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微生物實(shí)驗(yàn)室病原微生物評(píng)估報(bào)告-文庫吧資料

2025-04-13 03:30本頁面
  

【正文】 有結(jié)核菌感染外,尚需考慮以下情況:結(jié)核菌在感染4~8周后才建立充分變態(tài)反應(yīng),在這之前,結(jié)核菌素試驗(yàn)可呈陰性;應(yīng)用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制劑,或營養(yǎng)不良、麻疹、百日咳等患者,結(jié)核菌素反應(yīng)亦可暫時(shí)消失。若呈強(qiáng)陽性反應(yīng),常表示為活動(dòng)性結(jié)核病。(5IU),硬結(jié)平均直徑≥5mm為陽性反應(yīng)。③ 結(jié)核菌素試驗(yàn):是診斷結(jié)核感染的參考指標(biāo)。肺結(jié)核的常見X線表現(xiàn)包括:纖維鈣化的硬結(jié)病灶、浸潤性病灶以及干酪樣病灶等。② 影像學(xué)檢查:胸部X線檢查可以發(fā)現(xiàn)肺內(nèi)病變的部位、范圍、有無空洞或空洞大小、洞壁厚薄等。若涂片陰性或診斷有疑問時(shí),培養(yǎng)尤其重要;而且,培養(yǎng)后可做藥物敏感性測定,指導(dǎo)臨床用藥。培養(yǎng)法更為精確,尚可作藥物敏感試驗(yàn)與菌型鑒定。在我國非典型分枝桿菌尚屬少見,故抗酸桿菌陽性,肺結(jié)核診斷基本即可成立。而且結(jié)核桿菌隨著環(huán)境的改變易發(fā)生菌落形態(tài)、毒力、L型及藥物耐藥性變異,如在人工培養(yǎng)基上反復(fù)連續(xù)傳代,可產(chǎn)生變異而致毒力降低,三、結(jié)核桿菌的檢測與診斷(1)細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其它檢查① 結(jié)核菌檢查:是確診肺結(jié)核最特異性的方法,痰中找到結(jié)核菌為確診肺結(jié)核的主要依據(jù)。它為專性需氧菌,生長的溫度范圍是3540℃,pH 。此外結(jié)核桿菌菌體還具有多形態(tài)特征,受不良生長條件的影響可分別表現(xiàn)為桿菌型 (基本形態(tài))、濾過型、顆粒型和球菌型(L型)4種不同的類型。 結(jié)核分枝桿菌正常典型的形態(tài)是直或稍彎曲、兩端鈍圓的桿菌,菌體長14納米,無芽胞、無莢膜、無鞭毛,生長發(fā)育期間有分枝生長傾向。肺部病變發(fā)生廣泛纖維化或胸膜粘連增厚時(shí),患側(cè)胸廓常呈下陷、肋間隙變窄、氣管移位與叩濁,對(duì)側(cè)可有代償性肺氣腫征。若病變范圍較大,患側(cè)肺部呼吸運(yùn)動(dòng)減弱,叩診呈濁音,聽診時(shí)呼吸音減低,或?yàn)橹夤芊闻莺粑?。若并發(fā)氣胸或大量胸腔積液,呼吸困難癥狀尤為嚴(yán)重。大咯血時(shí)可發(fā)生失血性休克,偶因血塊阻塞大氣道引起窒息。②呼吸系統(tǒng)癥狀 通常為干咳或帶少量黏液痰;繼發(fā)感染時(shí),痰呈粘液膿性。但多數(shù)患者病灶輕微,無顯著癥狀。 感染結(jié)核桿菌后,終身都有可能發(fā)病,發(fā)病時(shí)間因人而異,一般2個(gè)月~20年才發(fā)病。與患者同處于空氣不流通的室內(nèi)的密切接觸者,受感染的可能性增大?;颊卟∽兒桶Y狀越嚴(yán)重,傳染性也越大。一般結(jié)核病患者痰中結(jié)核桿菌越多,傳播的危險(xiǎn)性越大。結(jié)核桿菌的生物危害評(píng)估報(bào)告一、結(jié)核桿菌的傳播與致病結(jié)核桿菌通常指結(jié)核分枝桿菌和牛分枝桿菌,其中結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)是引起人類結(jié)核病的主要病原體。要備有帶滑石粉的乳膠手套??赡芙佑|潛在傳染源、被污染的表面或設(shè)備時(shí),要戴手套。人員到非實(shí)驗(yàn)室區(qū)域時(shí),防護(hù)服必須留在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)。