【正文】 1《熟肉制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，肉制品中大腸菌群不得超過 30MPN/100g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格肉制品。 1黃酒的菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) GB27582021《發(fā)酵酒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，黃酒產(chǎn)品的菌落總數(shù)應(yīng)≤ 50cfu/ml，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為 不合格黃酒。 2豆制品及面筋的菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) GB27112021《非發(fā)酵性豆制品及面筋衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，定型包裝非發(fā)酵豆制品的菌落總數(shù)為≤ 750 cfu/g；依據(jù)國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn) GB27122021《發(fā)酵性豆制品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，定型包裝發(fā)酵性豆制品的大腸菌群為≤ 30MPN/100g。 二、實驗說明 大 腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的，經(jīng) 37℃ 24～48h 培養(yǎng)能產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 四、操作步驟 方法 1： 大腸菌群 LST 肉湯培養(yǎng)基 MPN 計數(shù)法 圖 食品中大腸菌群 MPN 計數(shù)法檢驗程序 1．采樣及稀釋 （ 1）固體和半固體樣品 ：稱取 25g 樣品 ,放入盛有 225mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)， 8000r/min～ 10000r/min 均質(zhì) 1min～ 2min，或放入盛有 225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打 1min～2min，制成 1:10 的樣品勻液。 （ 5）根據(jù)對樣品污染狀況的估計，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。 1℃培養(yǎng) 24177。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。產(chǎn)氣者，為大腸菌群陽性管。 方法 2： 大腸菌群平板計數(shù)法 板計數(shù)法檢驗程序 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 15 圖 大腸菌群平板計數(shù)法的檢驗程序 （ 1）樣品的稀釋。 15～ 20mL 冷至 46℃的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（ VRBA）傾注于每個平皿中。 (3)平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在 15～ 150cfu 之間的平板，分別計數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落。凡 BGLB 肉湯管產(chǎn)氣，即可報實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 16 告為大腸菌群陽性。它包括初發(fā)酵試驗、平板分離和復(fù)發(fā)酵試驗三個部分。注意手指不得觸及瓶口內(nèi)部。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 17 圖 95 生活飲用水中大腸菌群的檢驗程序 （ 2）初發(fā)酵試驗：吸取待檢樣品接種于乳糖蛋白胨發(fā)酵管內(nèi)， 10mL 接種量采用雙料發(fā)酵管，而 lmL 及 lmL 以下接種量采用單料管。接種 1mL 以下水樣時，必須作 10 倍遞增稀釋后，取 1mL 接種，每遞增稀釋一次，換用 1 支1mL 滅菌刻度吸管。 深紫黑色，具有金屬光澤的菌落； 紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落； 淡紫紅色，中心較深的菌落。 根據(jù)證實為大腸桿菌群陽性的管數(shù)，查相應(yīng)的大腸桿菌 MPN 檢索表，報告每100 毫升待檢樣品中大腸菌群細(xì)菌的最近似數(shù)。 表 92 用 5 份 10mL 水樣時各種陽性和陰性結(jié)果組合時的最可能數(shù)（ MPN） 5個 10mL管中陽性管數(shù) 最可 能數(shù)（ MPN） 0 1 2 3 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 19 4 5 16 實驗結(jié)果 在純樣品發(fā)酵管中，觀察到了產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象。 實驗器材： 接種環(huán)、載玻片、酒精燈、顯微鏡、革蘭氏碘液、秒表、草酸銨結(jié)晶紫、 95％的酒精、番紅、蒸餾水。所以說對每一個樣品、 每一種試劑都應(yīng)做到精確。還有一點讓我學(xué)到的就是遇到緊急事件不要慌，不要亂。另外一點在這次實驗周中讓我學(xué)到的就是團(tuán)隊精神。我們團(tuán)隊中由于有時分工不明確造成做實驗時有的人在那忙碌，而有些人在那閑著沒事做，這就造成了團(tuán)隊成員之間會有分歧的，這一點都是要靠一個好的組長來為維持的。才能更好的為 人們服務(wù)，才能更多的為人們提供出更加健康的食品。這也讓我們學(xué)習(xí)到了將來步入工作崗位以后怎樣才能更好的來當(dāng)一名領(lǐng)導(dǎo)，怎樣才能讓自己的員工更好的聽從自己的安排。只有這樣你的團(tuán)隊才會更好更快的完成任務(wù)。等等一些突發(fā)事件都應(yīng)該從容的去面對才好。在我們?yōu)槠谶@兩周的實驗中我們失敗了好多次，也曾想到過放棄，但看 到其他同學(xué)都做出來了 自己卻沒有做出來，心里甚是不甘。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 20 實驗感想 時間 是匆忙的，為期兩周的實驗課程就是這樣在不知覺中過去了，在這為期不長的兩周里學(xué)到了不少的東西。查 MPN 表，發(fā)現(xiàn)我們小組測的樣品中每 100ml 大腸桿菌群最可能數(shù)為 200 個。稀釋樣品查表后所得結(jié)果應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。 復(fù)發(fā)酵試驗：將上述鏡檢之菌落同時接種于乳糖蛋白胨發(fā)酵管，置于 36 士1℃培養(yǎng) 18～ 24h，觀察產(chǎn)氣情況，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣者即證實有大腸菌群存在。如所用乳糖蛋白胨培養(yǎng)管都不產(chǎn)氣產(chǎn)實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 18 酸，則可報告為總大腸菌群陰性，如有產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的發(fā)酵管，按下列程序繼續(xù)進(jìn)行檢驗。 對于已經(jīng)處理過的出廠自來水，需經(jīng)常檢驗或每天檢驗一次的，可直接接種5 份 10mL 水樣雙料培養(yǎng)基，每份接種 10mL 水樣。如果水在流動，瓶口必須迎著水流，以免手上的細(xì)菌被水沖進(jìn)瓶子。 取自來水樣時，至少應(yīng)先放水 5min，以沖去龍頭口所帶的微生物，獲得主流管中有代表性的水樣。例： 104 樣品稀釋液 1mL，在 VRBA 平板上有 100 個典型和可疑菌落，挑取其中 10 個接種 BGLB 肉湯管，證實有 6 個陽性管，則該樣品的大腸菌群數(shù)為： 100 6/10 104/g（ mL）＝ 105cfu/g（ mL）。 (4)證實試驗 從 VRBA 平板上挑取 10 個不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于 BGLB 肉湯管內(nèi)， 36177。翻轉(zhuǎn)平板，置于 36177。 （ 2）平板計數(shù) 2～ 3個適宜的連續(xù)稀釋度，每個稀釋度接種 2個無菌平皿，每皿 1mL。 表 91 大腸菌群 最可能數(shù)（ MPN）檢索表 陽性管數(shù) MPN 95%置信區(qū)間 陽性管數(shù) MPN 95%置信區(qū)間 下限 上限 下限