微生物綜合實(shí)驗(yàn)報(bào)告-資料下載頁
2025-02-04 07:23本頁面
【導(dǎo)讀】由前幾年的“蘇丹紅紅心鴨蛋”再到這幾年的“三聚氰胺奶粉事件”和“瘦。然而食品中微生物的菌落總數(shù)是用來判定食品被細(xì)菌污染的程度即清潔。狀態(tài)及其安全質(zhì)量，它反映食品在生產(chǎn)過程中是否符合國家食品安全標(biāo)準(zhǔn)要求，以便對被檢樣品做出適當(dāng)?shù)氖称钒踩u價(jià)。然而微生物的檢測主要依靠菌落總數(shù)。每單位食品中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。所以說通過這些實(shí)驗(yàn)讓我。量評價(jià)時提供依據(jù)。1．培養(yǎng)基：平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，磷酸鹽緩沖液，無菌生理鹽水。選擇2個～3個適宜稀釋度的樣品勻液，固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅。生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的試管內(nèi)，振搖試管混合均勻，制成1:100的稀釋液。稀釋度做兩個平皿。恒溫水浴箱中保溫）傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。菌落計(jì)數(shù)以菌落形成單位表示。低于30cfu的平板記錄具體菌落數(shù)，大于300cfu的可記錄為多不可計(jì)。釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。n1——第一稀釋度平板個數(shù)；d——稀釋因子。
【正文】 口。如果水在流動，瓶口必須迎著水流，以免手上的細(xì)菌被水沖進(jìn)瓶子。 水樣放置過程中，內(nèi)含的細(xì)菌數(shù)目和類型會發(fā)生變化，所以要求水樣品應(yīng)于6～ 10℃貯存，并不超過 6h。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 17 圖 95 生活飲用水中大腸菌群的檢驗(yàn)程序 （ 2）初發(fā)酵試驗(yàn)：吸取待檢樣品接種于乳糖蛋白胨發(fā)酵管內(nèi)， 10mL 接種量采用雙料發(fā)酵管，而 lmL 及 lmL 以下接種量采用單料管。如取 10mL 雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，取 1mL 水樣接種到 10mL 單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，另取 1mL 水樣注入到 9mL 滅菌生理鹽水中，混勻后吸取 1mL 注入到 10mL 單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，每一稀釋度接種 5 管。 對于已經(jīng)處理過的出廠自來水，需經(jīng)常檢驗(yàn)或每天檢驗(yàn)一次的，可直接接種5 份 10mL 水樣雙料培養(yǎng)基，每份接種 10mL 水樣。 檢驗(yàn)水源水時，如污染較 嚴(yán)重，應(yīng)加大稀釋度，可接種 甚至，每個稀釋度接種 5 管，每個水樣共接種 15 管。接種 1mL 以下水樣時，必須作 10 倍遞增稀釋后，取 1mL 接種，每遞增稀釋一次，換用 1 支1mL 滅菌刻度吸管。 將接種管置于 36 士 1℃培養(yǎng) 24 士 2h。如所用乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣產(chǎn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 18 酸，則可報(bào)告為總大腸菌群陰性，如有產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的發(fā)酵管，按下列程序繼續(xù)進(jìn)行檢驗(yàn)。 （ 3）分離培養(yǎng) 在指示性培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣的發(fā)酵管中的發(fā)酵液分別接種在 EMB（伊紅美藍(lán)瓊脂）平板上劃線分離，置于 36 士 1℃培養(yǎng) 18～ 24h，觀察菌落形態(tài)，挑取符合下列特征的菌落作為革蘭氏染色、鏡檢和證實(shí)試驗(yàn)。 深紫黑色，具有金屬光澤的菌落； 紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落； 淡紫紅色，中心較深的菌落。 （ 4）證實(shí)試驗(yàn) 革蘭氏染色及鏡檢：于上述平板上長出的菌落中挑取 1～ 2 個大腸菌群可疑菌落進(jìn)行鏡檢和革蘭氏染色。 復(fù)發(fā)酵試驗(yàn)：將上述鏡檢之菌落同時接種于乳糖蛋白胨發(fā)酵管，置于 36 士1℃培養(yǎng) 18～ 24h，觀察產(chǎn)氣情況，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實(shí)有大腸菌群存在。 （ 5）結(jié)果報(bào)告 凡是在乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，在指示性培養(yǎng)基上能生長的，革蘭 氏染色為陰性的無芽孢桿菌，在復(fù)發(fā)酵管中產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的，即說明有大腸菌群的細(xì)菌存在 — 大腸菌群陽性；有一項(xiàng)不符的，即說明無大腸菌群的細(xì)菌存在大腸菌群陰性。 根據(jù)證實(shí)為大腸桿菌群陽性的管數(shù)，查相應(yīng)的大腸桿菌 MPN 檢索表，報(bào)告每100 毫升待檢樣品中大腸菌群細(xì)菌的最近似數(shù)。 5 管法結(jié)果如表 92 所示 ,15 管法結(jié)果如表 93 所示。稀釋樣品查表后所得結(jié)果應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時，可報(bào)告總大腸菌群未檢出。 表 92 用 5 份 10mL 水樣時各種陽性和陰性結(jié)果組合時的最可能數(shù)（ MPN） 5個 10mL管中陽性管數(shù) 最可 能數(shù)（ MPN） 0 1 2 3 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 19 4 5 16 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 在純樣品發(fā)酵管中，觀察到了產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象。說明培養(yǎng)出了大腸菌群落。查 MPN 表，發(fā)現(xiàn)我們小組測的樣品中每 100ml 大腸桿菌群最可能數(shù)為 200 個。 項(xiàng)目三 革蘭氏染色 實(shí)驗(yàn)原理： 通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后，在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物，革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。 實(shí)驗(yàn)器材： 接種環(huán)、載玻片、酒精燈、顯微鏡、革蘭氏碘液、秒表、草酸銨結(jié)晶紫、 95％的酒精、番紅、蒸餾水。 實(shí)驗(yàn)步驟： 涂片 —— →干燥 —— →草酸銨結(jié)晶紫染色（ 60s） —— →水洗 —— →碘液媒染（ 60s） —— → 95％酒精脫色（ 30s） —— →水洗 —— →番紅（ 2min） —— →水洗 —— →干燥 —— →鏡檢 實(shí)驗(yàn)結(jié)果： 由 于染色不是特別的充分，所以觀察的結(jié)果不是很清晰。 實(shí)驗(yàn)報(bào)告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 20 實(shí)驗(yàn)感想 時間 是匆忙的，為期兩周的實(shí)驗(yàn)課程就是這樣在不知覺中過去了，在這為期不長的兩周里學(xué)到了不少的東西。首先學(xué)到的就是將來作為一名質(zhì)檢人員所必須的嚴(yán)謹(jǐn)性，做事要認(rèn)真，因?yàn)殄e誤的說據(jù)比沒有數(shù)據(jù)更可怕。所以說對每一個樣品、 每一種試劑都應(yīng)做到精確。另外一點(diǎn)就是不能急于求成，做事要有耐心，要不怕失敗。在我們?yōu)槠谶@兩周的實(shí)驗(yàn)中我們失敗了好多次，也曾想到過放棄，但看 到其他同學(xué)都做出來了 自己卻沒有做出來，心里甚是不甘。還是堅(jiān)持到了最后。還有一點(diǎn)讓我學(xué)到的就是遇到緊急事件不要慌，不要亂。要鎮(zhèn)靜的想辦法去補(bǔ)救，就好比實(shí)驗(yàn)中遇到的一些酒精燈燃燒時灑了啊，加熱時樣品因沸騰而溢出啊。等等一些突發(fā)事件都應(yīng)該從容的去面對才好。這在以后的工作和學(xué)習(xí)中是我們都應(yīng)該做好的。另外一點(diǎn)在這次實(shí)驗(yàn)周中讓我學(xué)到的就是團(tuán)隊(duì)精神。一個好的成功的團(tuán)隊(duì)就是要做到團(tuán)隊(duì)成員之間的密切配合，分工明確，和相互信任。只有這樣你的團(tuán)隊(duì)才會更好更快的完成任務(wù)。因?yàn)槲覀冏鰧?shí)驗(yàn)都是以團(tuán)隊(duì)的形式做的，在這次的實(shí)驗(yàn)中讓我們了 解到了。我們團(tuán)隊(duì)中由于有時分工不明確造成做實(shí)驗(yàn)時有的人在那忙碌，而有些人在那閑著沒事做，這就造成了團(tuán)隊(duì)成員之間會有分歧的，這一點(diǎn)都是要靠一個好的組長來為維持的。還好發(fā)現(xiàn)問題以后及時作出了調(diào)整，這讓我們在后面的實(shí)驗(yàn)中做的很順利。這也讓我們學(xué)習(xí)到了將來步入工作崗位以后怎樣才能更好的來當(dāng)一名領(lǐng)導(dǎo)，怎樣才能讓自己的員工更好的聽從自己的安排。 在在以后的學(xué)習(xí)中要更加的注重自己能力的培養(yǎng)，在學(xué)習(xí)好文化科知識的同時把自己的學(xué)習(xí)能力，管理能力，創(chuàng)新能力同步提升上去，這樣自己才能在以后的工作中更好的立于不敗之林。才能更好的為 人們服務(wù)，才能更多的為人們提供出更加健康的食品。
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