當(dāng)必須在生物安全柜外處理標(biāo)本時(shí),需采取面部保護(hù)措施(跟鏡、口罩、面罩、或其他防濺裝置),以免傳染源或其他有害物濺或?yàn)⒌矫嫔?。確定可能形成傳染性濺出物的實(shí)驗(yàn)過程,包括離心、研磨、勻漿、劇烈震蕩或混勻、超聲波破裂、開啟裝有傳染源的容器、采集感染標(biāo)本等。污染的設(shè)備在送去修理、維護(hù)前,要按照相關(guān)的規(guī)定消毒;在離開設(shè)施轉(zhuǎn)移前,要按照相關(guān)的規(guī)定打包運(yùn)輸。進(jìn)行適當(dāng)?shù)尼t(yī)學(xué)評(píng)估、觀察、治療,保留書面記錄。離開該系統(tǒng)進(jìn)行消毒的物料,在轉(zhuǎn)移前應(yīng)包裝,其包裝應(yīng)符合有關(guān)的法規(guī)。所有的培養(yǎng)物、儲(chǔ)存物及其它規(guī)定的廢物在釋放前,均應(yīng)使用可行的消毒方法進(jìn)行消毒,如高壓滅菌。打碎的器皿不能直接用手處理,必須用其它工具處理,如刷子和簸箕、夾子或鑷子。用過的一次性針頭必須彎曲、切斷、破碎、重新套上針頭套、從一次性注射器上去掉,或在丟棄前進(jìn)行人工處理,要不將之小心放入不會(huì)被刺穿的、用于收集廢棄銳器的容器中。對(duì)于污染的銳器,必須時(shí)刻保持高度的警惕,包括針、注射器、玻片、加樣器等。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。五、淋病奈瑟菌的生物安全防護(hù)根據(jù)《病原微生物生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)霍亂弧菌屬于三類,BSL2。,防止新生兒淋病性眼炎發(fā)生。,可應(yīng)用于已知與淋病患者有性接觸者。四、淋病的預(yù)防淋病奈瑟菌的預(yù)防要點(diǎn)如下:。淋球菌的基因擴(kuò)增檢測 PCR技術(shù)和連接酶鏈反應(yīng)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了檢測淋球菌的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡便的優(yōu)點(diǎn),可以直接檢測臨床標(biāo)本中極微量的病原體。但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實(shí)驗(yàn)人員的判斷水平,故該實(shí)驗(yàn)尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。(3)抗原檢測1.固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時(shí)間遠(yuǎn)送時(shí)使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。培養(yǎng)后需根據(jù)菌落形態(tài)、革蘭染色、氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)做出鑒定。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭氏染色,氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定。國內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長。(2)培養(yǎng)檢查:淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對(duì)癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法。咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因?yàn)槠渌紊鷮僭谘什渴钦5木?。