【正文】 制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過 15min。 （ 5）根據(jù)對樣品污染狀況的估計，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。 （ 3）樣品勻液的 pH 值應(yīng)在 ～ 之間，必要時分別用 1mol/LNaOH 或1mol/LHCl 調(diào)節(jié)。 四、操作步驟 方法 1： 大腸菌群 LST 肉湯培養(yǎng)基 MPN 計數(shù)法 圖 食品中大腸菌群 MPN 計數(shù)法檢驗程序 1．采樣及稀釋 （ 1）固體和半固體樣品 ：稱取 25g 樣品 ,放入盛有 225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)， 8000r/min～ 10000r/min 均質(zhì) 1min～ 2min，或放入盛有 225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打 1min～2min，制成 1:10 的樣品勻液。 三、實驗器材 1．儀器和材料 恒溫培養(yǎng)箱（ 36℃）、恒溫水浴（ 46℃）、冰箱（ 2～ 5℃）、天平、顯微鏡、溫度計、 500mL 無菌錐形瓶 1 個（內(nèi)裝 225mL 無菌水和適量玻璃珠）、無菌培養(yǎng)皿（ 90mm） 10 套、 1mL 無菌吸管 10 支、 10mL 無菌吸管 10 支、 50mL 試管 10 支、無菌生理鹽水 200mL；火柴、載玻片、接種針、試管架、杜氏管 10 支。 二、實驗說明 大 腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的，經(jīng) 37℃ 24～48h 培養(yǎng)能產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 2方便面的菌落總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB174002021《方便面衛(wèi)實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 11 生標準》規(guī)定，方 便面的面塊 +調(diào)料菌落總數(shù)為≤ 50000cfu/g，大腸菌群為≤ 150 MPN/100g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格方便面。 2豆制品及面筋的菌落總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB27112021《非發(fā)酵性豆制品及面筋衛(wèi)生標準》規(guī)定，定型包裝非發(fā)酵豆制品的菌落總數(shù)為≤ 750 cfu/g；依據(jù)國家強制性標準 GB27122021《發(fā)酵性豆制品衛(wèi)生標準》規(guī)定，定型包裝發(fā)酵性豆制品的大腸菌群為≤ 30MPN/100g。 1碳酸飲料的菌落總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 《碳酸飲料衛(wèi)生標準》規(guī)定，碳酸飲料產(chǎn)品的酵母應(yīng)≤ 10cfu/mL，菌落總數(shù)應(yīng)≤100cfu/mL，大腸菌群應(yīng)≤ 6MPN/100mL；超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格碳酸飲料。 1黃酒的菌落總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB27582021《發(fā)酵酒衛(wèi)生標準》規(guī)定，黃酒產(chǎn)品的菌落總數(shù)應(yīng)≤ 50cfu/ml，超過國家標準規(guī)定可判斷為 不合格黃酒。 1果、蔬汁飲料的落菌總數(shù)標準 1依據(jù)國家強制性標準 GB192972021《果、蔬汁飲料衛(wèi)生標準》規(guī)定 ，果 (蔬 )汁及果 (蔬 )汁飲料產(chǎn)品的菌落總數(shù)不得超過 100cfu/mL，酵母不得超過 20cfu/mL，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 10 果、蔬汁飲料。 1肉干、肉鋪的落菌總數(shù)標準肉干、依據(jù)強制性國家標準 GB27262021《熟肉制品衛(wèi)生標準》規(guī)定，肉制品中大腸菌群不得超過 30MPN/100g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格肉制品。若超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格純凈水或礦泉水。 調(diào)味品的落菌 總數(shù)標準調(diào)味品的落菌總數(shù)標準依據(jù) SB／ T103712021《雞精調(diào)味料》標準規(guī)定，雞精調(diào)味料中大腸菌群不得超過 90MPN／ 100g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格雞精產(chǎn)品。 巴氏殺菌、滅菌乳的落菌總數(shù)標準巴氏殺菌、依據(jù)國家強制性標準 GB19645 2021《巴氏殺菌、滅菌乳衛(wèi)生標準》規(guī)定，滅菌乳菌落總數(shù)不得超過 10cfu/g，大腸菌群不得超過 3MPN/100g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格乳制品。 冷凍飲品的落菌總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 《冷凍飲品衛(wèi)生標準》規(guī)定，含淀粉或果類的冷凍飲品菌落總數(shù)應(yīng)≤ 3000cfu/g,大腸菌群應(yīng)≤ 100MPN/100g；含乳蛋的冷凍飲品的菌落總數(shù)應(yīng)≤ 25000cfu/g,大腸菌群應(yīng)≤ 450MPN/100g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格雪糕或冷飲。 糕點、面包、月餅的落菌總數(shù)標準糕點、面包、依據(jù)國家強制性標準 GB 70992021《糕點、面包衛(wèi)生標準 》規(guī)定，月餅產(chǎn)品中菌落總數(shù)不得超過 1500cfu/g，大腸菌群不得超過 30MPN/100g，霉菌計數(shù)不得超過 100cfu/g；蛋糕生產(chǎn)的標準要求：菌落總數(shù)≤ 10000cfu/g，大腸菌群≤ 300MPN/100g，霉菌≤150cfu/g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格糕點類產(chǎn)品。 國標中的菌落總數(shù) 膨化食品的落菌總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB174012021《膨化食品衛(wèi)生標準》規(guī)定，膨化食品的菌落總數(shù)應(yīng)為≤ 10000cfu/g、大腸菌群應(yīng)為≤90MPN/100g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格膨化食品。 （ 5）稱重取樣以 cfu/g 為單位報告，體積取樣以 cfu/mL 為單位報告。 （ 3）若所有平板上為蔓延菌落而無法計數(shù)，則報告菌落蔓延。 5．菌落總數(shù)的報告 （ 1）菌落數(shù)小于 100cfu 時，按“四舍五入”原則修約，以整數(shù)報告。 （ 5）若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無菌落生長，則以小于 1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。 （ 3）若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于 300cfu，則對稀釋度最高的平板進行計數(shù)，其他平板可記錄為多不可計，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計 算。 （ 2）若有兩個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按以下公式計算： 12( )CNnn? ?? 式中： N—— 樣品中菌落數(shù) Σ C—— 平板（含適宜范圍菌落數(shù)的平板）菌落數(shù)之和； n1—— 第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板個數(shù)； n2—— 第二稀釋度（高稀釋倍數(shù)）平板個數(shù)； d—— 稀釋因子（第一稀釋度）。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學院 6 （ 3）當平板上出現(xiàn)菌落間無明顯界線的鏈狀生長時，則將每條單鏈作為一個菌落計數(shù)。每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)