龍霉素 原核核糖體小亞基 改變構(gòu)象引起讀碼錯誤、抑制起始 抗菌藥 氯霉素、林可霉素、紅霉素 原核核糖體大亞基 抑制轉(zhuǎn)肽酶、阻斷肽鏈延長 抗菌藥 嘌呤霉素 原核、真核核糖體 使肽?；D(zhuǎn)移到它的氨基上后脫落 抗腫瘤藥 放線菌酮 真核核糖體大亞基 抑制轉(zhuǎn)肽酶、阻斷肽鏈延長 醫(yī)學(xué)研究 夫西地酸、細(xì)球菌素 EFG 抑制 EFG、阻止轉(zhuǎn)位 抗菌藥 壯觀霉素 原核核糖體小亞基 阻止轉(zhuǎn)位 抗菌藥 常用抗生素抑制蛋白質(zhì)生物合成的原理與應(yīng)用 嘌呤霉素作用示意圖 肽酰轉(zhuǎn)移酶 二、其他干擾蛋白質(zhì)生物合成的物質(zhì) 某些毒素能在肽鏈延長階段阻斷蛋白質(zhì)合成而呈現(xiàn)毒性 。 白喉毒素是真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的抑制劑 ， 它作為一種修飾酶 ， 可使 eEF2發(fā)生ADP糖基化共價修飾 ， 生成 eEF2腺苷二磷酸核糖衍生物 ， 使 eEF2失活 。 （一）毒素 (toxin) 1. 白喉毒素 (diphtheria toxin) ? 白喉毒素的作用機(jī)理 OO H O HC H2OA D P NCN H2O白 喉 毒 素OO H O HC H 2OA D P延 長 因 子 2( 無 活 性 )延 長 因 子 2( 有 活 性 )+NCN H 2O+尼克酰胺 2. 蓖麻蛋白 (ricin) ? 蓖麻籽中所含的植物糖蛋白 ， 由 A、 B兩條多肽鏈組成 ? A鏈?zhǔn)且环N蛋白酶 ， 可作用于真核生物核糖體大亞基的 28S rRNA， 催化其中特異腺苷酸發(fā)生脫嘌呤基反應(yīng) ， 使 28S rRNA降解 ， 使核糖體大亞基失活 ? B鏈對 A鏈發(fā)揮毒性具有重要的促進(jìn)作用 ， 且 B鏈上的半乳糖結(jié)合位點(diǎn)也是毒素發(fā)揮毒性作用的活性部位 （二）干擾素 (interferon, IFN) ? 真核細(xì)胞被病毒感染后分泌的一類具有抗病毒作用的蛋白質(zhì) ， 可抑制病毒的繁殖 ? 分為 ?（ 白細(xì)胞 ） 型 、 ?（ 成纖維細(xì)胞 ）型和 ?（ 淋巴細(xì)胞 ） 型三大類 ， 每類各有亞型 ， 分別具有特異作用 干擾素抑制病毒的作用機(jī)制有兩方面： ? 干擾素在某些病毒雙鏈 RNA存在時，能誘導(dǎo)特異的蛋白激酶活化，該活化的蛋白激酶使 eIF2磷酸化而失活，從而抑制病毒蛋白質(zhì)合成 ? 干擾素能與雙鏈 RNA共同活化特殊的 2?5?寡聚腺苷酸 (2?5? A)合成酶，催化 ATP聚合，生成單核苷酸間以 2?5?磷酸二酯鍵連接的 2?5? A，經(jīng) 2?5? A活化核酸內(nèi)切酶 RNase L，后者可降解病毒 mRNA，從而阻斷病毒蛋白質(zhì)合成 干 擾 素d s R N A誘 導(dǎo)蛋 白 激 酶e I F 2 e I F 2 PA T P A D P( 有 活 性 ) ( 無 活 性 )eIF2 eIF2P 干 擾 素dsR N A誘 導(dǎo)2 39。 , 5 39。 A 合 成 酶ApppATPAp p p p p2 39。5 39。 5 39。2 39。5 39。A A239。,539。AR N a se L R N a se L(無 活 性 ) (有 活 性 )降 解m R N A