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為5060%,且有假陽性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。三、淋病奈瑟菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其診斷細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)室檢查及其它檢查(1) 涂片檢查:取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。藉助上述生化特性亦可與腦膜炎球菌及其他奈瑟菌相鑒別。 淋球菌在血瓊脂培養(yǎng)基孵育24小時(shí)后,~1mm的圓形稍隆起,濕潤光滑,半透明,邊緣呈花瓣?duì)?,有粘性的露滴狀菌?一般消毒劑容易將它殺滅,在 1:4000硝酸銀溶液中7分鐘死亡,1%石炭酸溶液中3分鐘內(nèi)死亡。最怕干燥,在完全干燥環(huán)境下只能存活1~2小時(shí),對(duì)溫度變化敏感,超過38℃或低于30℃則不能生長,在培養(yǎng)基上室溫放置1~2天即可死亡,在39℃ 存活13小時(shí),42℃存活15分鐘,50℃存活5分鐘。人工培養(yǎng)后形態(tài)亦常呈球形、單個(gè)、成雙或四聯(lián)排列。革蘭氏染色陰性,呈粉紅色,美藍(lán)染色呈藍(lán)色。由于本病潛伏期短、傳染性強(qiáng)、后果嚴(yán)重,因此它是我國當(dāng)前重點(diǎn)防治的性病之一。有時(shí)肛門、直腸、咽粘膜、眼結(jié)膜也可受染。其傳播途徑主要包括性交傳染,還可通過非性接觸傳播,如通過接觸患者分泌物污染的用品(衣褲、床上用品、毛巾、浴盆、馬桶等)間接感染;孕婦淋病患者當(dāng)羊膜破裂,可繼發(fā)羊膜腔內(nèi)及胎兒感染;新生兒經(jīng)過患淋病的母體產(chǎn)道時(shí)常可引起淋菌性眼炎;另外尚可通過醫(yī)護(hù)人員的手和器具引起醫(yī)源性感染。淋病是淋菌性尿道炎的簡稱,是由淋球菌引起的泌尿生殖系統(tǒng)化膿性炎性疾病,它是人類很古老的,也是當(dāng)前世界范圍內(nèi)流行非常廣泛的一種性傳播疾病。脫掉手套后,要洗手。一次性手套不用清洗、不能重復(fù)使用,不能用于接觸“潔凈”的表面(鍵盤、電話等),也不應(yīng)當(dāng)戴著到實(shí)驗(yàn)室外。防護(hù)服可以在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)處理,也可以在洗衣房中洗滌,但不能帶回家中。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi),必須使用專用的防護(hù)性外衣、大褂、罩衫或制服。涉及高濃度或大體積的傳染源時(shí),若選用密封轉(zhuǎn)頭或帶安全罩的離心機(jī),若轉(zhuǎn)頭或安全罩僅在生物安全柜中打開,則可在開放實(shí)驗(yàn)室內(nèi)離心。(2)安全設(shè)備正確使用和保養(yǎng)生物安全柜、最好是二級(jí)生物安全柜、或其他合適的人員防護(hù)設(shè)施、或物理遏制裝置。按日常程序、在有關(guān)傳染源的工作結(jié)束后、尤其是傳染源濺出或?yàn)⒊龊?、或受到其他傳染源污染后,?shí)驗(yàn)室設(shè)備和工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)使用有效的消毒劑消毒。濺出或偶然事件中,明顯暴露于傳染源時(shí),要立即向?qū)嶒?yàn)室主任報(bào)告。轉(zhuǎn)移到就近實(shí)驗(yàn)室消毒的物料應(yīng)置于耐用、防漏容器內(nèi),密封運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室。盛污染的針頭、銳器、碎玻璃的容器在倒掉前,應(yīng)按照相關(guān)的規(guī)定進(jìn)行消毒。非一次性銳器必須放置在堅(jiān)壁容器中,轉(zhuǎn)移至處理區(qū)消毒,最好高壓殺菌。