【正文】 AR N a se L R N a se L(無(wú) 活 性 ) (有 活 性 )降 解m R N A。A A239。2 39。5 39。 , 5 39。 白喉毒素是真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的抑制劑 ， 它作為一種修飾酶 ， 可使 eEF2發(fā)生ADP糖基化共價(jià)修飾 ， 生成 eEF2腺苷二磷酸核糖衍生物 ， 使 eEF2失活 。 一、許多抗生素通過(guò)抑制蛋白質(zhì)生物合成發(fā)揮作用 抗生素 (antibiotics)是一類由某些真菌、細(xì)菌等微生物產(chǎn)生的藥物，有抑制其他微生物生長(zhǎng)或殺死其他微生物的能力，對(duì)宿主無(wú)毒性的抗生素可用于預(yù)防和治療人、動(dòng)物、植物的感染性疾病。 ? 可針對(duì)蛋白質(zhì)生物合成必需的關(guān)鍵組分作為研究新抗菌藥物的作用靶點(diǎn)。 （六）線粒體蛋白質(zhì)以其前體形式在胞液合成后靶向輸入線粒體 （七）細(xì)胞核蛋白質(zhì)在胞液中合成后經(jīng)核孔靶向輸送入核 第五節(jié) 蛋白質(zhì)生物合成的干擾和抑制 Interference and Inhibition of Protein Biosynthesis ? 蛋白質(zhì)生物合成是很多天然抗生素和某些毒素的作用靶點(diǎn)。 ? 不同類型的跨膜蛋白質(zhì)以不同的形式錨定于膜上。在高爾基復(fù)合體上，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)通過(guò)其滯留信號(hào)序列與受體結(jié)合后，隨囊泡輸送回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。 （二）分泌型蛋白質(zhì)由分泌小泡靶向輸送至胞外 ? 信號(hào)肽引導(dǎo)真核細(xì)胞分泌型蛋白進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng) （三）蛋白質(zhì) 6磷酸甘露糖基化是靶向輸送至溶酶體的信號(hào) ? 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中的駐留蛋白質(zhì)先經(jīng)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的附著核糖體合成并進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔，然后隨囊泡輸送到高爾基復(fù)合體。 （一）靶向輸送的蛋白質(zhì)存在信號(hào)序列 ① N端有帶正電荷的堿性氨基酸殘基，如 Lys、Arg ② 中段為疏水核心區(qū)，主要含疏水的中性氨基酸，如 Leu、 Ile ③ C端加工區(qū)由一些極性相對(duì)較大、側(cè)鏈較短的氨基酸（如 Gly、 Ala、 Ser）組成，緊接著是被信號(hào)肽酶 (signal peptidase)裂解的位點(diǎn) ? 信號(hào)肽 (signal peptide) 某些真核細(xì)胞分泌型蛋白質(zhì)的信號(hào)序列 ? 靶向輸送到細(xì)胞核的蛋白質(zhì)其多肽鏈內(nèi)含有的特異信號(hào)序列 ? 為含 4～ 8個(gè)氨基酸殘基的短序列，富含帶正電荷的 Lys、 Arg和 Pho，可位于肽鏈的不同部位 ? 不同的 NLS間未發(fā)現(xiàn)共有序列。 新生蛋白質(zhì)的去向： ① 保留在胞液 ② 進(jìn)入細(xì)胞器 ③ 分泌到細(xì)胞外 ? 所有靶向輸送的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中存在分選信號(hào)，主要是 N端特異氨基酸序列 ，可引導(dǎo)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞的適當(dāng)靶部位，這類序列稱為信號(hào)序列 (signal sequence)。 （一）通過(guò)非共價(jià)鍵亞基聚合形成具有四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì) （二）輔基連接后形成完整的結(jié)合蛋白質(zhì) 四、合成后蛋白質(zhì)可被靶向輸送至細(xì)胞特定部位 蛋白質(zhì)在核糖體合成后 ， 必須分選出來(lái) ， 定向輸送到一個(gè)合適的部位才能行使各自的生物學(xué)功能 。 二、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)修飾主要是肽鍵水解和化學(xué)修飾 （一）肽鏈末端的修飾 ? 脫甲酰基酶 ? 氨基肽酶 ? N端修飾 ? C端修飾 1. 