【正文】 離培養(yǎng) 在指示性培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣的發(fā)酵管中的發(fā)酵液分別接種在 EMB（伊紅美藍瓊脂）平板上劃線分離，置于 36 士 1℃培養(yǎng) 18～ 24h，觀察菌落形態(tài)，挑取符合下列特征的菌落作為革蘭氏染色、鏡檢和證實試驗。如所有乳糖發(fā)酵管均陰性時，可報告總大腸菌群未檢出。首先學到的就是將來作為一名質檢人員所必須的嚴謹性，做事要認真，因為錯誤的說據(jù)比沒有數(shù)據(jù)更可怕。這在以后的工作和學習中是我們都應該做好的。 在在以后的學習中要更加的注重自己能力的培養(yǎng)，在學習好文化科知識的同時把自己的學習能力，管理能力，創(chuàng)新能力同步提升上去，這樣自己才能在以后的工作中更好的立于不敗之林。因為我們做實驗都是以團隊的形式做的，在這次的實驗中讓我們了 解到了。還是堅持到了最后。 項目三 革蘭氏染色 實驗原理： 通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。 （ 5）結果報告 凡是在乳糖膽鹽發(fā)酵管產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，在指示性培養(yǎng)基上能生長的，革蘭 氏染色為陰性的無芽孢桿菌，在復發(fā)酵管中產(chǎn)酸、產(chǎn)氣的，即說明有大腸菌群的細菌存在 — 大腸菌群陽性；有一項不符的，即說明無大腸菌群的細菌存在大腸菌群陰性。 檢驗水源水時，如污染較 嚴重，應加大稀釋度，可接種 甚至，每個稀釋度接種 5 管，每個水樣共接種 15 管。取樣時，用右手握瓶，左手啟開瓶塞，用覆蓋瓶口的紙托住瓶塞，收集樣品后，連同覆蓋紙一起將瓶口塞好，并用線繩在原處扎好。 1℃培養(yǎng) 24～ 48ｈ，觀察產(chǎn)氣情況。同時取 1mL 生理鹽水加入無菌平皿作空白對照。 2h，觀察產(chǎn)氣情況。 每個樣品，選擇 3 個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液 （液體樣品可以選擇原液），每個稀釋度接種 3 管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（ LST）肉湯，每管接種 1mL（如接種量超過 1mL，則用雙料 LST 肉湯）， 36177。 圖 放好倒置杜氏管的試管 2．培養(yǎng)基及試劑 月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（ Lauryl Sulfate Tryptose， LST）肉湯、煌綠乳糖實驗報告 黃河水利職業(yè)技術學院 12 膽鹽（ Brilliant Green Lactose Bile， BGLB）肉湯、結晶紫中性紅膽鹽瓊脂（ Violet Red Bile Agar， VRBA）、磷酸鹽緩沖液、無菌生理鹽水、無菌 1mol/LNaOH、無菌 1mol/LHCl、 9mL 乳糖膽鹽發(fā)酵管 12 支、乳糖發(fā)酵管 12 支、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（ EMB） 150mL、革蘭氏染色液 1 套。 熟肉制品的菌落總數(shù)標準強制性國家標準 GB27262021《熟肉制品衛(wèi)生標準》規(guī)定，菌落總數(shù)標準限量值為 ≤ 30000cfu/g，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格熟肉制品。 1醬腌菜的落菌總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB27142021《醬腌菜衛(wèi)生標準》規(guī)定，醬腌菜產(chǎn)品的大腸菌群不得超過 30MPN/100g，若超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格醬腌 1食糖的落菌總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB131042021《食糖衛(wèi)生標準》規(guī)定，白砂糖、綿白糖的菌落總數(shù)不得超過 100cfu/g，超過國家標準規(guī)定可判斷為 不合格糖制品。 食醋的落菌總數(shù)標準依據(jù)國家強制性標準 GB27192021《食醋衛(wèi)生標準》規(guī)定，食醋中菌落總數(shù)不得超過 10000cfu/mL ，超過國家標準規(guī)定可判斷為不合格食醋。 （ 2）菌落數(shù)大于或等于 100cfu 時，第 3 位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后，取前 2 位數(shù)字，后面用 0 代替位數(shù)；也可用 10 的指數(shù)形式來表示， 按“四舍五入”原則修約后，采用兩位有效數(shù)字。 4．菌落總數(shù)的計算方法 （ 1）若只有一個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內，計算兩個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應稀釋倍數(shù)，作為每 g（ mL）樣品中菌落總數(shù)結果。 （ 2）如果樣品中可能含有在瓊脂培養(yǎng)基表面彌漫生長的菌落時，可在凝固后的瓊脂表面覆蓋一薄層瓊脂培養(yǎng)基（約 4mL），凝固后翻轉平板，按上述條件進行培養(yǎng)。同時，分別吸取 1mL 空白稀釋液加入兩個無菌平皿內作空白對照。菌落總數(shù)主要作為判別食品被污染程度的標志，也可以應用這一方 法觀察細菌在食品中繁殖的動態(tài)，以便對被檢樣品進行食品安全與質量評價時提供依據(jù)。實驗報告 黃河水利職業(yè)技術學院 微生物綜合 實驗 報告 姓名：楊延景 班級：食品 1101 學號： 2021040632 指導老師：郭永 實驗報告 黃河水利職業(yè)技術學院 2 目錄 項目一 食品中菌落總數(shù)的測定 （一） 前言 ………………………………………………………… 3 （二） 實驗目的 …………………………………………………… .3 （三） 實驗原理 ………………………………………………… . 3 （四） 實驗器材 ……………………………………………… …… 3 （五） 實驗步驟 …………………………………………………… 4 （六） 實驗結果以及分析 ……………………………………… 7 （七） 國標中微生物菌落總數(shù)標注 ......................7 項目二 大腸菌群的測定 （八） 實驗目的…………………………………………………… 9 （九） 實驗原理……………………………………………… 9 （十） 實驗器材……………………………………………………