注射和吸取感染材料時(shí),只能使用針頭固定注射器或一次性注射器(即注射器和針頭是一體的)。所有的操作過程應(yīng)盡量細(xì)心,避免產(chǎn)生和濺出氣溶膠。不許在工作區(qū)域飲食、吸煙、清洗隱型眼鏡和化妝。二、細(xì)菌的生物安全防護(hù) 根據(jù)《病原微生物生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》中的有關(guān)規(guī)定,人間傳播的微生物名錄(待頒布)金黃色葡萄球菌屬于三類,BSL2。桿菌肽,若有的話,可試用于治療抗萬古霉素的葡萄球菌感染??谷f古霉素的腸球菌(VRE)菌株的流行日益增加, 這種菌株在實(shí)驗(yàn)室中可將引起抗萬古霉素的基因轉(zhuǎn)為凝固酶陽性的金黃色葡萄球菌菌株,而在感染的病人中則轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂戈幮云咸亚蚓蛛x株。在治療異物相關(guān)性MRSA感染或漿膜腔MRSA感染時(shí),利福平和氨基糖苷類是有用的輔助藥物。可用于替代萬古霉素治療MRSA感染的藥物有:TMPSMZ,成人劑量為TMP10~15mg /()加SMZ50~75mg/(),分劑口服或腸外給藥,每次間隔8小時(shí)或12小時(shí),連續(xù)2~4周;利福平(600mg/d)口服或腸外給藥;腸外給亞胺培南西拉司丁(500mg每6小時(shí)1次)或美羅匹寧(~。腎功能受損時(shí),劑量應(yīng)根據(jù)血清中藥物的濃度加以調(diào)整,療程視感染部位及病人的反應(yīng)而定,但一般為 2~4周。雖然亞胺培南西拉司丁或喹諾酮類對(duì)某些MRSA感染是有效的,但靜脈注射萬古霉素為首選。MRSA菌株通常對(duì)耐β內(nèi)酰胺酶青霉素,頭孢菌素和卡巴培南類有耐藥性。很多葡萄球菌菌株對(duì)紅霉素,四環(huán)素類藥物,氨基糖苷類,桿菌肽和氯霉素也敏感,但因有更好更安全的藥可用,故很少使用氯霉素和桿菌肽。大多數(shù)菌株對(duì)耐青霉素酶青霉素(甲氧苯青霉素,苯甲異噁唑青霉素,乙氧萘青霉素,鄰氯青霉素,雙氯青霉素),頭孢菌素(頭孢菌素Ⅰ,頭孢唑啉,頭孢菌素Ⅳ,頭孢拉定,頭孢羥唑,頭孢西丁和第三代頭孢菌素),卡巴培南類(亞胺培南,美羅匹寧),慶大霉素,萬古霉素,替考拉寧,林可霉素和氯林可霉素,是敏感的??股氐倪x擇和劑量取決于感染的部位,疾病的嚴(yán)重程度和細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性。 治療包括膿腫引流,抗生素(重癥病人需腸外給藥)和全身支持療法。已被感染的病人應(yīng)與其他易感病人隔離,患有活動(dòng)性葡萄球菌感染,即使是局部性的感染(如癤)的醫(yī)護(hù)人員,在其感染治愈前不得接觸病人或器械。2)防止金黃色葡萄球菌腸毒素的生成 應(yīng)在低溫和通風(fēng)良好的條件下貯藏食物,以防腸毒素形成;在氣溫高的春夏季,食物置冷藏或通風(fēng)陰涼地方也不應(yīng)超過6小時(shí),并且食用前要徹底加熱。奶制品要以消毒牛奶為原料,注意低溫保存。四、金黃色葡萄球菌的防治及生物安全防護(hù)一、細(xì)菌的防治金黃色葡萄球菌的控制主要包括:1)防止金黃色葡萄球菌污染食品,防止帶菌人群對(duì)各種食物的污染:定期對(duì)生產(chǎn)加工人員進(jìn)行健康檢查,患局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)、上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎、口腔疾病等)的人員要暫時(shí)停止其工作或調(diào)換崗位。 用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和對(duì)流免疫電泳方法可檢測金葡菌的磷壁酸抗體。其基本原理是在紙片上滴加包被有纖維蛋白原和IgG抗體的聚苯乙烯膠乳,然后用接種環(huán)挑取待鑒定菌株的新鮮培養(yǎng)物加入混勻,若出現(xiàn)凝集塊現(xiàn)象即為陽性。