糖基化 2. 羥基化 3. 甲基化 4. 磷酸化 5. 二硫鍵形成 6. 親脂性修飾 （二）各種氨基酸殘基的共價(jià)修飾 例：鴉片促黑皮質(zhì)素原 (POMC)的水解修飾 （三）多肽鏈的水解修飾 三、蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)修飾 結(jié)合蛋白質(zhì)合成后都需要結(jié)合相應(yīng)輔基，才能成為具有功能活性的天然蛋白質(zhì)。 ? 肽酰 脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶可促進(jìn)上述順?lè)磧煞N異構(gòu)體之間的轉(zhuǎn)換。 ? Gro ELGro ES復(fù)合物 ? Gro ELGro ES反應(yīng)循環(huán) 2. 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 ? 二硫鍵異構(gòu)酶在 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔 活性很高，可在較大區(qū)段肽鏈中催化錯(cuò)配二硫鍵斷裂并形成正確二硫鍵連接，最終使蛋白質(zhì)形成熱力學(xué)最穩(wěn)定的天然構(gòu)象。 Dna J結(jié)合未折疊或部分折疊的多肽鏈 Dna KATP復(fù)合物 Dna JDna KADP多肽復(fù)合物 ATP水解 Grp E ATP ADP 復(fù)合物解離，釋出完全折疊或部分折疊的多肽鏈 大腸桿菌中的 Hsp70 反應(yīng)循環(huán) （ 2）伴侶蛋白 (chaperonin) ? 分子伴侶的另一家族，如大腸桿菌的Gro EL和 Gro ES（真核細(xì)胞中同源物為Hsp60和 Hsp10）等 ? 其主要作用是 為非自發(fā)性折疊蛋白質(zhì)提供能折疊形成天然空間構(gòu)象的微環(huán)境 當(dāng)待折疊肽鏈進(jìn)入 Gro EL的桶狀空腔后， Gro ES可作為 “ 蓋子 ” 瞬時(shí)封閉 Gro EL空腔出口。 ? 熱休克蛋白促進(jìn)蛋白質(zhì)折疊的基本作用： 結(jié)合保護(hù)待折疊多肽鏈，再釋放該多肽鏈進(jìn)行正確折疊。熱休克蛋白可促進(jìn)需要折疊的多肽鏈折疊為有天然空間構(gòu)象的蛋白質(zhì)。 ? 幾種有促進(jìn)蛋白質(zhì)折疊功能的大分子： 1. 分子伴侶 (molecular chaperon) 2. 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽 脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶 (peptide prolylcistrans isomerase, PPI) 1. 分子伴侶 : 分子伴侶是細(xì)胞內(nèi)一類可識(shí)別肽鏈的非天然構(gòu)象、促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)正確折疊的保守蛋白質(zhì)。 ? 多肽鏈自身氨基酸順序儲(chǔ)存著蛋白質(zhì)折疊的信息，即一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的基礎(chǔ)。 一、多肽鏈折疊為天然構(gòu)象的蛋白質(zhì) ? 新生肽鏈的折疊在肽鏈合成中、后完成，新生肽鏈 N端在核糖體上一出現(xiàn)，肽鏈的折疊即開(kāi)始。 翻譯后修飾使得蛋白質(zhì)組成更加多樣化 ， 從而使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)上呈現(xiàn)更大的復(fù)雜性 。 多聚核糖體 電鏡下的多聚核糖體 第四節(jié) 蛋白質(zhì)翻譯后修飾和靶向輸送 Posttranslational Modification and Targeting Transfer of Protein ? 新生多肽鏈不具備蛋白質(zhì)的生物學(xué)活性 ， 必須經(jīng)過(guò)復(fù)雜的加工過(guò)程才能轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂刑烊粯?gòu)象的功能蛋白質(zhì) ， 這一加工過(guò)程稱為 翻譯后修飾(posttranslational modification)。這種mRNA與多個(gè)核糖體形成的聚合物稱為多聚核糖體 (polysome) 。 （二）延長(zhǎng) （三）終止 真核生物翻譯終止過(guò)程與原核生物相似，但只有 1個(gè)釋放因子 eRF，可識(shí)別所有終止密碼子，完成原核生物各類 RF的功能。 Kozak共有序列 (kozak consensus sequence)