【正文】 棄，但看 到其他同學(xué)都做出來了 自己卻沒有做出來，心里甚是不甘。只有這樣你的團(tuán)隊才會更好更快的完成任務(wù)。才能更好的為 人們服務(wù)，才能更多的為人們提供出更加健康的食品。另外一點在這次實驗周中讓我學(xué)到的就是團(tuán)隊精神。所以說對每一個樣品、 每一種試劑都應(yīng)做到精確。 表 92 用 5 份 10mL 水樣時各種陽性和陰性結(jié)果組合時的最可能數(shù)（ MPN） 5個 10mL管中陽性管數(shù) 最可 能數(shù)（ MPN） 0 1 2 3 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 19 4 5 16 實驗結(jié)果 在純樣品發(fā)酵管中，觀察到了產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象。 深紫黑色，具有金屬光澤的菌落； 紫黑色，不帶或略帶金屬光澤的菌落； 淡紫紅色，中心較深的菌落。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 17 圖 95 生活飲用水中大腸菌群的檢驗程序 （ 2）初發(fā)酵試驗：吸取待檢樣品接種于乳糖蛋白胨發(fā)酵管內(nèi)， 10mL 接種量采用雙料發(fā)酵管，而 lmL 及 lmL 以下接種量采用單料管。它包括初發(fā)酵試驗、平板分離和復(fù)發(fā)酵試驗三個部分。 (3)平板菌落數(shù)的選擇 選取菌落數(shù)在 15～ 150cfu 之間的平板，分別計數(shù)平板上出現(xiàn)的典型和可疑大腸菌群菌落。 方法 2： 大腸菌群平板計數(shù)法 板計數(shù)法檢驗程序 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 15 圖 大腸菌群平板計數(shù)法的檢驗程序 （ 1）樣品的稀釋。未產(chǎn)氣者為大腸菌群陰性。 （ 5）根據(jù)對樣品污染狀況的估計，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。 二、實驗說明 大 腸菌群系指一群能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣、需氧和兼性厭氧的，經(jīng) 37℃ 24～48h 培養(yǎng)能產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。 1黃酒的菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強制性標(biāo)準(zhǔn) GB27582021《發(fā)酵酒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，黃酒產(chǎn)品的菌落總數(shù)應(yīng)≤ 50cfu/ml，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為 不合格黃酒。 調(diào)味品的落菌 總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)味品的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù) SB／ T103712021《雞精調(diào)味料》標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，雞精調(diào)味料中大腸菌群不得超過 90MPN／ 100g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格雞精產(chǎn)品。 國標(biāo)中的菌落總數(shù) 膨化食品的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強制性標(biāo)準(zhǔn) GB174012021《膨化食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，膨化食品的菌落總數(shù)應(yīng)為≤ 10000cfu/g、大腸菌群應(yīng)為≤90MPN/100g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格膨化食品。 （ 5）若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無菌落生長，則以小于 1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。每個稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)采用兩個平板的平均數(shù)。 2h，水產(chǎn)品 30177。 （ 2）用 1mL 滅菌吸管吸取 1:10 稀釋液 1mL，沿管壁徐徐注入含有 9mL 滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的試管內(nèi)，振搖試管混合均勻，制成 1:100 的稀釋液。所以說通過這些實驗讓我們更好的掌握菌落總數(shù)的測定一方面要求和配置； .掌握我國食品 安全標(biāo)準(zhǔn)中微生物檢驗指標(biāo)及意義； .掌握常見各類食品微生物檢驗采樣方法； .掌握食品微生物檢驗各項指標(biāo)檢驗方法和技能；在我們以后的日常工作和學(xué)習(xí)中更好的為人們服務(wù)。然而微生物的檢測主要依靠菌落總數(shù)(colony count)的測定，菌落總數(shù)的測定是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定的條件下 (樣品處理、培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)溫度和時間、 pH、需氧條件 )培養(yǎng)后，所得到的每單位食品 (1g、 1mL 或 1cm2)中所含細(xì)菌菌落的總數(shù)。固體檢樣在加入稀釋液后，最好置滅菌均質(zhì)器中以 8000～ 10000r/min 的速度處理 1min，制成 1:10 的均勻稀釋液。 1℃溫箱內(nèi)培養(yǎng) 48177。低于 30cfu 的平板記錄具體菌落數(shù)，大于 300cfu 的可記錄為多不可計。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 7 （ 4）若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于 30cfu，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌 落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。 五、實驗結(jié)果示例 稀釋度 1:100（第一稀釋度） 1:1000（第二稀釋度） 菌落數(shù)（ cfu） 232,244 33,35 122( )232 + 224 33 35 544 = 24727[ 2 ( 2) ] 10 CNnn?? ??? ??? ? ?? 上述數(shù)據(jù)修約后，表示為 25000 或 104。 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院 9 蜜餞的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強制性標(biāo)準(zhǔn) GB148842021《蜜餞衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，蜜餞食品中菌落總數(shù)不得超過 1000cfu/g；霉菌不得超過 50cfu/g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格乳蜜餞產(chǎn)品。 1果凍的落菌總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)國家強制性標(biāo)準(zhǔn) GB192992021《果凍衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，果凍中菌落總數(shù)≤ 100cfu/g、大腸菌群≤ 30MPN/100g，超過國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定可判斷為不合格果凍產(chǎn)品。 實訓(xùn)二 食品中大腸菌群的測定 一、實驗?zāi)康? 1．學(xué)習(xí)和掌握 食品中大腸菌群的檢測原理和方法，以判別食品的安全與質(zhì)量優(yōu)劣； 2．體會大腸均群在食品安全與質(zhì)量檢驗中的意義。 （ 4）用 1mL 無菌吸管或微量移液器吸取 1:10 樣品勻液 1mL，沿管壁緩緩注入 9mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌試管中（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用 1支 1mL無菌吸管反復(fù)吹打，使其混合均勻，制成 1:100 的樣品勻液。 2h，產(chǎn)氣者進(jìn)行復(fù)發(fā)酵試驗。 lg(mL)、 (mL)和 (mL)時，表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低 10 倍；如改用 (mL)、 (mL)、 (mL)時，則表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)增高 10 倍，其余類推。 1℃培養(yǎng) 18～ 24h。 方法 3：生活飲用水中大腸菌群乳糖膽鹽培養(yǎng)基 MPN 計數(shù)法 引自 GB/T 《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗法》中大腸菌群的檢驗，為我國大多數(shù)衛(wèi)生單位和水廠所使用，食品企業(yè)檢驗所用水一般也采用此法。 水樣放置過程中，內(nèi)含的細(xì)菌數(shù)目和類型會發(fā)生變化，所以要求水樣品應(yīng)于6～ 10℃貯存，并不超過 6h。 （ 3）分