(3)甘露醇發(fā)酵實(shí)驗(yàn) 金黃色葡萄球菌可發(fā)酵甘露醇。(2)耐熱核酸酶試驗(yàn):將24小時(shí)肉湯培養(yǎng)物沸水浴處理15min,用接種環(huán)劃線刺種于甲苯胺蘭DNA平板,35℃培養(yǎng)24小時(shí),在刺種線周圍出現(xiàn)淡粉色者為陽性。玻片法:將待試菌落乳化于玻片上的鹽水中,經(jīng)10~20S證實(shí)無自凝后,用接種環(huán)取人或兔血漿一環(huán),與乳化菌液混合,出現(xiàn)凝集者為陽性,另設(shè)生理鹽水為陰性對(duì)照。而游離型血漿凝固酶則在產(chǎn)生后被分泌到菌體外,不能直接作用于纖維蛋白原,但可以激活血漿凝血酶原,使之轉(zhuǎn)化成凝血酶,后者再作用于纖維蛋白原使其轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。血漿凝固酶分為結(jié)合型和游離型。在高甘露醇平板上金黃色葡萄球菌生成淡橙黃色菌落,以此可與其他凝固酶陰性的葡萄球菌相鑒別。該菌在普通肉湯中呈均勻迅速混濁生長;若接種于瓊脂平板上35℃過夜后可形成直徑約2~3mm的厚菌落、濕潤有光澤、呈金黃色不透明圓形凸起。即具有重要的臨床價(jià)值。三、金黃色葡萄球菌的檢測與診斷:采自不同感染部位的各種標(biāo)本,包括血液、腦脊液、穿刺液;痰液、膿液、創(chuàng)傷分泌物、尿液、糞便和嘔吐物等。許多菌株可分解精氨酸,水解尿素,還原硝酸鹽,液化明膠??煞纸馄咸烟?、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。金黃色葡萄球菌營養(yǎng)要求不高,在普通培養(yǎng)基上生長良好,需氧或兼性厭氧,最適生長溫度35~37℃、~。二、金黃色葡萄球菌的生物學(xué)特性 典型的金黃色葡萄球菌為球型,顯微鏡下呈單個(gè)、成雙以及排列成葡萄串狀。它引起的食物中毒癥狀是嘔吐和腹瀉。腸毒素可耐受100176。 金黃色葡萄球菌的致病力強(qiáng)弱主要取決于其產(chǎn)生的毒素和侵襲性酶::外毒素,分α、β、γ、δ四種,能損傷血小板,破壞溶酶體,引起肌體局部缺血和壞死;:可破壞人的白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞;:當(dāng)金黃色葡萄球菌侵入人體時(shí),該酶使血液或血漿中的纖維蛋白沉積于菌體表面或凝固,阻礙吞噬細(xì)胞的吞噬作用。 現(xiàn)在葡萄球菌性小腸結(jié)腸炎很罕見,但若住院病人出現(xiàn)發(fā)熱,腸梗阻,腹痛和腹脹,低血壓或腹瀉,特別是新近作過腹部手術(shù)或接受過抗生素者,可提示本病。白細(xì)胞計(jì)數(shù)常>15000/μl并且血培養(yǎng)常陽性。 葡萄球菌性骨髓炎主要見于兒童,可引起寒戰(zhàn),發(fā)熱和受累骨疼痛,繼之出現(xiàn)紅腫。 葡萄球菌性心內(nèi)膜炎特別好發(fā)于靜脈注射給藥者和裝有人工心臟瓣膜的病人。 葡萄球菌性菌血癥可發(fā)生于任何與血管內(nèi)導(dǎo)管或其他異物有關(guān)的局限性葡萄球菌膿腫或感染,它是嚴(yán)重?zé)齻∪怂劳龅某R娫?。而腸毒素形成條件包括:存放溫度,在37℃內(nèi),溫度越高,產(chǎn)毒時(shí)間越短;存放地點(diǎn),通風(fēng)不良氧分壓低易形成腸毒素;食物種類,含蛋白質(zhì)豐富,水分多,同時(shí)含一定量淀粉的食物,腸毒素易生成。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報(bào)道;上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。金黃色葡萄球菌腸毒素是個(gè)世界性衛(wèi)生問題,在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒占整個(gè)細(xì)菌性食物中毒的33%,加拿大則更多,占45%,我國每年發(fā)生的此類中毒事件也非常多。評(píng)
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