sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質分子量-資料下載頁
2025-05-10 13:15本頁面
【正文】 采用不連續(xù) SDSPAGE電泳法對所分離純化的蛋白質進行純度鑒定，發(fā)現(xiàn)圖中電泳圖譜可以清晰的看到 兩條蛋白帶 。 兩條蛋白帶代表 綿羊免疫球蛋白 G的重鏈和輕鏈。 計算分析結果表明： 綿羊血清 lgG重鏈和輕鏈的分子量分別為 50000和 28000Kd。一般說來，當?shù)鞍踪|的分子量在 202100至 15000 kD 之間時，電泳遷移率與分子量的對數(shù)呈線性關系 。 實驗結果各譜帶所代表的成分的分子量的范圍均在此之間。 用 SDSPAGE垂直板電泳測得綿羊血清具有一定的可信度 。 七、思考題 ? 在不連續(xù)體系 SDSPAGE中 ,當分離膠加完后 ,需在其上加一層水 ,為什么 ? ? 在不連續(xù)體系 SDSPAGE中 ,分離膠與濃縮膠中均含有 TEMED和 AP,試述其作用 ? ? 樣品液為何在加樣前需在沸水中加熱幾分鐘 ? 十二、達到預期目標 1. SDS聚丙稀酰胺凝膠電泳技術 是動物生物化學實驗技術教學中 一個綜合性實驗項目 ， 且是一個較高水平的一個實驗項目。 蛋白質鹽析沉淀提取 → 凝膠層析分離（上年基金項目已完成） → DEAE纖維素分離提純蛋白質 → 蛋白質分子量測定、生物分子純度鑒定等綜合項目（五個單項實驗項目）。 2. 該項目的完成對我們 課程的建設起到了促進發(fā)展 的作用，達到了我們預期目標。 3. 該實驗項目的開設，使學生掌握了利用聚丙稀酰胺凝膠電泳技術分離蛋白質 、 SDS— PAGE測定蛋白質分子量的 基本理論及實驗技術。 4. 通過 對生物大分子的分離、純化、鑒定等過程的學習，使學生在 綜合性實驗技術方面 有了一個 系統(tǒng)的認識及動手能力 , 為在現(xiàn)代分子生物學技術等手段方面的運用打下了良好的基礎。 5.“ SDS — 聚丙稀酰胺凝膠電泳法測定蛋白質分子量”一實驗的開設達到了與國內(nèi)同類院校相當?shù)妮^高水平。 對本科生的實驗教學、本科生的論文設計、研究生的高級生化實驗等方面都充實了內(nèi)容。
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