【正文】 真核生物肽鏈合成的延長過程與原核生物基本相似 ， 但有不同的反應體系和延長因子 。 ? RF3可結合核糖體其他部位，有 GTP酶活性，能介導 RF RF2與核糖體的相互作用 釋放因子的功能： ? 識別終止密碼子 RF1特異識別 UAA、 UAG RF2特異識別 UAA、 UGA ? 誘導轉肽酶轉變?yōu)轷ッ富钚? 催化新生肽鏈與結合在 P位的 tRNA之間的酯鍵水解，使肽鏈從核糖體上釋放 原核生物肽鏈合成終止 二、真核生物的肽鏈合成過程 （一）起始 1. 核糖體大小亞基分離 2. 起始氨基酰 tRNA同 40S小亞基結合 3. mRNA在小亞基定位結合 4. 核糖體大亞基結合 參與真核生物翻譯的蛋白質因子 種類 生物學功能 起始因子 eIF1 多功能因子，參與翻譯的多個步驟 eIF2 促進 MettRNAiMet與小亞基結合 eIF2B 結合小亞基，促進大、小亞基分離 eIF3 結合小亞基，促進大、小亞基分離；介導 eIF4F復合物 mRNA與核糖體小亞基結合 eIF4A eIF4F復合物成分，有 RNA解螺旋酶活性，解除 mRNA 5?端的發(fā)夾結構，使其與小亞基結合 eIF4B 結合 mRNA，促進 mRNA掃描定位起始 AUG eIF4E eIF4F復合物成分，結合 mRNA 5?帽子 eIF4G eIF4F復合物成分，結合 eIF4E、 eIF3和 PAB eIF5 促進各種起始因子從小亞基解離，進而結合大亞基 eIF6 促進核糖體分離成大、小亞基 延長因子 eEF1? 促進氨基酰 tRNA進入 A位，結合分解 GTP，相當于 EFTu eEF1?? 調節(jié)亞基，相當于 EFTs eEF2 有轉位酶活性，促進 mRNA肽酰 tRNA由 A位移至 P位，促進tRNA卸載與釋放，相當于 EFG 釋放因子 eRF 識別所有終止密碼子，具有原核生物各類 RF的功能 真核生物翻譯起始特點： ? 80S核糖體 ? 起始因子種類多 ? 起始 tRNA的 Met不需甲?；? ? mRNA的 5?帽子和 3?poly A尾結構與mRNA在核糖體就位有關 ? MettRNAiMet先與核糖體小亞基結合，然后再結合 mRNA Met 40S Met Met 40S 60S mRNA eIF2B、 eIF eIF6 ① eIF3 ② GDP+Pi 各種 eIF釋放 eIF5 ④ ATP ADP+Pi eIF4E, eIF4G, eIF4A, eIF4B, PAB ③ 真核生物翻譯起始復合物形成過程 MettRNAiMeteIF2GTP Met 60S fMet Tu GTP 成肽 → 轉位 → 下一輪進位 進位 轉位 成肽 ? 肽鏈合成延長（核糖體循環(huán)）過程 （三）終止 核糖體 A位出現 mRNA的 終止密碼子后，多肽鏈合成停止，肽鏈從肽酰 tRNA中釋出， mRNA、核糖體大、小亞基等分離。 E fMet A U G 539。 需要延長因子 EFG參與。 339。 339。 339。 339。 339。 密碼的通用性進一步證明各種生物進化自同一祖先。 各種氨基酸的密碼子數目 ? 密碼子簡并性的生物學意義：減少有害突變 ? 遺傳密碼的特異性主要取決于前兩位堿基 Ala GCU GCC GCA GCG Thr ACU ACC ACA ACG 4. 通用性 (universal) 從簡單的病毒到高等的人類，幾乎使用同一套遺傳密碼。 除 色氨酸 和 甲硫氨酸 僅有 1個密碼子外 ，其余氨基酸有 4或多至 6個三聯體密碼子為其編碼 。 3. 簡并性 (degenerate) 一種氨基酸可具有 2個或 2個以上的密碼子為其編碼 。蛋白質的生物合成（翻譯） Protein Biosynthesis (Translation) ? 蛋白質生物合成 (protein biosynthesis)也稱 翻譯 (translation)，是生物細胞以mRNA為模板，按照 mRNA分子中核苷酸的排列順序所組成的密碼信息合成蛋白質的過程 （ 1）氨基酸的活化 （ 2）肽鏈的生物合成 （ 3）肽鏈形成后的加工和靶向輸送 反應過程 第一節(jié) 蛋白質生物合成體系 Protein Biosynthesis System 1. 基本原料： 20種編碼氨基酸 2. 模板： mRNA 3. 適配器： tRNA 4. 裝配機：核糖體 5. 主要酶和蛋白質因子：氨基酰 tRNA合成酶、轉肽酶、起始因子、延長因子、釋放因子等 6. 能源物質： ATP、 GTP 7. 無機離子： Mg2+、 K+ ? 蛋白質生物合成體系 一、 mRNA是蛋白質生物合成的直接模板 ? mRNA的基本結構 Start of geic message Cap End Tail 5?端非翻譯區(qū) 5? 3? 3?端非翻譯區(qū) 開放閱讀框 從 mRNA 5?端起始密碼子 AUG到 3?端終止密碼子之間的核苷酸序列 ， 稱為 開放閱讀框 (open reading frame, ORF) ? 遺傳學將編碼一個多肽的遺傳單位稱為 順反子 (cistron) ? 原核細胞中，數個結構基因常串聯為一個轉錄單位，轉錄生成的 mRNA可編碼幾種功能相關的蛋白質，為 多順反子(polycistron) ? 真核生物一個 mRNA只編碼一條多肽鏈，為 單順反子 (single cistron) mRNA結構簡圖 非翻譯區(qū) m7 編碼單條 多肽鏈 遺傳密碼 在 mRNA的開放閱讀框架區(qū)，以每 3個相鄰的核苷酸為一組，代表 一種氨基酸 或 其他信息 ，這種三聯體形式的核苷酸序列稱為密碼子 起始密碼子 (initiation codon)： AUG 終止密碼子 (termination codon) ： UAA、 UAG、 UGA ? 密碼子 (codon)： ? 起始密碼子和終止密碼子： 遺傳密碼表 1968年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎 解讀了遺傳密碼及其在蛋白質合成方面的機能 Marshall Nirenberg 美國生化遺傳學家 國立衛(wèi)生研究院 1927~2022 Har Gobind Khorana 美國生物化學家 威斯康星大學 1922~ Robert W. Holley 美國分子生物學家 康奈爾大學